2 000例孕25～32周婦女宮頸分泌物中的細菌培養結果及耐藥性分析

蘇廣龍 林玉婷 姜雪梅

(新疆烏魯木齊市婦幼保健院檢驗科,烏魯木齊市 830001,電子郵箱：su07539@163.com)

孕期生殖道感染是孕婦妊娠期間常見的生殖道疾病之一,妊娠期是女性的特殊時期,孕婦體內激素水平發生改變,引起生殖道微生物菌群失調,導致病原菌過度生長,增加孕婦生殖道感染概率[1]。隨著臨床上抗生素的大量使用,致病菌的耐藥率不斷增長,對孕婦危害較大,成為臨床抗感染的重點和難點問題[2]。同時病原菌還能經胎盤傳播引起胎兒宮內感染,造成流產、早產、死胎等[3]。由于孕期的特殊性,限制了抗菌藥物的品種及給藥途徑,因此,分析孕婦宮頸分泌物細菌分布及耐藥情況對臨床抗感染治療,降低母嬰感染率具有重要意義[4]。本研究分析2 000例孕25～32周婦女宮頸分泌物的細菌培養結果及耐藥情況,為臨床抗感染治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年3月至2019年3月在本院產科進行產檢的2 000例孕婦作為研究對象。納入標準：(1)孕25～32周孕婦；(2)孕婦自愿進行宮頸分泌物培養,簽署知情同意書。排除標準：(1)孕前有陰道炎或宮頸炎者；(2)近期有抗菌藥物服用史者；(3)合并嚴重循環系統疾病者；(4)合并嚴重心、肝、腎等臟器功能障礙者。孕婦年齡20～36(25.27±2.63)歲,孕周25～32(30.18±0.90)周,孕次1～4(1.52±0.24)次。

1.2 試劑與儀器 血平皿、巧克力平皿、麥康凱平皿、中國藍平皿購自廣東環凱微生物科技公司,藥敏片購自杭州微生物試劑有限公司,標準菌株金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、無乳鏈球菌(ATCC12386)、糞腸球菌(ATCC33186)、大腸埃希菌(ATCC25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC700603)、白色念珠菌(ATCC90028)均由國家衛生健康委臨床試驗中心提供,VITEK-32全自動微生物分析儀購自法國生物梅里埃公司。

1.3 宮頸分泌物采集 采用擴陰器暴露孕婦宮頸,無菌棉簽拭去宮口黏液,再用無菌棉拭子探入宮頸管內1～2 cm處,旋轉2～3周,置于無菌試管中,送檢。

1.4 細菌鑒定與藥敏試驗 (1)細菌鑒定：將宮頸分泌物接種于血平皿、巧克力平皿、麥康凱平皿、中國藍平皿上,37℃培養18～24 h,采用稀釋涂布平板法對菌株進行分離，采用全自動微生物分析儀進行菌種鑒定；(2)藥敏試驗：采用K-B法對分離菌株進行耐藥性檢測,其中革蘭陽性菌所用抗菌藥物為青霉素、氨芐西林、苯唑西林、慶大霉素、頭孢曲松、頭孢唑林、萬古霉素、利奈唑胺、阿莫西林/克拉維酸、四環素、紅霉素、克林霉素、利福平、左氧氟沙星、環丙沙星；革蘭陰性菌所用抗菌藥為氨芐西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢西丁、頭孢曲松、頭孢唑林、頭孢呋辛、頭孢吡肟、頭孢他啶、慶大霉素、阿米卡星、環丙沙星、左氧氟沙星、氨曲南、亞胺培南、美羅培南、阿莫西林/克拉維酸、復方新諾明；真菌所用抗菌藥為氟康唑、酮康唑、伏立康唑、伊曲康唑、氟胞嘧啶、制霉菌素、兩性霉素B。根據美國臨床實驗室標準化協會的相關標準[5]對耐藥結果進行判定,耐藥率=耐藥株數/總株數×100%。

1.5 統計學分析 采用WHONET 5.6軟件、Excel軟件進行統計分析。

2 結 果

2.1 孕婦宮頸分泌物的細菌分布情況 2 000例孕25～32周孕婦的宮頸分泌物中共檢出細菌426株,檢出率為21.30%。其中革蘭陽性菌178株(41.78%),優勢菌為金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌及糞腸球菌；革蘭陰性菌189株(44.37%),優勢菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌；真菌59株(13.85%),優勢菌為白色念珠菌、光滑假絲酵母菌。大腸埃希菌中產超廣譜β內酰胺酶47株(36.15%),肺炎克雷伯菌中產超廣譜β內酰胺酶2株(5.00%)。見表1。

表1 孕婦宮頸分泌物的細菌分布情況(n=426)

