維吾爾族膽囊結石患者膽囊壁CCK-AR mRNA表達與膽囊收縮功能的關系

尹永召，李朝軍，諶彪，王偉，康鵬通訊作者）

（烏魯木齊市第一人民醫院 外一科，新疆 烏魯木齊 830011）

0 引言

對外科疾病來講，膽囊結石最為常見，近些年來發病率不斷提升。對比男性，女性的發病率更高，其中影響出現膽囊結石的原因有很多，比如肥胖、生活習慣等，會對病人的生活質量造成影響。從臨床表現上來看，發熱、寒顫、持續性的疼痛、黃疸等。一旦病人有膽囊結石的情況，治療就需要借助外科手術，隨著科學技術的不斷發展，微創手術得以廣泛的應用，因此治療方式也有所改變，可以在把結石取出的同時還能把膽囊最大程度的保持完整，因此具有良好的優點。

新疆地區是膽囊結石的高發區域，與漢族膽囊結石相比，維吾爾族膽囊結石的患病率高，發病年齡早，嚴重影響生活質量[1]。特此，本研究從具有調節膽囊收縮功能的膽囊收縮素A受體入手，通過手術切取組織和分離提取標本，采用RT-PCR法對膽囊標本CCK-A受體分子mRNA轉錄水平進行測定，進行組間和組內系統分析對比，對維吾爾族高發膽囊結石的分子機制進行探索，為預防和治療奠定堅實的基礎。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取我院2016年6月至2018年6月期間收治的維、漢膽囊結石患者各100例。男94例，女106例，年齡34-75歲，平均（51.8±5.3）歲。納入標準：無嚴重其他臟器功能障礙和合并癥，在新疆地區居住滿10年以上者。全部病例為漢族和維吾爾族患者，可以完成膽囊切除手術切除者。最近一段時間沒有使用對膽囊收縮有影響的藥物。非膽囊結石組：來源于醫院肝膽外科（肝移植組）維吾爾族非膽囊結石肝移植供體膽囊[2]。

1.2 方法。維、漢膽囊結石病人收縮膽囊收縮功能的情況：研究病人在12個小時內禁食，然后通過B超進行測量，對病人的空腹膽囊容積、膽囊壁厚度等進行測量，先測出長徑L，然后測出長徑中點相互垂直之兩橫徑W及H，根據Dodds公式（V=0.52×L×W×H）計算，囑咐患者進食兩個煎蛋，測量30 min、60 min、90 min膽囊餐后殘余容積，取最小殘余容積（RV），分別計算膽囊排空容積EV=（FV-RV）、膽囊殘余指數RF=（RV／FVx100%）和膽囊排空率E=（1-RE）。判斷膽囊收縮功能標準為E大于50%提示收縮功能良好，30-50%欠佳，＜30%不良。收縮良好功能為“正常”組，收縮功能欠佳和不良為“減弱”組。維、漢膽囊結石患者及非膽囊結石組膽囊組織中CCK-A受體mRNA基因表達水平情況：CCK-A受體的檢測：①從組織中提取mRNA并測定濃度[3]；②設計探針及引物；③按照樣本數制備反應液（每次實驗設置和內參基因β-actin的陰性對照，陰性對照加去離子水）；④分裝到0.2 mLPCR管后加入反轉錄液；⑤上機進行RT-PCR反應；⑥分析結果。

1.3 統計學分析。維吾爾族和漢族膽囊結石患者膽囊收縮功能的比較采用卡方檢驗，維吾爾族和漢族膽囊結石患者CCK-A受體mRNA表達和蛋白表達水平采用t檢驗，以α＝0.05作為檢驗水準，全部資料均采用SPSS 17.0統計學軟件進行分析。

2 結果

維吾爾族、漢族膽囊結石患者的CK-AR mRNA的表達水平低于非膽囊結石組（P＜0.05）。維、漢族膽囊收縮功能“減弱”組的CCK-AR mRNA的表達水平均低于維、漢族收縮功能“正常”組（P＜0.05），維吾爾族結石患者膽囊壁CCK-AR mRNA表達明顯低于漢族膽囊結石患者（P＜0.05），見表1。

表1 各組CCK—ARmRNA的表達情況

3 討論

膽囊是人體最重要的器官之一，其內貯存的膽汁主要是進行消化和免疫，一些不良的生活習慣、感染、肥胖等都會導致形成膽囊結石[4-6]。最近幾年，這種病癥出現的概率越來越高，在40以后的居民中比較高發，因此醫療界對膽囊結石的治療比較重視。目前最常見的治療膽囊結石的方法有兩種：其一是傳統手術，其二是取石保膽手術[7-9]。第一種方式就是把膽囊摘除，但是由于膽囊的重要性，所以一旦把膽囊拆除則會出現各種并發癥，更會增加各種癌癥的風險。由于這種器官還具有一定的免疫能力，所以一旦把膽囊摘除，則會對病人的免疫系統造成影響。隨著科學技術的不斷發展，對膽囊結石病癥進行治療的新型方式開始出現，確保在不摘除膽囊的同時把結石取出，大大降低了并發癥，實現病人生活水平的提升，對膽囊收縮進行促進的生理激素之一是CCK，CCK- A受體與膽囊結石形成有關，CCK-A受體基因水平在不同地區和不同人群表達不甚相同。維吾爾族和漢族是新疆兩大主要民族，除了種族不同外，兩個民族在社會文化、生活方式上存在差異，在膽囊結石發生的流行病學上也有不同的特點。通過分析維吾爾族與漢族之間CCK- AR mRNA的表達可知，兩個民族之間表達存在差異，與膽囊結石發生差異有關，表達的下降與膽囊收縮功能降低也存在關聯性，膽囊收縮功能的下降會增加膽囊結石的發生率。患者CCK-A mRNA的表達達到一定水平，膽囊的收縮功能較好，可以根據此來制定個體預防和個性化的治療措施[10-11]。

綜上所述，維吾爾族膽囊結石患者膽囊壁CCK-AR mRNA表達的下調與膽囊收縮功能、排空功能有關，起著重要的作用，值得臨床深入研究。