呼出氣一氧化氮與支氣管哮喘患者外周血嗜酸性粒細胞相關性及聯合檢測價值

江銀玲 楊萬春★ 沈欣

支氣管哮喘是臨床常見呼吸系統疾病，目前全世界范圍內有3 億左右哮喘患者，其中我國約3 000 萬，需給予高度重視［1］。研究表明，多種呼吸疾病與炎癥相關，其中支氣管哮喘本質為慢性氣道炎癥疾病，檢測無創氣道炎癥標志物對支氣管哮喘診斷、治療、評估預后、預測復發等均具有重要指導意義［2-3］。呼出氣一氧化氮（Fractional exhaled nitric oxide，FeNO）是近年來氣道炎癥的關注點，具有檢測簡便、快速、無創、重復性好等特點，與支氣管哮喘氣道高反應性及炎癥反應密切相關［4］。嗜酸性粒細胞（Eosinophils，EOS）是一種炎性細胞，參與多種類型哮喘發病過程，可有效反映氣道炎癥情況，在評估支氣管哮喘病情嚴重程度方面具有良好價值［5］。既往雖有研究探討兩者的關系，但鮮有分析兩者聯合檢測在支氣管哮喘中的價值。為此，本研究嘗試分析FeNO 與外周血EOS 相關性及聯合檢測價值，旨在為臨床診治支氣管哮喘提供數據支持。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年4月至2019年9月118 例支氣管哮喘患者作為觀察組，同期正常體檢者55 例作為對照組。兩組年齡、性別、體質量指數（BMI）、吸煙史等一般資料相比，差異無統計學意義（P>0.05），有可比性。

納入標準：①觀察組均符合《支氣管哮喘防治指南（2016年版）》中支氣管哮喘相關診斷標準［6］；②對照組體檢各項指標均顯示正常；③兩組臨床資料完整，且均知情本研究方案，自愿簽訂知情同意書。排除標準：①參與本研究前4 周內伴有呼吸道感染、肺部感染者；②存在嚴重心腎等其他臟器功能異常者；③合并嚴重全身性疾病者；④無法進行FeNO 與肺功能檢測者；⑤處于妊娠期、哺乳期的患者；⑥近期出現過敏性皮炎病史或其他過敏疾病病史者；⑦參與本研究前1 個月內接受吸入糖皮質激素治療者。研究經本院倫理委員會審批通過。

1.2 方法

1.2.1 FeNO 檢測方法

對照組、觀察組治療前、治療12 周后均根據歐洲呼吸學會（ERS）制定方法采用瑞典Aerocrine 公司FeNO 測定儀進行檢測，檢測前向所有受檢者介紹檢測方法與步驟，所有受檢者于靜息狀態下進行FeNO 檢測。

1.2.2 外周血EOS、血清總IgE 檢測方法

對照組、觀察組治療前、治療12 周后于清晨空腹狀態下取5 mL 靜脈血，其中2 mL 采用全自動血細胞計數分析儀檢測外周血EOS；剩余3 mL 離心處理，離心速率為3 000 r/min，時間為15 min，取上清液，采用電化學發光法檢測血清總IgE 水平，試劑盒購自美國雅培公司，所有操作步驟嚴格遵循試劑盒說明書。

1.2.3 肺功能檢測方法

采用德國JeagerMasterScreen 系列肺功能儀檢測第1 秒用力呼氣末容積（FEV1）占預計值百分比（FEV1%），每人重復檢測3 次，取最佳值作為最終結果，并準確記錄。

1.2.4 治療方法

觀察組均給予祛痰、吸氧、平喘等對癥治療。持續治療12 周。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行數據分析，計量資料以（±s）表示，兩組間用t檢驗，多組間采用方差分析。計數資料以n（%）表示，χ2檢驗，以ROC 曲線評價診斷價值，Pearson 進行相關性分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較

兩組年齡、性別、BMI、吸煙史相比，差異無統計學意義（P＞0.05）；觀察組FEV1%低于對照組，血清總IgE高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between 2 groups［n（%），（±s）］

資料年齡（歲）性別男女BMI（kg/m2）吸煙史有無FEV1%血清總IgE（U/mL）觀察組（n=118）38.26±8.02 46（38.98）72（61.02）22.09±1.72 36（30.51）82（69.49）72.16±3.86 332.50±94.62對照組（n=55）39.17±8.63 21（38.18）34（61.82）22.31±1.19 16（29.09）39（70.91）84.14±6.09 41.17±10.05 t/χ2值0.678 0.010 0.857 0.036 15.677 22.739 P 值0.499 0.920 0.393 0.850＜0.001＜0.001

2.2 兩組FeNO、外周血EOS 水平比較

觀察組FeNO、外周血EOS 高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組FeNO、外周血EOS 比較（±s）Table 2 Comparison of FeNO and EOS in peripheral blood between 2 groups（±s）

表2 兩組FeNO、外周血EOS 比較（±s）Table 2 Comparison of FeNO and EOS in peripheral blood between 2 groups（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 118 55 FeNO（ppb）48.93±10.14 12.64±3.18 25.919＜0.001外周血EOS（%）5.02±1.03 1.97±0.64 20.200＜0.001

2.3 多元線性逐步回歸分析

將FEV1%、血清總IgE 等其他因素控制后，多元線性逐步回歸分析，FeNO（偏回歸系數為0.602）、外周血EOS（偏回歸系數為0.724）與支氣管哮喘發病顯著相關（P＜0.05），見表3。

