1、2 齡烏龜（♀）×黑頸烏龜（♂）雜交F1 代的形態性狀與體質量的相關分析

賀剛，方春林，何力，吳斌，費春平

（1.江西省水產科學研究所，江西 南昌 330039；2.中國水產科學研究院長江水產研究所，湖北 武漢 430223；3.江西金龜王實業有限責任公司，江西 上饒 334400）

烏龜Chinemys reevesii 隸屬龜鱉目Testudinate、龜科Emydidae、烏龜屬，俗稱泥龜、草龜、墨龜，是常見的水生龜種，在中國分布廣泛[1]。黑頸烏龜Chinemys nigricans，俗稱三線龜、彩龜、廣東草龜，亦屬烏龜屬，主要分布于越南以及中國的廣東、廣西等地，數量極為稀少，為國家Ⅱ級重點水生野生動物。

烏龜為常見的養殖龜種之一，但生長速度緩慢；而黑頸烏龜價值高，但適應性較差，數量稀少。為了獲得適于養殖推廣的新品系，由烏龜（♀）×黑頸烏龜（♂）雜交后培育的品種稱為烏黑雜龜，具有品相好、生長快、價值高等優點[2]。

體質量是龜類動物選育的重要經濟性狀，通過測量和篩選形態性狀，確定影響體質量的重要性狀，依據通徑分析的統計，建立估算體質量回歸方程[3-5]，這些方法廣泛應用于養殖實踐中，在蟹、蝦、貝、鱉及魚類等水產動物已有不少報道[6-11]，但在龜類動物選育中的應用甚少[12]。近年來雜交新龜品種日益增加，目前已發現20 多種雜交龜，僅見金石雜龜[13]和烏花雜龜[14，15]的相關報道。本研究采用表型相關分析、通徑分析和多元回歸分析，對烏龜Chinemys reevesii（♀）×黑頸烏龜C.nigricans（♂）雜種F1代群體1、2 齡雌雄F1代雜交龜形態性狀和體質量進行相關性及通徑分析，確定不同階段的群體中形態性狀對質量相的對重要性和優勢性狀的選擇方法，為龜類的養殖提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

2016、2017 年9 月隨機選取雌、雄雜種F1代養殖群體各90 只，來自江西弋陽于2015 年9 月孵出的烏龜（♀）×黑頸烏龜（♂）雜種F1代，在恒溫30℃下飼養至2017 年9 月。

1.2 測定方法

用精確度0.01g 電子天平稱量體質量（Y），用精確度0.01cm 游標卡尺測量背甲長（X1）、背甲寬（X2）、殼高（X3）、腹甲長（X4）、腹甲后半部長（X5）、腹甲前半部寬（X6）、腹甲后半部前寬（X7）、腹甲后半部后寬（X8）、甲橋長（X9）、喉盾寬（X10）、喉盾縫長（X11）、肱盾縫長（X12）、胸盾縫長（X13）、腹盾縫長（X14）、股盾縫長（X15）和肛盾縫長（X16）等17 項形態性狀（圖1）。

1.3 數據處理

采用Excel 和SPSS 16.0 統計軟件處理所測量的形態性狀參數量。利用各表型參數統計量分析不同組內表型相關性，進行形態性狀對體質量的通徑分析，獲得相應的通徑系數、決定系數，建立多元回歸方程。

2 結果與分析

2.1 表型性狀參數

由表1 可見，所測1、2 齡雌、雄雜種龜的體質量均大于其他形態指標，從12 月齡到24 月齡，雌龜平均值從356.632g 增長到了580.713g，增長率為62.83%；雄龜平均值從171.352g 增長到了290.495g，增長率為69.53%。體質量是變異程度最高的性狀，說明具有較高的選擇潛力；其次為肱盾縫長，其他性狀的離散程度相對較低且平穩。相對而言，1 齡雜交龜各性狀的變異系數要大于2 齡。

2.2 各形態性狀間的相關系數

Person 相關分析表明，雜種F1代的各形態性狀及體質量間的表型相關系數中，除個別性狀（如肱盾縫長）與體質量不相關以外，1、2 齡各形態性狀與體質量的表型相關性均呈極顯著水平（P＜0.01），雌、雄雜種龜的背甲長與體質量的相關系數均最大。除背甲長外，雌龜與體質量相關系數較大的形態性狀為腹甲長、殼高，而雄龜與體質量相關系數較大的形態性狀為背甲寬、背甲前半部寬。除1 齡雌龜的肱盾縫長與胸盾縫長、腹盾縫長，1 齡雄龜的肛盾縫長、2 齡雌龜的肱盾縫長與大多數形態性狀均呈負相關或相關系數不顯著外（P＞0.05），雜種龜其他性狀之間的相關系數均達到極顯著（P＜0.01）或顯著（P＜0.05）水平。

