膀胱出口梗阻對大鼠膀胱逼尿肌生物力學特性的影響

陳進軍 刁宏旺 姜俊海 李守林

（深圳市兒童醫院 廣東 深圳 518026）

膀胱的生理功能主要有兩個，即排尿、儲尿，具體表現為儲尿期逼尿肌在容納性、順應性舒張作用良好的情況下將膀胱容量擴大，并對低壓狀態進行保持，對尿失禁的發生進行積極預防，并對上尿路功能進行保護；排尿期逼尿肌將整體協調性收縮速度、強度發揮出來，將膀胱中的尿液有效排空，對殘余尿的出現進行有效預防[1]。本研究探討了大鼠膀胱逼尿肌生物力學特性受到膀胱出口梗阻的影響。

1. 資料與方法

1.1 實驗動物

購買第三軍醫大學實驗動物中心提供的54 只雌性Wistar大鼠，月齡3 ～4 個月，體質量180 ～200g。依據充盈期膀胱壓力分為梗阻2 周逼尿肌穩定組（DS2 組，n=11）、梗阻2 周逼尿肌不穩定組（DI2 組，n=8）、梗阻4 周逼尿肌穩定組（DS4 組，n=15）、梗阻4 周逼尿肌不穩定組（DI4 組，n=10）、對照組或假手術組（C 組，n=10）。

1.2 方法

1.2.1 梗阻模型制作

給予大鼠腹腔注射40mg/kg 1% 苯巴比妥進行麻醉，將切口開在下腹部正中，向尿道探入聚乙烯探子，直徑為1mm，稍微分離近端尿道，用2-0 絲線對尿道進行結扎，以能夠輕易拔出探子、對探子周圍組織進行牽拉能夠隨之移動確定松緊，將探子拔出后將切口關閉。對照組或假手術組不對尿道進行結扎，其余操作同上。

1.2.2 充盈期膀胱壓力測定

給予大鼠皮下注射1g/kg 烏拉坦進行麻醉，幫助大鼠取仰臥位，將其固定下來，經尿道向膀胱插入硬膜外導管，將其和7號針頭連接起來，經三通道將其和微量灌注泵、尿動力儀連接起來。以輕柔的動作對腹部進行按壓，將尿液排凈。以0.2ml/min 的速度給予大鼠膀胱灌注生理鹽水。

1.2.3 離體逼尿肌條制備

對大鼠頭部進行猛擊，使其昏迷，將其下腹部剪開，將其膀胱全切下來，對其質量進行稱量。第一時間在平皿中放置，其盛有4℃ Krebs 營養液，將膀胱體部組織取下來，鏡下解剖，將粘膜仔細剔除，將肌條縱行切取下來，規格為8mm×2mm×2mm，每個膀胱將2 ～3 根肌條制備出來。用絲線結扎肌條兩端，在灌流機槽底部固定下端，其盛有37℃ Krebs 液，在Krebs 液中完全進入肌條，將上端和拉力傳感器連接起來，將拉力傳感器和四通道多功能生理信號放大器連接起來，向計算機中輸入檢測信號。將5%CO2+95%O2混合氣體通入Krebs 液中。氯化氨基甲酰膽堿（Carbachol）收縮試驗：平衡靜息張力到0.5g，依次用濃度為10-7mmol/L、10-6mmol/L、10-5mmol/L、10-4mmol/L、10-3mmol/L、10-2mmol/L 的carbachol 對肌條進行刺激，對肌條產生的收縮力進行測定，將逼尿肌對乙酰膽堿的敏感性反映出來。每種濃度試驗后均對肌條進行3 次沖洗，并進行10min 的平衡，從而將殘留的carbachol 清除。

1.3 統計學方法

2. 結果

2.1 膀胱出口梗阻模型建立情況

梗阻組大鼠的膀胱容量顯著大于對照組（P＜0.05），膀胱濕質量顯著高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 膀胱出口梗阻模型建立情況（±s）

表1 膀胱出口梗阻模型建立情況（±s）

組別 膀胱容量（ml） 膀胱濕質量（g）梗阻組 3.2±1.0 10.3±1.7對照組 1.5±0.4 7.1±1.4 t 4.303 4.541 P＜0.05 ＜0.05

2.2 滴度濃度Carbachol 刺激逼尿肌條產生的收縮力分析

DS2 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著高于C 組（P＜0.05），DS4 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著低于C 組（P＜0.05），DI2 組、DI 組大鼠的逼尿肌條收縮力均顯著低于C 組（P＜0.05）。

2.3 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱順應性改變分析

DS2組、DS4組大鼠的膀胱順應性均顯著高于C組（P＜0.05），DI2 組、DI4 組大鼠的膀胱順應性均顯著低于C 組（P＜0.05），見表2。

表2 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱順應性改變分析（±s，ml/cmH2O）

表2 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱順應性改變分析（±s，ml/cmH2O）

組別 n 膀胱順應性DS2 組 11 0.247±0.083 DI2 組 8 0.108±0.030 DS4 組 15 0.312±0.141 DI4 組 10 0.140±0.054 C 組 10 0.185±0.052

3. 討論

平滑肌是空腔臟器管壁，通常情況下，其功能、長度會隨著腔內壓力的變化而變化，具體表現在能夠正常適應一定范圍內的壓力刺激作用，但是自身生物力學性質會在前內壓力比該范圍大的情況下發生異常[2-3]。因此，在對逼尿肌的生物力學特性進行實驗研究的過程中，對膀胱出口梗阻進行分析具有極為重要的臨床意義[4-5]。相關醫學研究表明[6-7]，梗阻后穩定性、不穩定性逼尿肌收縮性分別有雙相性改變、受損發生，膀胱順應性分別提升、降低，二者顯著相關。本研究結果表明，梗阻組大鼠的膀胱容量顯著大于對照組（P＜0.05），膀胱濕質量顯著高于對照組（P＜0.05）。DS2 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著高于C 組（P＜0.05），DS4 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著低于C 組（P＜0.05），DI2 組、DI 組大鼠的逼尿肌條收縮力均顯著低于C 組（P＜0.05）。DS2 組、DS4 組大鼠的膀胱順應性均顯著高于C 組（P＜0.05），DI2 組、DI4 組大鼠的膀胱順應性均顯著低于C 組（P＜0.05），和上述研究結果一致。

綜上所述，大鼠膀胱逼尿肌生物力學特性受到膀胱出口梗阻的直接影響，值得重視。