表3 多元線性逐步回歸分析Table 3 Multiple linear stepwise regression analysis

2.4 FeNO、外周血EOS 診斷價值

根據FeNO、外周血EOS 水平繪制ROC 曲線，兩者聯合診斷AUC 為0.881，95%CI為0.823～0.925，Z統計=14.754，診斷敏感度為78.81%，特異度為89.09%，優于兩者單獨預測，見圖1，表4。

圖1 FeNO、外周血EOS 診斷價值Figure 1 Diagnostic value of FeNO and EOS in peripheral blood

表4 FeNO、外周血EOS 診斷價值Table 4 Diagnostic value of FeNO and EOS in peripheral blood

2.5 不同FeNO 水平患者治療前后FeNO、外周血EOS、FEV1%、血清總IgE 水平

高水平患者治療前、治療12 周后FeNO、外周血EOS、血清總IgE 高于中水平患者、低水平患者，FEV1%低于中水平患者、低水平患者（P＜0.05），見表5。

表5 不同FeNO 水平患者治療前后FeNO、外周血EOS、FEV1%、血清總IgE 水平比較（±s）Table 5 Comparison of FeNO，EOS，FEV1%and total IgE in peripheral blood of patients with different FeNO levels before and after treatment（±s）

表5 不同FeNO 水平患者治療前后FeNO、外周血EOS、FEV1%、血清總IgE 水平比較（±s）Table 5 Comparison of FeNO，EOS，FEV1%and total IgE in peripheral blood of patients with different FeNO levels before and after treatment（±s）

注：與同組治療前相比，aP＜0.05；FeNO＞50 ppb 為高水平；FeNO 25～50 ppb 為中水平；FeNO＜25 ppb 為低水平。

時間治療前治療12 周后組別低水平患者中水平患者高水平患者F 值P 值低水平患者中水平患者高水平患者F 值P 值n 31 40 47 31 40 47 FeNO（ppb）21.83±4.24 43.06±7.09 71.80±13.28 264.019＜0.001 18.34±3.26a 25.58±6.52a 57.19±11.34a 255.776＜0.001外周血EOS（%）2.78±0.81 4.93±1.02 6.57±1.44 99.299＜0.001 2.02±0.53a 2.67±0.61a 4.05±0.94a 77.467＜0.001 FEV1%78.03±4.39 74.11±4.10 66.63±3.75 81.255＜0.001 83.26±4.51a 79.10±4.22a 75.03±3.39a 40.211＜0.001血清總IgE 124.79±35.12 286.57±73.26 508.59±137.40 148.513＜0.001 66.10±20.57a 117.32±31.19a 280.64±52.28a 332.836＜0.001

3 討論

支氣管哮喘具有無法根治的特點，但早期診斷、規范治療可達到控制哮喘的目的［8］。目前，支氣管哮喘診治主要依靠肺功能與臨床癥狀，其中肺功能檢測受患者瞬時狀態、配合能力等因素干擾，臨床癥狀則主觀因素較大，均無法客觀、準確地反映支氣管哮喘病情嚴重程度［9］。因此，尋找一種簡便、客觀的方法診斷、監測療效成為支氣管哮喘研究熱點。

FeNO 是人體內生物活性物質，主要來自于呼吸道上皮細胞，與氣道炎癥反應密切相關。阿選德等［10］研究表明，FeNO 在支氣管哮喘患者中升高明顯早于肺功能異常與臨床癥狀發生時間，能及早反映氣道炎癥及哮喘病變情況。本研究發現，FeNO 升高與支氣管哮喘聯系緊密。原因在于，氣道炎癥發生過程中，炎性因子可直接刺激NO 合酶轉錄上調，增加FeNO 水平，還誘導NO 合酶表達增加，促使NO 合成加快，導致FeNO 表達升高［11］。故FeNO 在支氣管哮喘氣道炎癥發生早期便可出現明顯改變。同時，本研究證實，FeNO 可作為重要輔助診斷價值。但最佳截斷值與王霞等［12］研究結果不一致，可能與納入對象病情、檢測方法、患者個體差異性等因素有關。

臨床實踐表明，EOS 不僅參與支氣管哮喘炎癥發生進展過程，亦是主要炎癥效應細胞，可直接反映支氣管哮喘炎癥及病情程度［13］。本研究結果顯示，支氣管哮喘患者外周血EOS 異常升高與其發病顯著相關。原因在于，EOS 趨化因子通過高選擇性結合CCR3 受體，促使微血管內皮上EOS黏附增多，經由微血管壁進入肺部，從而產生顆粒蛋白，引發氣道炎癥反應，并增加支氣管黏膜及血液中EOS 含量［14］。既往相關文獻指出，支氣管哮喘FeNO 與EOS 浸潤關系密切，可反映EOS 炎癥程度［15］。在此基礎上，本研究發現，FeNO 與EOS具有顯著正相關關系。提示聯合檢測兩者水平可能是支氣管診治的新途徑。ROC 曲線分析，FeNO與外周血EOS 聯合檢測可為臨床診斷支氣管哮喘提供可靠依據。聯合檢測FeNO 與外周血EOS 可作為評估療效的重要指標。

此外，大量研究表明，血清總IgE、FEV1%與支氣管哮喘疾病進展、氣道炎癥反應關系密切［16］。本研究發現，說明FeNO 還與肺功能、氣道免疫反應有關，能從不同方面反映支氣管哮喘變化情況。但本研究未詳細探討FeNO 對支氣管哮喘患者遠期預后的影響，需作進一步分析與探究。

綜上可知，FeNO 與支氣管哮喘患者外周血EOS 具有正相關關系，聯合檢測具有重要輔助診斷價值，還有助于評估病情改善情況，為臨床提供參考依據。