光動力治療對尖銳濕疣HPV DNA載量的影響

路云環 孟憲敏 欒 紅

光動力治療對尖銳濕疣HPV DNA載量的影響

路云環 孟憲敏 欒 紅

目的: 確定光動力治療對尖銳濕疣(CA)人乳頭瘤病毒(HPV)的影響。方法: 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ－PCR)檢測65例CA患者光動力治療前、治療3次后HPV DNA拷貝數。隨訪3個月觀察復發情況,并分析復發與HPV DNA載量的關系。結果: 3次治療后HPV DNA拷貝數(3．10×103)較治療前(5．12×106)顯著下降(P＜0．05)；復發患者(12例)治療前平均拷貝數(4．62× 107)高于未復發患者(6．75×104)(P＜0．05)。結論: 光動力治療CA能顯著降低HPV病毒載量；患者疣體中HPV DNA載量與復發有關。

尖銳濕疣； 人乳頭瘤病毒； 光動力

尖銳濕疣(CA)是由人乳頭瘤病毒(HPV)感染引起常見的性傳播疾病,傳統的治療方法痛苦大、復發率高。光動力療法是利用光動力反應進行疾病診斷和治療的新技術,其選擇性好,創傷小,療效明確,治療CA療效好、安全性高、復發率低。我們采用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測光動力治療對65例CA患者HPV DNA載量的影響和其臨床療效,報道如下。

1 資料與方法

1．1 病例收集 65例CA患者,均選自我院皮膚科門診就診病人,臨床上確診為CA。所有患者入組前簽署知情同意書,皮損用數碼相機拍照存檔,保存治療前后的臨床資料。男35例,女30例,年齡18～59歲,平均31．25歲,病程6天～7個月,平均4．3個月。65例患者男性皮損分布在龜頭、包皮、系帶、冠狀溝、陰莖體、尿道口、陰囊及肛周；女性分布在大小陰唇、陰道口、會陰及肛周。男女皮損平均直徑在1．5 cm以內,皮損數目在5個以內,皮損的顏色為鮮紅色、暗紅色、棕褐色、灰白色。形狀有丘疹狀、雞冠狀、乳頭狀、菜花狀等。納入標準:根據2000年衛生部性病專家咨詢委員會制定的“性病診療規范和性病治療推薦方案”診斷標準確診。排除標準:患者免疫功能低下或長期服用免疫抑制劑；糖尿病患者；全身應用糖皮質激素治療者；合并其他性傳播疾病者；局部采用抗病毒藥物治療或物理治療者；不能定期隨訪者。脫落標準:中途失訪或未按要求完成治療者。本課題參與者全部按要求完成了療程。

1．2 主要儀器和試劑 儀器使用美國ABI 7300實時熒光定量PCR儀,XD－635AB型光動力治療儀(桂林興達光電醫療器械有限公司),試劑采用凱杰生物工程有限公司生產的人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒,5’－氨基酮戊酸(5－ALA,商品名:艾拉,上海復旦張江生物醫藥股份有限公司)。

1．3 方法 于治療前及3次治療后用組織鉗夾取部分疣體組織或用棉拭子刮取原皮損部位皮屑,置入1 mL生理鹽水的無菌試管中待檢,常規預處理樣本后－20℃保存,以備PCR檢測型別。DNA抽提和PCR擴增:采用Real－time PCR(RT－PCR)方法,嚴格按說明書步驟操作。

艾拉光動力治療:治療前取材凍存,在疣體部位放置適當大小的脫脂棉,將溶液滴于脫脂棉,并覆于疣體上,范圍覆蓋至皮損周邊2 cm內正常外觀的皮膚黏膜,20%ALA外用避光封包3 h后,在暗室中采用光動力儀照射。波長:633 nm；能量100 J/cm2；照射距離10～15 cm；照射時間:20 min/部位,每周1次,共3周為1療程。療程結束后隨訪3個月。

療效判定:復發判斷(同時滿足以下兩條):①疣體經過治療后消退,經過一段時間,在無其他HPV接觸傳染條件下又重新出現疣體；②重新出現的疣體一定是在原來感染HPV的部位。所有患者均在第3次光動力治療后半個月、1個月、2個月、3個月進行門診或電話隨訪,隨訪期間患者性生活時帶安全套。