2.2 孕婦宮頸分泌物中優勢革蘭陽性菌耐藥率 金黃色葡萄球菌對青霉素、氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸、克林霉素的耐藥率均較高,分別為84.29%、80.00%、61.43%、55.71%；無乳鏈球菌對氨芐西林、四環素、紅霉素的耐藥率均較高,分別為70.37%、70.37%、55.56%；凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、氨芐西林、苯唑西林、克林霉素的耐藥率均較高,分別為75.00%、60.71%、53.57%、53.57%；糞腸球菌對頭孢曲松、利福平、克林霉素、四環素、紅霉素耐藥率高,分別為100.00%、93.33%、86.67%、80.00%、60.00%。見表2。

表2 孕婦宮頸分泌物中優勢革蘭陽性菌耐藥率

2.3 孕婦宮頸分泌物中優勢革蘭陰性菌耐藥率 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對氨芐西林、復方新諾明的耐藥率均較高,其中大腸埃希菌的耐藥率分別為68.46%、66.15%,肺炎克雷伯菌的耐藥率分別為82.50%、70.00%,見表3。

表3 孕婦宮頸分泌物中優勢革蘭陰性菌耐藥率

2.4 孕婦宮頸分泌物中優勢真菌耐藥率 白色念珠菌對酮康唑、制霉菌素、兩性霉素B的耐藥率均較低,分別為2.08%、0、2.08%；光滑假絲酵母菌對酮康唑、兩性霉素B均無耐藥性,見表4。

表4 孕婦宮頸分泌物中優勢真菌耐藥率

3 討 論

生殖系統中的病原菌沿宮頸上行感染是引起胎膜早破、先兆流產的最重要原因,有研究報道,檢測孕婦生殖道分泌物致病菌對胎膜早破有較高的預測價值[6]。同時也有學者發現,檢測孕婦陰道或宮頸分泌物,有助于為致病菌感染高風險孕婦合理選擇抗菌藥物,延長孕周,改善妊娠結局[7]。因此,對孕晚期孕婦進行病原菌篩查,對孕婦及胎兒健康極為重要。

本研究對接受產檢的2000例孕25～32周孕婦的宮頸分泌物進行檢測,共檢出病原菌426株,檢出率為21.30%,略低于郭梅等[8]報道的24.11%。其中革蘭陽性菌178株(41.78%),優勢菌為金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌及糞腸球菌；革蘭陰性菌189株(44.37%),優勢菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌；真菌59株(13.85%),與王芊等[9]報道的臨產婦宮頸分泌物中以金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌為主要病原菌相符。無乳鏈球菌又稱B群鏈球菌,主要定植于女性生殖道,是引起孕婦生殖道感染與新生兒感染的重要致病菌之一,本研究中共檢出無乳鏈球菌54株(12.68%),略高于曾選等[10]報道的9.04%,提示應加強對孕婦感染無乳鏈球菌的防范,以降低其感染率及孕期并發癥的發生率。本研究對優勢革蘭陽性菌的藥敏試驗檢測結果顯示,金黃色葡萄球菌對青霉素、氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸、克林霉素的耐藥率均較高,無乳鏈球菌對氨芐西林、四環素、紅霉素的耐藥率均較高,凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、氨芐西林、苯唑西林、克林霉素的耐藥率均較高,糞腸球菌對頭孢曲松、四環素、紅霉素、克林霉素、利福平的耐藥率均較高,與曾選[11]的研究結果相似,提示應加強對孕婦金黃色葡萄球菌的篩查,并減少青霉素、氨芐西林等高耐藥性藥物的使用,以減少耐藥菌株產生。本研究對優勢革蘭陰性菌藥敏試驗檢測結果顯示,大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對氨芐西林、復方新諾明的耐藥率均較高,與秦妍妍等[12]的研究結果相似,提示感染大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的孕婦應謹慎使用氨芐西林、復方新諾明。對優勢真菌的藥敏試驗檢測結果顯示,白色念珠菌對酮康唑、制霉菌素、兩性霉素B的耐藥率較低,尤其對制霉菌素無耐藥性,光滑假絲酵母菌對酮康唑、兩性霉素B均無耐藥性,與李盛等[13]的研究結果相似,但酮康唑屬于美國食品藥物管理局妊娠分級C類藥品,目前關于其對孕婦影響的研究較少,而兩性霉素B治療真菌感染的孕婦時,對胎兒無明顯影響,因此,在治療真菌感染孕婦時選擇制霉菌素或兩性霉素B治療,可能會取得可觀的治療效果。

綜上所述,孕25～32周婦女宮頸分泌物中菌群分布廣,對多種抗菌藥耐藥率高,今后應加強對孕婦宮頸分泌物細菌的耐藥性檢查,特別是對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌耐藥性進行篩查,以指導孕婦合理用藥,減少耐藥菌株產生。