血液常見炎癥標志物用于甲型流感病毒感染的預測價值分析

劉松堅 鄭少燕 黃茜

流行性感冒是由流感病毒引起的急性傳染性呼吸道疾病，它在易感人群中能迅速傳播，特別是在季節性流行或在暴發、流行和少見的大流行中，其發病率和發病的嚴重程度均不一致[1]，并且由于住院人數增加而造成了相當大的經濟負擔[2]。人流感病毒是正粘病毒科的成員，只有甲型流感病毒(IVA)和乙型流感病毒(甲流和乙流)具有流行病學意義[2]，以IVA危害為最大。因此，快速識別高靈敏度和高特異度的生物標志物，并將其用于IVA的輔助診斷成為臨床醫師研究的熱點。血常規中包含了若干的炎癥標志物，其獲取方便、快捷，成為臨床醫生常用的輔助診斷手段之一，我院將血細胞計數的檢測用于IVA的輔助診療中，取得了較為理想的效果，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 IVA的診斷標準 IVA的診斷參照《流行性感冒診療方案(2018年版修訂版)》[3]，納入標準：有畏寒、發熱(體溫≥38 ℃)、頭痛、肌痛等局部臨床癥狀；伴食欲減退、乏力、全身肌肉關節酸痛等全身癥狀；IVA抗原檢測陽性。排除標準：既往慢性肺部疾病史；非IVA引起的呼吸道病毒感染。

1.2 病毒組和健康對照組的納入 按照上述的診斷標準和排除標準納入病毒組作為病例組，選擇同期在我院進行健康體檢的人群作為空白對照。另選擇有畏寒、發熱等流感樣癥狀，但IVA抗原檢測陰性的人作為第二組對照。三組研究對象在年齡和性別上具有同質性，差異無統計學意義。

1.3 實驗室檢測 對納入的所有研究對象，采集外周血，對血樣進行血常規的檢測，血常規中的檢測采用希森美康的XN-1000血球儀；白細胞計數(WBC)的參考值范圍為(4～10)×109/L；單核細胞數目(MO)的參考值范圍為(0.12～1.0)×109/L；單核細胞比率(MO%)的參考值范圍為3%～10%；中性粒細胞數目(NE)的參考值范圍為(2～7)×109/L；中性粒細胞比率(NE%)的參考值范圍為31%～40%；平均血小板體積(MPV)的參考值范圍為9.1～12.0 fL；血小板數目(PLT)的參考值范圍為(100～300)×109/L。IVA抗原檢測采用金標法，試劑和儀器來自廣州萬孚生物技術股份有限公司。所有的血樣在抽血后半小時內上機，儀器在檢測樣本前均進行定標，樣本的變異系數在可控范圍內，確保檢驗質量。

1.4 統計學分析 采用SPSS 23.0進行統計分析，采用F檢驗對年齡進行統計分析，WBC、MO、MO%、NE、NE%、MPV、PLT和MPV/PLT的比較，采用非參數檢驗的Kruskal-Wallis H檢驗方法進行統計分析，數值以四分位間距(P25，P75)表示，卡方檢驗對納入研究對象的性別進行統計分析，使用受試者工作特征曲線(ROC)比較WBC、MO、MO%、NE、NE%、MPV和MPV/PLT的診斷效能，以曲線下面積(AUC)判斷診斷效果，所有的檢驗結果以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般人口學結果 本研究納入了空白對照140例為對照組，平均年齡(52.82±12.33)歲，經臨床診斷為IVA的研究對象142例為IVA組，平均年齡(55.32±13.11)歲，IVA陰性組155例，平均年齡(54.51±13.93)歲，三組年齡差異無統計學意義(F值1.91，P值0.149)。對照組男86例(61.4%)，IVA組男71例(50.0%)，IVA陰性組男84例(54.2%)，三組性別比較差異無統計學意義(P＝0.149)。

2.2 三組感染指標的比較 IVA組的MO、MO%、NE% 、MPV 和MPV/PLT 在 三 組 中 為 最 高(P＜0.001)，IVA陰性組的NE在三組中最高(P＜0.001)，PLT在IVA組為最低(P＜0.001)，見表1。

表1 三組感染指標的比較

2.3 炎癥標志物的診斷效能分析 WBC診斷IVA的截斷值為5.48×109/L，其靈敏度和特異度分別為85.2%和30.3%，其診斷IVA的AUC為0.504。MO%診斷IVA的截斷值為7.07%，其靈敏度和特異度分別為71.8%和83.2%，其診斷IVA的AUC為0.815。MPV診斷IVA的截斷值為10.45 fL，其AUC為0.828，其靈敏度和特異度為64.1%和87.7%，約登指數為0.518。MPV/PLT診斷IVA的截斷值為0.05，其AUC為0.933，其靈敏度和特異度達78.9%和92.3%，約登指數為0.712，見表2，見圖1。