2.3 各形態性狀對體質量影響的通徑系數

1、2 齡雌、雄雜種龜的各形態性狀對體質量的通徑系數見表2～表5。1、2 齡雌龜組保留性狀分別為背甲長（X1）、殼高（X3）、腹甲后半部長（X5）、甲橋長（X9）和背甲長（X1）、殼高（X3）、腹甲長（X4）和甲橋長（X9）；1、2 齡雄龜組保留的性狀為背甲長（X1）、背甲寬（X2）、殼高（X3）和背甲長（X1）、背甲寬（X2）、殼高（X3）和甲橋長（X9）。獲得兩個年齡雌、雄龜組相關指數R2=∑riyPi分別0.987 和0.978、0.968 和0.982。結果表明，除2 齡雄龜組中背甲長對體質量直接作用較大以外，1、2 齡雌、雄龜組中所分析的其他性狀對體質量的直接作用均較小，對體質量的影響很大程度上取決于間接作用。背甲長、殼高和甲橋長是1、2 齡雌龜分析的共同重要性狀，背甲長、背甲寬和殼高是1、2 齡雄龜分析的共同重要性狀，因此，背甲長和殼高是影響雌、雄龜的重要形態性狀。

2.4 兩年齡組雜種F1 代形態性狀對體質量的決定程度

表1 雜種F1 代體質量與形態性狀的表型統計量Tab.1 escriptive statistics between the body weight (Y/g) and various measurable traits (X/cm) of the hybrid F1(n=90)

用決定系數公式計算的各形態性狀對體質量的共同及相對決定系數結果見（表6～表9）。由表6可知，雌龜1 齡組以背甲長對體質量的相對決定程度最大，甲橋長最小，背甲長和殼高對體質量的共同決定程度最大，達到28.9%；2 齡組以殼高的相對決定程度最大、腹甲長最小，殼高和甲橋長的共同決定程度最大，達到16.2%（表7）。1 齡雄龜組以背甲寬的相對決定程度最大，殼高最小，背甲長、寬的共同決定程度最大，達到23.3%（表8）；2 齡組相對決定程度以背甲長最大，甲橋長最小，背甲長、寬的共同決定程度最大，達到21.1%（表9）。

2.5 多元回歸分析及方程的建立

通過相關分析、通徑分析和逐步回歸法，各形態性狀與體質量的相關性為顯著或極顯著水平，保留偏回歸系數顯著的性狀，建立與體質量的回歸方程。

1 齡雌龜：Y=-636.682+35.820X1+56.665X3+19.395X5+20.718X9；

2 齡雌龜：Y=-1108.134+23.992X1+117.486X3+16.527X4+58.478X9；

1 齡雄龜：Y=-292.224+14.158X1+23.149X2+33.102X3；

2 齡雄龜：Y=-480.618+37.962X1+14.474X2+21.013X3+13.373X9。

經多元回歸關系和偏回歸系數的顯著性檢驗表明，回歸關系為極顯著，而偏回歸系數均達到極顯著（P＜0.01）或顯著水平（P＜0.05）。經回歸預測，估計值和實際值差異均不顯著（P＞0.05），表明1、2 齡雌、雄烏黑雜龜的回歸方程可用于生產實踐。

表2 1 齡雌龜形態性狀對體質量的影響Tab.2 Effects of metric traits on body weight of the female one-year-old tortoise

表3 2 齡雌龜形態性狀對體質量的影響Tab.3 Effects of metric traits on body weight of the female two-year-old tortoise

表4 1 齡雄龜形態性狀對體質量的影響Tab.4 Effects of metric traits on body weight of the male one-year-old tortoise

表5 2 齡雄龜形態性狀對體質量的影響Tab.5 Effects of metric traits on body weight of the male two-year-old tortoise

表6 1 齡雌龜形態性狀對體質量的決定系數Tab.6 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the female one-year-old tortoise

表7 2 齡雌龜形態性狀對體質量的決定系數Tab.7 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the female two-year-old tortoise

表8 1 齡雄龜形態性狀對體質量的決定系數Tab.8 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the male one-year-old tortoise

表9 2 齡雄龜形態性狀對體質量的決定系數Tab.9 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the male two-year-old tortoise