1．4 統計學方法 采用SPSS 11．5版軟件對數據進行統計分析。采用對數平均值法計算HPV DNA平均拷貝數,治療前后比較采用t檢驗,復發率的比較采用χ2檢驗。

2 結果

2．1 治療結果 3次治療后65例患者臨床疣體基本消退,達到臨床治愈。治療后隨訪半個月復發6例,1個月復發5例,2個月復發1例,3個月復發0例,總復發率18．4%。

2．2 光動力治療前后HPV DNA載量關系 治療前65例CA患者HPV DNA拷貝數明顯高于治療3次后,差異有統計學意義(P＜0．05),見表1。

表1 光動力治療前后HPV DNA病毒載量比較

2．3 HPV DNA載量與復發的關系 65例隨訪的CA患者中,53例未復發組治療前HPV DNA病毒載量為6．75×104,12例復發組治療前HPV DNA載量為4．62 ×107。兩組比較具有統計學差異(P＜0．05)。

3 討論

光動力是在患處使用光敏劑,用特定波長、能量的光照射特定時間,可有效殺滅靶細胞,達到治療目的。光動力治療HPV感染主要是破壞含有病毒的角質形成細胞和使沒有包裹的病毒顆粒滅活,導致病毒在早期感染階段被抑制。本資料結果顯示65例CA患者用光動力治療3次后,皮損組織中HPV DNA載量明顯下降,與治療前相比有顯著性差異。提示光動力治療有良好的清除HPV的作用。

CA的復發是臨床上很棘手的問題。導致其復發的因素很多,可能主要與宿主完整的細胞免疫系統平衡失調或缺陷有關。1在感染性疾病中,病原體的致病力與病原體的數量和毒力有直接關系,病原體數量的異常增多將影響CA癥狀是否出現。本研究顯示:未復發組治療前HPV DNA病毒載量與復發組比較有統計學差異,說明病毒載量在CA的復發中起到一定的作用。這與文獻2－4報道一致。因此在CA的治療中應強調早期抗病毒治療,特別是對于高病毒載量的患者,進行正規的治療和隨訪,使病毒載量盡可能下降,從而達到減少復發的目的。

1呂成國．尖銳濕疣159例復發因素分析．醫學信息,2008,22 (9):1637．

2車雅敏,王家璧．人乳頭瘤病毒DNA載量與尖銳濕疣復發的相關性．中國醫學科學院學報,2004,10:558－561．

3張天璐,車雅敏,紀巖文．尖銳濕疣患者HPV型別及DNA載量與復發的關系．山東醫藥,2009,49(40):25－27．

4蔣藝,吳洋,許宏岳．尖銳濕疣患者治療前后人乳頭瘤病毒核酸的熒光定量分析．中華皮膚科雜志,2007,5(40):129－131．

(收稿:2014－01－21 修回:2014－03－13)

Effect of photodynam ic therapy on HPV DNA load in condyloma acum inatum tissue

LU Yun-huan,MENG Xian-m in,LUAN Hong,Department of Dermatology,Liaocheng People's Hospital,Liaocheng 252000

Objective:To determine the effect of photodynamic therapy on human papilloma virus(HPV) DNA load in the lesion of condyloma acuminatum(CA)．Methods:The number of HPV DNA copy in 65 patientswith(CA)were detected by Real－time fluorescence quantitative polymerase chain reaction(FQ－PCR) before the treatmentand after3 times treatment．The patientswere followed－up for relapse after 3months treatment,The correlation between the relapse and thenumber ofHPV DNA copywereanalyzed．Results:The average HPV DNA copy number was(5．12×106)before the treatment and the HPV DNA copy number was (3．10×103)after the treatment,with a significant difference(P＜0．05)．A total of12 patients were relapsed．The average HPV DNA copy number in the relapsed patientswas(4．62×107)before the treatment,which was higher than(6．75×104)in the non－relapsed patients before the treatment(P＜0．05)．Conclusion:Photodynamic therapy can significantly reduce HPV load in the lesion of CA．The recurrence of CA was correlated with the HPV－DNA load before the treatment．

condyloma acuminatum；human papilloma virus；photodynamic therapy

山東省聊城市人民醫院皮膚科,252000