蒙脫石影響泥鰍肝臟內鹽酸左旋氧氟沙星分布的研究

姚俊濤?姜萱?李財進?梅富琪?錢坤

摘要：目的研究蒙脫石對泥鰍肝臟中鹽酸左氧氟沙星分布的影響。方法選取30克左右的泥鰍，分成7組，分別為空白組，高、中、低濃度的鹽酸左氧氟沙星組，高、中、低濃度蒙脫石與中鹽酸左氧氟沙星組合組，灌胃給藥，在30min、45min、60min、75min、1.5h、4.5h、6h、7.5h、9h、54h、72h時間點各取樣6個，處理后高效液相檢測濃度。結果蒙脫石不改變泥鰍體內肝臟的鹽酸左氧氟沙星達峰時間，但是改變了藥峰濃度。結論蒙脫石鹽酸左氧氟沙星的吸附作用，增大了泥鰍肝臟體內的藥峰濃度。

關鍵詞：泥鰍;肝臟;鹽酸左氧氟沙星;蒙脫石

泥鰍是一種肉質較為鮮美、口感細嫩小型魚類，具有雜食的特點【1】，營養價值較高。鹽酸左氧氟沙星為氧氟沙星的左旋體，屬于三代喹諾酮抗菌藥物，比氧氟沙星高一倍左右的抗菌活性【2】，在肝臟部位的代謝率低，血藥濃度較高【3】，不良反應少【4】，抗菌活力強【5-6】，通常用于敏感菌引起的系統感染，包括枸櫞酸桿菌、大腸埃希菌、沙門菌屬等活性較強的革蘭氏陰性菌。常用于魚類的爛鰓病、腸炎、爛尾癥等疾病防治。蒙脫石是一種特殊的火山巖在堿性環境下變成的硅鋁酸鹽粘土礦石【7】，對致病菌有很強的吸附、固定、滅活以及排出的能力【8】對消化道的粘膜可以起到覆蓋作用，臨床上可用于治療腹瀉和其他一些胃腸道疾病。蒙脫石具有吸附性能【9】和凝膠特性，因而常常與喹諾酮類藥物共用【10】。

一、材料與方法

（一）實驗動物

泥鰍其質量為30±3克，購于湖州養殖場，太陽暴曬的水中養殖十日。

（二）試劑和儀器

鹽酸左氧氟沙星原料藥，湖北鑫潤德化工有限公司生產，蒙脫石，湖北金細蒙脫石科技有限公司生產，高效液相色譜分析儀LC-20AT，島津公司生產。

（三）給藥劑量與分組

按照每克泥鰍活重計，高、中、低劑量鹽酸左氧氟沙星分別為0.0025mg、0.0075mg、0.0225mg，蒙脫石高、中、低劑量分別為0.005mg、0.015mg、0.045mg。

實驗共設7組：高、中、低鹽酸左氧氟沙星組，中劑量鹽酸左氧氟沙星+高、中、低蒙脫石組，空白組。

（四）取樣與樣品處理

灌胃給藥后，根據預實驗，分別在15min、30min、45min、60min、75min、3h、6h、9h、12h、16h、24h、48h、60h、72h時間點取樣，每組取樣6條，處死后取肝臟，稱重后離心管內零下10℃保存。

取出保存的肝臟樣品，置于室溫下自然解凍，加入1mL超純水和3mL丙酮，漩渦振蕩儀振蕩3分鐘，4℃，10000r/min離心8分鐘;上清液轉移到新的10mL離心管中，加入1mL0.040g/mL的NaC，100μL氨水和3mL二氯甲烷，漩渦振蕩1分鐘，4℃，6000r/min離心6分鐘;有機相轉移到新的離心管，剩余液體再加入3mL二氯甲烷，漩渦振蕩1分鐘，4℃，6000r/min離心6分鐘，取有機相，合并2次的有機相，恒溫干燥;加入1mL10%乙腈和3mL正己烷，漩渦振蕩2分鐘，4℃，6000r/min離心6分鐘，棄有機相，重復一次此步驟;流動相定容至2ml。

色譜條件：C18柱，柱溫32℃，0.8mL/min流速，流動相：10%乙腈與0.04mol/L檸檬酸（pH4.0）等體積混合，進樣量20μL。

二、結果與討論

（一）標準曲線

將段鹽酸左氧氟沙星的實測濃度設為橫坐標，將所得峰面積設為縱坐標，回歸后的方程為y=361.09x+366，R2=0.9988.

（二）精密度

上午高、中、低濃度的相對標準偏差分別為17.54%、14.08%、13.35%，下午分別為17.39%、13.25%、16.28%;日間高、中、低濃度的相對標準偏差分別為16.37%、13.77%、13.05%。

（三）回收率

5mg/L、10mg/L、20mg/L濃度的回收率分別為：108.07%、96.08%、98.26%。

（四）無蒙脫石的藥物殘留規律

不同時間點，高、中、低濃度的鹽酸左氧氟沙星在肝臟中殘留變化見圖1，由圖可知，肝臟中藥物在4.5h可以達到峰值。從30min至4.5h階段肝臟中的藥物濃度隨時間的增加而上升，隨著時間的推移泥鰍肝臟中的鹽酸左氧氟沙星藥物濃度逐漸降低，并最終趨向于0。

圖1 鹽酸左氧氟沙星在肝臟中殘留變化圖

（五）蒙脫石對藥物殘的影響

不同濃度蒙脫石條件下，肝臟中鹽酸左氧氟沙星達峰時間仍然在4.5h左右，但是藥峰濃度明顯增高，增高量與蒙脫石濃度呈正相關。

蒙脫石是一種含水鋁硅酸鹽構成的礦物，顆粒細小，粒徑約在0.2～1微米之間，有膠體分散特征，對喹諾酮類藥物包括鹽酸左旋氧氟沙星在內的一系列藥物具有很好的吸附作用。本實驗中在加入蒙脫石后，泥鰍肝臟中的藥物峰值高于不加蒙脫石，特別是高濃度和中濃度的蒙脫石，明顯增加了藥峰濃度，這也驗證了蒙脫石對鹽酸左旋氧氟沙星的吸附作用，促進了肝臟中藥物濃度的增高。

參考文獻：

[1]儂科.泥鰍養殖技術匯總[N].東方城鄉報，2019（7）：1-2.

[2]劉一曦.鹽酸左氧氟沙星替代標準三聯中的阿莫西林或克拉霉素治療幽門螺旋桿菌感染的療效比較分析[J].中外醫療，2019（21）：115-117.

[3]王秋華.眼鏡蛇肌肉注射鹽酸左氧氟沙星血藥濃度變化規律的初步研究[J].獸醫雜志，2016（11）：110-112.

[4]劉燕.抗菌藥物致3例不良反應的分析[R].蘇州大學附屬張家港醫院藥學論文，2019，9（2）：146-148.

作者簡介：

姚俊濤（1998—），男，漢族，浙江杭州人，學歷：本科，從事藥學研究;

李財進（1998—），男，漢族，安徽安慶人，學歷：本科，從事藥學研究;

姜萱（1999—），女，漢族，內蒙古赤峰人，學歷：本科，從事藥學研究;

梅富琪（2000—），男，漢族，浙江溫州人，學歷：本科，從事藥學研究;

錢坤（1969—），男，漢族，安徽省銅陵人，湖州師范學院，藥學博士，副教授，從事生物技術藥物研究。