化妝品中對羥基苯乙酮的測定方法驗證

李寧 劉昶 李鎮宏

摘 要：目的：建立一個用高效液相色譜法測定化妝品中對羥基苯乙酮的含量的方法。方法：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ;以甲醇–水（20：80）為流動相 ;檢測波長為275mn，柱溫30℃，流速1ml/min。0μg～0.98538644μg范圍內線性關系良好，得對羥基苯乙酮線性回歸方程y=344515x+125.58（R2=0.9998） ，回歸系數大于0.999。結論：該方法簡便、準確，可用于化妝品中對羥基苯乙酮的含量控制。

關鍵詞：化妝品;對羥基苯乙酮;含量;方法確認

對羥基苯乙酮又名4-羥基苯乙酮（4-Hydroxyacetophenone），常溫下為白色針狀結晶，可燃，天然存在于菊科植物濱蒿的莖、葉，茵陳蒿、蘿藦科植物人參娃兒藤等植物的根中。但對羥基苯乙酮吞食會有害，接觸對眼睛、呼吸系統和皮膚有刺激作用在我國《化妝品安全技術規范》（2015版）中沒有對它進行限用和禁用，就連一個系統的檢驗方法都還不全。由此可見標準的缺失，可能導致對羥基苯乙酮在化妝品中的濫用給消費者帶來傷害。本次驗證需對可能出現的技術難點和安全風險進行驗證，找出一個較為滿意的實驗方法。

1.? 儀器與試藥

1.1? 儀器? ?Agilent 1260系列高效液相色譜儀

1.2? 試藥甲醇，色譜級，德國默克。

對羥基苯乙酮， 來源 中國食品藥品檢定研究院.

2.? 方法與結果

含量測定

色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ;以甲醇–水（30：70）為流動相 ;檢測波長為275mn，柱溫30℃，流速1.0ml/min。對照品峰理論塔板數和分離度均符合要求。

對照品溶液的制備? 精密稱取對羥基苯乙酮對照品21.44mg，置于25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度搖勻做為對羥基苯乙酮對照溶液。

供試品溶液的制備? 精密稱取本品約一片的重量為0.5152g，置于50ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，超聲處理10min。將提起液離心至澄清，用0.45um濾膜過濾，取續濾液作為供試品。

測定法? 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10uL，注入液相色譜儀，測定，即得。

測試結果：供試品和對照品色譜峰保留時間一致，分離度和理論板數均滿足要求，說明系統適用性滿足要求。

精密度試驗：分別精密吸取濃度為0.00262769761mg/ml的對羥基苯乙酮對照品溶液10μl，按測定方法重復進樣6次，測定峰面積值。各次測得的峰面積值分別是926.6、926.6、928.2、927.0、926.4、926.8。平均值為4082.4，相對標準偏差RSD為0.07%。相對標準偏差小于2.0%，說明儀器精密度良好。

線性關系與線性范圍考察： 精密量取按上述對照品溶液制備方法制備的濃度約為0.6569429mg/ml的對羥基苯乙酮對照品儲備液，分別按照0.4ml→100ml、0.5ml→50ml、1.0ml→50ml、0.5ml→10ml、0.8ml→10ml、1.0 ml→10ml、1.5ml→10ml將溶液稀釋成對照品溶液系列，就得到7個濃度的對照品溶液，分別取上述7個濃度的對照品溶液10ul注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積;以峰面積為縱坐標，以對照品濃度（mg/ml）為橫坐標作線性回歸，繪制標準曲線。得對羥基苯乙酮線性回歸方程y=344515x+125.58（R2=0.9998）

結論：對羥基苯乙酮線性回歸方程y=344515x+125.58（R2=0.9998），相關系數滿足要求，說明對羥基苯乙酮在0μg～0.98538644μg范圍內線性關系良好。

加樣回收率試驗（準確度試驗）

采取全程加樣法。取9份采之汲光感亮顏面膜約0.5g，精密稱定，精密量取濃度為0.8567424mg/ml的對羥基苯乙酮對照溶液分別按照0.5 ml、2.5 ml、5.0 ml各加三份，按含量測定方法進行處理，同時取對羥基苯乙酮對照品溶液，依法測定，并計算出對羥基苯乙酮的含量。以下式計算回收率。以下式計算回收率。

試驗結果：三個濃度的回收分別為98.43%，98.43%，99.83%，平均為98.9，RSD為0.81%。試驗表明本試驗方法可行有效準確。

三、結論

試驗通過了系統適用性試驗、精密度試驗、線性關系與線性范圍考察、準確度試驗（加樣回收試驗），各項試驗測試結果均能滿足要求，儀器性能穩定，質控結果滿意。

從以上數據可以看出用該方法檢測化妝品中的對羥基苯乙酮的含量，結果準確可靠，可以在本實驗室運用此方法檢測化妝品中的對羥基苯乙酮的含量。

該方法中對羥基苯乙酮的線性范圍為對羥基苯乙酮。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典 2015版（四部） [M].北京：化學工業出版社，2005.

[2] 日用化學工業.分析與檢測