胰島素休克的實驗動物選擇研究

王莉

[摘 要]該文探究了幾種魚的胰島素休克現象。將實驗魚放入不同濃度的胰島素水溶液中，待出現驚厥時將魚轉至10%萄葡糖溶液中，觀察其恢復情況。結果顯示，在3IU/mL胰島素溶液中，出現休克的時間分別為斑馬魚（66.78±6.80）min、麥穗魚（39.33±8.35）min、中華鳑鲏（50.00±10.21）min;在4IU/mL胰島素溶液中，出現休克的時間分別為斑馬魚（30.67±6.47）min、麥穗魚（16.22±5.22）min、中華鳑鲏（15.86±9.70）min。每種實驗魚在3IU/mL和4IU/mL兩種胰島素溶液中出現休克的時間之間均存在極顯著差異（P<0.01）。三種魚都可作為胰島素休克實驗的實驗材料。

[關鍵詞]中華鰟鮍;麥穗魚;斑馬魚;胰島素休克

[基金項目]2019年度國家級一流本科專業建設點“醫學檢驗技術”項目（教高廳函〔2019〕46號）;2015年度寧夏回族自治區重點建設專業“醫學檢驗技術”項目（寧教高辦〔2015〕109號）

[作者簡介]王 莉（1978—），女，陜西寶雞人，醫學檢驗學士，寧夏醫科大學臨床醫學院檢驗學系實驗師，主要從事臨床生物化學檢驗研究。

[中圖分類號] R-33[文獻標識碼] A[文章編號] 1674-9324（2020）33-0145-02[收稿日期] 2020-03-19

胰島素休克，也稱“低血糖驚厥”，是指給小鼠注射胰島素或者將魚置入胰島素水溶液中，造成的動物實驗性低血糖，外部表現為驚厥或昏迷[1-3]。對鄉村中學而言，用小鼠做實驗材料，采購不易且價格較貴。改用斑馬魚、麥穗魚和中華鳑鲏等，材料易得，價格便宜，簡便有趣。

一、材料和儀器

（一）實驗動物

三種實驗魚均購于銀川市勝利街花鳥魚寵市場，實驗前均作24h的饑餓處理。

斑馬魚，體長（33.1±2.51）mm，體質量（0.284±0.030）g。麥穗魚，體長（39.4±3.27）mm，體質量（0.495±0.127）g。中華鳑鲏，體長（34.5±1.78）mm，體質量（0.578±0.067）g。實驗用水的pH值為7.0～7.5，水溫（20±2）℃。

（二）實驗藥品

胰島素注射液（400IU/10mL），浙江萬邦生化醫藥股份有限公司產品（批號21510208）。10%萄葡糖溶液，實驗時現配。實驗用水：自來水煮沸后冷卻至室溫。

（三）實驗儀器用品

1mL注射器、50mL燒杯、500mL燒杯、50mL量筒、小魚網、電子天平、鑷子、電子表、紅外溫度計、pH試紙和標簽紙等。

二、方法

（一）實驗設計

準備3個50mL燒杯，分別加入40mL實驗用水，然后各自放入5尾魚。實驗組加入一定量胰島素注射液（400IU/10mL），混勻得到3IU/mL和4IU/mL單位胰島素溶液，對照組不加。觀察魚在不同單位胰島素溶液中的行為反應。以喪失平衡能力及游泳能力作為判定標準，記錄每條魚出現休克現象所經歷的時間。當魚出現休克后，將其及時轉入10%葡萄糖溶液中急救，觀察行為變化，記錄蘇醒條數，計算死亡率。以上實驗均重復三次。

（二）統計分析

試驗數據以±s表示，用Excel軟件進行處理。采用成組數據平均數比較的t檢驗，P<0.05，為顯著性差異，P<0.01，為極顯著差異。對三種魚在不同單位胰島素溶液中出現休克的時間之間做方差分析，比較差異顯著性。

三、結果與分析

（一）不同單位胰島素溶液中斑馬魚出現休克的時間

由表1可知，斑馬魚在對照組清水中，不出現休克現象;在3IU/mL胰島素溶液中，65分鐘左右都會出現胰島素休克現象;在4IU/mL胰島素溶液中，30分鐘左右都會出現胰島素休克現象。將出現休克的魚及時轉入10%葡萄糖溶液進行急救，大部分恢復正常，有20%左右的斑馬魚死亡。斑馬魚在3IU/mL、4IU/mL胰島素溶液中的休克時間之間存在極顯著性差異（P<0.01）。

