辣木葉提取物對(duì)2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)的影響

趙燦 劉翠翠 隋月林 朱建忠

【中圖分類號(hào)】R473.71 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-6525（2020）05-00-01

【摘要】目的：分析辣木葉提取物對(duì)2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)影響情況。方法：選擇60只雄性SD大鼠為實(shí)驗(yàn)樣本。將其分為辣木葉提取物干預(yù)組、糖尿病組以及正常對(duì)照組3組，每組各20只。全面探究辣木葉提取物對(duì)2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)的影響情況。結(jié)果：糖尿病小鼠血糖以及血脂平明顯比辣木葉提取物干預(yù)組、正常組要高;糖尿病組大鼠的脂肪變性同時(shí)合并較為明顯的肝細(xì)胞壞死、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。另外，其肝臟GR mRNA表達(dá)量與蛋白表達(dá)水平明顯上升。與之相比，辣木葉提取物干預(yù)組大鼠血生化指標(biāo)更為接近正常水平，其炎細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象以及肝細(xì)胞脂肪變性、肝細(xì)胞壞死情況明顯比糖尿病組大鼠要好。結(jié)論：通過(guò)辣木葉干預(yù)以后，糖尿病大鼠肝臟內(nèi)GR基因mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量顯著下降。辣木葉提取物能夠發(fā)揮出減少2型糖尿病大鼠肝臟 GR mRNA表達(dá)以及蛋白表達(dá)的效用。

【關(guān)鍵詞】辣木葉提取物;2型糖尿病;肝臟;受體;糖皮質(zhì)激素;基因表達(dá)

【中圖分類號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-6525（2020）05-000-01

最近幾年，辣木葉提取物憑借著有效的抗氧化以及清除自由基效用，進(jìn)而受到學(xué)術(shù)界的重視[1]。結(jié)合實(shí)際情況，本文全面探究辣木葉提取物針對(duì)于2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)影響情況，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

選擇60只雄性SD大鼠為實(shí)驗(yàn)樣本。體重為150-180g。將其分為辣木葉提取物干預(yù)組、糖尿病組以及正常對(duì)照組3組，每組各20只。針對(duì)于辣木葉提取物干預(yù)組以及糖尿病組，均喂養(yǎng)高脂飼料，時(shí)間為一個(gè)月。目的在于全面誘發(fā)大鼠胰島素抵抗。針對(duì)于辣木葉提取物干預(yù)組以及糖尿病組，在對(duì)其禁食12h之后為其腹腔內(nèi)注射劑量為30mg/kg的鏈脲佐菌素。完畢之后72h，測(cè)定其空腹血糖情況。倘若該值8mmol/L以上，表明模型制作成功。

對(duì)照組大鼠于腹腔內(nèi)注射等容積的枸櫞酸緩沖液。針對(duì)于辣木葉提取物干預(yù)組實(shí)施劑量為50mg. Kg-1.d-1辣木葉提取物連續(xù)灌胃，時(shí)間為12周。糖尿病組以及對(duì)照組使用等容積的0.9%NS溶液，時(shí)間相同。在開(kāi)展相關(guān)實(shí)驗(yàn)期間，辣木葉干預(yù)組以及2型糖尿病組均繼續(xù)給予高脂飲食。而正常對(duì)照組，則實(shí)施普通飲食。所有動(dòng)物均自由飲水和進(jìn)食，完成實(shí)驗(yàn)之后禁食12h，人道處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

1.2方法

完成上述處理之后取血，對(duì)上述樣本的血液開(kāi)展生化檢驗(yàn)，測(cè)定血脂、血糖水平。利用放免法對(duì)血液樣本內(nèi)的胰島素水平加以檢測(cè);同時(shí)HE染色光鏡下查看肝臟組織形態(tài)學(xué)變化。利用RT-PCR測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣本肝臟組織GR mRNA表達(dá)情況。針對(duì)于實(shí)驗(yàn)樣本肝組織蛋白表達(dá)情況，則利用免疫組化法完成檢測(cè)工作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)原理

實(shí)驗(yàn)利用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對(duì)數(shù)據(jù)內(nèi)的計(jì)量資料開(kāi)展多組比較單因素方差分析LSD法完成計(jì)算，若方差不齊時(shí)，則開(kāi)展秩和檢驗(yàn)，當(dāng)p<0.05時(shí)，證實(shí)相關(guān)數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)樣本各項(xiàng)血生化指標(biāo)改變?cè)斍?/p>

詳細(xì)情況見(jiàn)表1。

2.2實(shí)驗(yàn)樣本肝臟病理改變情況

通過(guò)肝臟組織HE染色切片表明，對(duì)照組大鼠沒(méi)有出現(xiàn)脂肪變性與炎細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象;糖尿病組大鼠肝細(xì)胞存在脂肪變性、肝小葉結(jié)構(gòu)異常，同時(shí)存在多灶區(qū)肝細(xì)胞點(diǎn)樣壞死。同時(shí)合并肝臟內(nèi)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)與匯管區(qū)域混合炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。辣木葉提取物干預(yù)組大鼠的肝細(xì)胞脂肪變性情況好于糖尿病組。

2.3肝臟組織GR mRNA表達(dá)情況

正常組大鼠GR mRNA表達(dá)情況為0.43±0.30;糖尿病大鼠GR mRNA表達(dá)情況為0.91±0.50。2組相比，P<0.05。干預(yù)組GR mRNA達(dá)情況為0.49±0.31，相較于糖尿病組，p<0.05。

2.4 GR免疫組化結(jié)果情況

正常組內(nèi)，絕大部分肝細(xì)胞和中度表達(dá)GR，肝細(xì)胞為棕黃色;糖尿病組所有肝細(xì)胞核均呈現(xiàn)出了GR表達(dá)現(xiàn)象，表達(dá)量顯著加強(qiáng)，核呈纖維棕黑色。辣木葉提取物干預(yù)組肝細(xì)胞核GR表達(dá)量減弱，接近與正常組水平。

3 討論

本組實(shí)驗(yàn)研究表明，糖尿病小鼠血糖以及血脂平明顯比辣木葉提取物干預(yù)組、正常組要高;糖尿病組大鼠的脂肪變性同時(shí)合并較為明顯的肝細(xì)胞壞死、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。另外，其肝臟GR mRNA表達(dá)量與蛋白表達(dá)水平明顯上升。這也在根本上表明了糖尿病小鼠存在血脂血糖代謝紊亂與脂肪性肝炎癥狀。與之相比，辣木葉提取物干預(yù)組大鼠血生化指標(biāo)更為接近正常水平，其炎細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象以及肝細(xì)胞脂肪變性、肝細(xì)胞壞死情況明顯比糖尿病組大鼠要好。

通過(guò)辣木葉干預(yù)以后，糖尿病大鼠肝臟內(nèi)GR基因mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量顯著下降。這也證實(shí)了辣木葉提取物能夠發(fā)揮出減少2型糖尿病大鼠肝臟 GR mRNA表達(dá)以及蛋白表達(dá)的效用。其可能為減少2型糖尿病實(shí)驗(yàn)樣本血脂、血糖值與減少肝內(nèi)脂肪堆積量的重要性機(jī)制。

參考文獻(xiàn)：

[1]董笑克，劉銅華，常青， 等.辣木葉醇提物對(duì)自發(fā)型肥胖型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝病的影響[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2019，12（8）：1149-1153.

[2]賀敏， 李雅萍， 黃仁彬. 抗糖尿病黃酮類活性成分的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志， 2009， 029（017）：1481-1483.

作者單位：滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河北滄州? 061000