3 討論

3.1 體質量與形態性狀的變化

本試驗所測各性狀以體質量的變異系數最大，與中華絨螫蟹Eriocheir sinensis[6]、硬頭鱒Oncorhynchus mykiss[16]、中華鱉Trionyx sinensis[17]等研究結果一致，說明以體質量作為目標性狀進行選育，培育出優良品種潛力更大。雜種F1 代各生長階段的性狀表現為外部形態指標增長及體質量增加。影響1、2 齡雌龜體質量的主要形態性狀有背甲長、殼高和甲橋長，表現出二維平面生長趨勢；而1、2齡雄龜的主要形態性狀有背甲長、背甲寬和殼高，呈三維立體生長態勢。

無論1 齡還是2 齡，背甲長、背甲寬、殼高等多項形態性狀與體質量線性關系極為顯著。1 齡雜種龜的相關性指數分別為0.987（雌）和0.968（雄），2齡的指數分別為0.978（雌）和0.982（雄），說明方程擬合度良好，把影響體質量的主要形態因素均考慮到了。本研究中，1 齡雜種龜各性狀的變異系數均大于2 齡，主要原因是幼龜生長較迅速，形態變異程度較大，選擇潛力更大；定期篩選并保留生長優勢、大小勻稱的個體，而后期被選擇的次數越多，規格就趨向一致，所以變異系數以1 齡較大。

本試驗中，雌、雄雜種龜形態性狀與體質量間的相關性差異顯著（P＜0.05），同齡雌龜個體大于雄性，變異系數也較大，對體質量影響的主要性狀也有一定差異。不同性別生長差異的重要因素可能是性腺發育的不同步。在進行烏黑雜交龜選育時，根據選育的目的可將雌、雄龜群體分開，建立不同的選育測量指標。

3.2 各形態性狀對體質量的影響

相關系數是兩個變量間的綜合體現，雌、雄雜種龜的體質量與各形態性狀間的相關系數大多達到極顯著水平，但不能說明所有的形態性狀是影響其經濟性狀的主要因素。因此，有必要采用通徑分析，以表型相關系數達到顯著水平為入選條件，表型相關系數不顯著者剔除。本研究中，從1、2 齡雌、雄雜種龜群體各測量16 項性狀中分別入選的背甲長、殼高、腹甲后半部長和甲橋長；背甲長、殼高、腹甲長和甲橋長；背甲長、背甲寬和殼高；背甲長、背甲寬、殼高和甲橋長等變量都達到極顯著或顯著水平，所保留的形態性狀與體質量的回歸方程的可靠程度在85%以上，說明方程擬合度良好，影響體質量的主要性狀已經找到。背甲長、殼高和甲橋長是1、2 齡雌雜種龜保留的共同性狀，而背甲長、背甲寬和殼高是1、2 齡雄龜的共同性狀。因此，背甲長和殼高是影響烏黑雜龜體質量的共同重要性狀，這與2 齡黃喉擬水龜研究結果相似[18]。背甲長和殼高是龜類生產實踐中理想的輔助指標。

3.3 在龜類選育中的應用

體質量是龜類動物選育中重要的目標性狀之一，量化形態性狀對體質量的影響是龜類選育的基礎?；蜻B鎖和基因多效性[19]使體質量與形態性狀存在著不同程度的相關性[20-24]。王誠遠等[25]研究發現，決定1 齡烏龜體質量最主要的因素是背甲長；賀剛等[26]對野生黑頸烏龜群體的研究表明，影響體質量的形態性狀由高至低依次為背甲長、腹甲長、背甲寬、殼高。本試驗表明，各測量性狀中體質量的變異系數最大，而背甲長、殼高等其他指標的變異系數較小。然而，在實際工作中，直接測量體質量作為選擇指標，效果并不好，需結合其他性狀進行間接選擇，才能保證選育效果。本研究聯合使用相關分析、通徑分析和多元回歸分析，選擇出對1、2 齡雌體質量具有決定性作用的形態性狀為背甲長、殼高、腹甲后半部長和甲橋長；背甲長、殼高、腹甲長和甲橋長。對1、2 齡雄龜體質量具有決定性作用的性狀為背甲長、背甲寬和殼高；背甲長、背甲寬、殼高和甲橋長。其中，背甲長和殼高是影響烏黑雜交龜體質量的共同性狀，說明雜交種具有親本的部分遺傳特征，在選育實踐中也發生了變異。龜的種類、生活方式的不同，及不同生長階段也影響體質量的形體性狀[17]，至于烏黑雜交龜后期的生長情況，需進一步開展基因遺傳等的相關研究。