續表1 三組感染指標的比較

表2 炎癥標志物對IVA的診斷效能比較

圖1 炎癥標志物診斷IVA的ROC曲線

3 討論

正常情況下流行性感冒是一種發病程度相對較輕的呼吸道感染疾病，其發病率高，死亡率低。但在人口基數大的情況下，死亡總數亦不容忽視，IVA病死率較高的人群為嬰幼兒、老年人或免疫抑制人群[4-5]。由于輕度至中度流感的臨床表現與其他呼吸道病毒引起的流感樣癥狀類似，因而必須進行實驗室檢測才能確診。RT-PCR、病毒分離和培養、病毒抗原快速檢測和血清抗體檢測等檢測方法均可以診斷IVA[6-8]，但在基礎條件較差的基層或社區醫院，上述檢測無法進行。若無法快速診斷或排除IVA感染，對傳染病的疾病預防和控制傳播方面將會造成很大的困擾。在此情況下，如何快速對識別宿主反應的生物標志物進行檢測是一個急需解決的問題，而利用常規檢測方法對IVA進行輔助診斷最為常見，其具有重要意義。

本研究基于使用常規檢測方法對IVA進行快速輔助診斷，以期在等待出具病毒抗原檢測結果前能對出現流感樣癥狀的患者進行IVA的輔助診斷和鑒別診斷。由于血細胞計數分析在評估感染性炎癥反應疾病中具有簡單、有效、快速的效果，因此是該類疾病輔助診斷的實驗室基礎。本研究發現，由于IVA感染，許多血液學參數都發生了顯著變化，如WBC、MO、MO%、NE、NE%、PLT、MPV等。流感病毒感染導致NE增加，而PLT下降，這與其他常見病毒(如腺病毒、呼吸道合胞病毒、EB病毒、人皰疹病毒6型和腸道病毒)引起的變化不同[9-12]。

本研究結果表明，MO、MO%、MPV、MPV/PLT均可以幫助診斷和鑒別診斷IVA。本研究中，IVA患者的PLT顯著低于對照組和IVA陰性組，表明降低的PLT計數可將流感病毒感染與其他感染區分開。此外，有研究顯示，在流感患者完全治愈的同時，PLT計數可恢復到正常水平[13]，這表明流感病毒對血小板的過度活化可能導致血小板計數明顯低于其他呼吸道病毒感染的PLT計數降低，可能為流感病毒誘導血小板抑制導致[14]。本研究與上述研究的結果顯示PLT計數在流感實驗室診斷中具有高度相關性和特異性。

本研究在IVA組觀察到PLT計數顯著低于IVA陰性組和對照組，且與使用MO、MO%和MPV相比，單獨使用MPV/PLT的診斷價值更高。ROC曲線表明，MPV/PLT診斷IVA的截斷值為0.05，其AUC為0.933，其靈敏度和特異度達78.9%和92.3%，約登指數為0.712，表明MPV/PLT的比值在大于0.05時對流感病毒的輔助診斷具有鑒別意義。另一項研究顯示，如果使用IVA 陰性組作為參考，MPV/PLT的最佳敏感性和特異性分別為73.82%和50.68%，且該項研究結果表明，當MPV/PLT值高于0.040，則可能預測兒童患有IVA[14]。文獻顯示，IVA結合上皮細胞的唾液酸受體后，病毒通過內吞復制并傳播至其他細胞，刺激細胞釋放細胞因子，并促進炎癥因子在炎癥部位聚集并可誘導不受控制的血小板活化，導致巨核細胞形成的破壞和PLT循環時間的縮短，導致MPV增大且PLT計數減少，同時，病毒會產生一些分子，導致PLT黏附和聚集，形成循環復合物并加劇PLT的降低[15]，最終觀察到MPV/PLT比值處于0.05或更高數值時，能較好預測機體處于IVA感染的狀態，但詳細的機制可能很復雜，因此將來有必要進一步研究以確認這些關聯。

綜上所述，人體感染流感病毒尤其是IVA后，通過炎癥反應促進導致PLT黏附和聚集，形成循環復合物并加劇PLT的降低，最終觀察到MPV/PLT比值增加，當MPV/PLT比值處于0.05或更高數值時，能較好預測機體處于IVA感染的狀態，是IVA流行期間臨床醫師常用的炎癥標志物，可用于輔助診斷IVA的發生和判斷疾病的病情。