（二）不同單位胰島素溶液中麥穗魚出現休克的時間

由表2可知，麥穗魚在對照組清水中，不出現休克現象;在3IU/mL胰島素溶液中，40分鐘左右都會出現胰島素休克現象;在4IU/mL胰島素溶液中，15分鐘左右都會出現胰島素休克現象。將出現休克的魚及時轉入10%葡萄糖溶液進行急救，但急救無效，死亡率均為100%。麥穗魚在3IU/mL、4IU/mL胰島素溶液中的休克時間之間存在極顯著性差異（P<0.01）。

（三）不同單位胰島素溶液中中華鳑鲏出現休克的時間

由表3可知，中華鳑鲏在對照組清水中，不出現休克現象;在3IU/mL胰島素溶液中，50分鐘左右都會出現胰島素休克現象;在4IU/mL胰島素溶液中，15分鐘以上都會出現胰島素休克現象。將出現休克的魚及時轉入10%葡萄糖溶液進行急救，但急救無效，死亡率均為100%。中華鳑鲏在3IU/mL、4IU/mL胰島素溶液中的休克時間之間存在極顯著性差異（P<0.01）。

（四）三種魚在3IU/mL胰島素溶液中出現胰島素休克時間的比較

小寫字母不同（a，b）表示兩者之間有顯著差異（P<0.05）;大寫字母不同（A，B）表示兩者之間有極顯著差異（P<0.01）。

由表4可知，在3IU/mL胰島素溶液中出現休克時間的差異，斑馬魚與中華鳑鲏、麥穗魚相比均達極顯著水平（P<0.01），而麥穗魚與中華鳑鲏相比不明顯。

（五）三種魚在4IU/mL胰島素溶液中出現胰島素休克時間的比較

小寫字母不同（a，b）表示兩者之間有顯著差異（P<0.05）;大寫字母不同（A，B）表示兩者之間有極顯著差異（P<0.01）。

由表5可知，在4IU/mL胰島素溶液中出現休克時間的差異，斑馬魚與中華鳑鲏、麥穗魚相比均達極顯著水平（P<0.01），而麥穗魚和中華鳑鲏相比不明顯。

四、結論

在胰島素休克實驗中，對斑馬魚、麥穗魚和中華鳑鲏在3IU/mL、4IU/mL胰島素溶液中經歷一定時間均出現休克現象。在3IU/mL溶液中，麥穗魚休克耗時接近一節課，斑馬魚和中華鳑鲏均超過一節課;在4IU/mL溶液中，麥穗魚和中華鳑鲏休克耗時在15min左右，斑馬魚在30min左右。從所需費用來看，麥穗魚和中華鳑鲏大約是小鼠的10%，斑馬魚大約是小鼠的45%。因此，在胰島素休克實驗動物選擇的經濟性和現實性上，斑馬魚、麥穗魚和中華鳑鲏所需遠遠低于小鼠。

參考文獻

[1]韋建恒.胰島素低血糖休克[J].生物學通報，1992，27（3）：49.

[2]沈旭明.胰島素驚厥實驗材料的選用與實驗結果的分析[J].生物學雜志，2000，17（2）：32+8.

[3]蘇永春，勾影波.用金魚或鯽魚做胰島素休克實驗[J].生物學通報，1995，30（4）：32.

Study on the Selection of Experimental Animals for Insulin Shock

WANG Li

（School of Clinical Medicine， Ningxia Medical University， Yinchuan， Ningxia 750004， China）

Abstract： The objective of this experiment is to explore the phenomenon of insulin shock in several kinds of fish. The experimental fish were put into different concentrations of aqueous insulin solution. When convulsions occurred， the fish were transferred to 10% glucose solution and their recovery was observed. According to the results， in 3 IU/mL insulin solution， the time of insulin shock for zebrafish， pseudorasbora parva and rhodeus sinensis gunther was respectively （66.78±6.80）min， （39.33±8.35）min， and （50.00±10.21）min; in 4 IU/mL insulin solution， the time of insulin shock for the three kinds of fish was respectively （30.67±6.47） min， （16.22±5.22） min， and （15.86±9.70）min. For each of the three kind of experimental fish， there was a very significant difference （P<0.01） in the time of insulin shock when it was put in 3 IU/mL and 4 IU/ mL insulin solution. The three kinds of fish could all be used as experimental animals for insulin shock experiments.

Key words： rhodeus sinensis gunther; pseudorasbora parva; zebrafish; insulin shock