精神分裂癥患者CYP2D6基因多態性與利培酮血藥濃度及臨床療效關系探究

王 皓， 徐紅林， 錢博文， 黃永祥

精神分裂癥(schizophrenia， SCH)是由于多種因素引起的臨床綜合征，主要表現為思維、認知功能和情感交流等障礙，嚴重影響了患者及其家人的正常生活[1]。利培酮(risperidone， RISP)是目前臨床常用的第二代抗精神分裂癥藥物，可有效改善SCH患者的精神病理癥狀，但仍有部分患者治療效果并不十分理想[2-3]。研究顯示，遺傳因素是造成藥物的治療反應出現個體差異的主要原因之一[4]。近年來，藥物基因組學分析了多種藥物在體內的代謝標記物，發現基因多態性可以影響藥物在體內的代謝過程，從而影響藥物治療反應，臨床應根據基因組學檢測結果和其他臨床因素來選藥和確定劑量[5-6]。

細胞色素P450家族2D6(CYP2D6)屬于CYP450酶家族，參與多種藥物在體內的代謝[7]。有研究顯示，RISP在體內可以經CYP2D6酶代謝分解為活性代謝產物9羥基利培酮(9 hydroxykirisperidone， 9-OH-RISP)，發揮其抗精神分裂癥作用[8]。但SCH患者的CYP2D6多態性和RISP的血藥濃度及治療效果之間的關系尚不清楚。因此，本研究分析了CYP2D6多態性與RISP的血藥濃度及治療效果之間的關系，以期指導臨床RISP的用藥治療。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2019年1月—8月本院收治的196例SCH患者的臨床資料。①納入標準：符合中國精神疾病分類與診斷標準第Ⅲ版(CCMD-Ⅲ)中SCH診斷標準[9]，簡明精神病量表(BPRS)總分≥40分；通過醫院醫學倫理委員會審核。②排除標準：治療期間聯合服用其他抗精神病藥物者；對RISP過敏者；合并其他精神障礙疾病(抑郁癥、精神發育遲緩等)者，合并嚴重心、肝、腎功能障礙者；臨床資料不完整者。根據CYP2D6攜帶的等位基因將其分為正常功能組(CYP2D6*1或*2)40例、低功能1組(攜帶一個CYP2D6*10)89例及低功能2組(攜帶2個CYP2D6*10)67例。正常代謝組男28例，女12例；年齡20～63(46.73±9.21)歲。低功能1組男60例，女29例；年齡21～65(47.95±9.38)歲。低功能2組男46例，女21例，年齡21～65(48.54±9.87)歲。3組性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2治療方法 所有納入患者均給予口服RISP(西安楊森有限公司生產，批號：110215218)，起始劑量為1 mg/d，口服8 d后給予4 mg/d，根據患者的癥狀調整劑量，最高劑量為6 mg/d，第14天給予RISP 3 mg/d維持劑量，8周為1個療程。患者治療過程中若出現失眠等不良反應，可給予相應藥物處理，不合并應用其他抗精神病藥物。

1.3RISP在SCH患者體內的代謝分析 SCH患者采用3 mg/d維持劑量RISP治療2周后，于早晨服藥前抽取靜脈血3～5 ml，乙二胺四乙酸抗凝，離心(3500 r/min，10 min)，取上清。一份用于檢測RISP和9-OH-RISP的血藥濃度，一份用于CYP2D6基因多態性的檢測。采用高效液相色譜串聯質譜分析儀分析血RISP和9-OH-RISP濃度，取100 μl血清，采用0.5 ml乙腈提取，離心(10 000 r/min，5 min)，取上清，進樣分析。參考已有文獻[10]，設置色譜條件為色譜柱：Waters Atlantis Hilic Silic C18，150×4.6 mm (i.d.)，粒徑5 μm；流動相：乙腈：甲酸銨(60∶40)；質譜條件：電噴霧離子源，正離子電離模式，多反應監測掃描。

1.4SCH患者CYP2D6基因多態性的檢測 取患者血清，并于48 h內提取血液白細胞DNA，以Sequenom MassArray系統基因分型檢測CYP2D6基因多態性。采用DNA提取試劑盒(北京索萊寶科技有限公司)提取DNA；Sequenom Mass ARRAY技術檢測基因多態性，檢測CYP2D6基因位點分別為：rs1065852(上游引物5'-ACGTTGGATGAGTCCACATGCAG-3'，下游引物5'-ACGTTGGATGTGGTGGACCTGATGCACCG-3');rs16947(上游引物5'-ACGTTGGATGTGAGAGCAGCTTCAATGATG-3'，下游引物5'-ACGTTGGATGTGGTCGAGGTGGTCACCATC-3');rs1135840(上游引物5'-ACGTTGGATGCACAGCCACTGTTTCCAACC-3'，下游引物5'-ACGTTGGATGTTTCTCACTCGTCCTGGTAG-3')。

1.5RISP治療SCH患者的療效觀察 分別于治療前和治療8周后，采用BPRS量表評估患者的精神癥狀，計算BPRS減分率=[(治療前-治療后)/(治療前-18)]×100%，共18項，每項0～7分，總分126分，得分越高，癥狀越嚴重。于治療8周后，采用不良反應癥狀量表(TESS)評定患者的不良反應，分值0～100分，分值越高，不良反應癥狀越嚴重。采用BPRS減分率評估臨床療效[11]，治愈為BPRS量表評分減少≥80%；顯效為BPRS量表評分減少60%～80%；好轉為BPRS量表評分減少30%～60%；無效為BPRS量表評分減少<30%。

2 結果

2.1SCH患者CYP2D6基因多態性 SCH患者CYP2D6*1等位基因的頻率為29.59%，CYP2D6*2等位基因的頻率為13.52%，CYP2D6*10等位基因的頻率為56.89%。正常功能組*1*1基因型22例，*2/*2基因型14例，*1/*2基因型4例；低功能1組*1*10基因型68例，*2*10基因型21例；低功能2組*10*10基因型67例。見表1。

表1 3組SCH患者的CYP2D6基因多態性[個(%)]

2.23組RISP血藥濃度比較 RISP和9-OH-RISP在0.1～40 ng/ml范圍內線性關系良好，回收率及方法學驗證回收率均>80%，日內、日間相對標準差均<15%，符合國家標準對分析方法學考核要求。檢測結果顯示，正常功能組和低功能1組的RISP血藥濃度顯著低于低功能2組，9-OH-RISP血藥濃度和9-OH-RISP/RISP比值顯著高于低功能2組(P<0.01)。正常功能組的RISP和9-OH-RISP血藥濃度與低功能1組比較差異無統計學意義(P>0.05)，9-OH-RISP/RISP比值顯著高于低功能1組(P<0.01)。見表2。

表2 3組SCH患者的RISP血藥濃度比較

2.3臨床療效比較 3組治療總有效率比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 3組SCH患者臨床療效比較(例)

2.4BPRS減分率和TESS評分比較 與治療前比較，正常功能組和低功能1組治療后BPRS減分率和TESS評分均顯著低于低功能2組，且正常功能組的BPRS減分率顯著低于低功能1組(P<0.01)。見表4。

表4 3組SCH患者行RISP治療后BPRS減分率和TESS評分比較

2.5CYP2D6基因多態性與9-OH-RISP/RISP比值、BPRS減分率和TESS評分之間的相關性 采用變量賦值，正常功能組(攜帶0個CYP2D6*10)=0，低功能1組(攜帶1個CYP2D6*10)=1，低功能2組(攜帶2個CYP2D6*10)=2。攜帶CYP2D6*10與9-OH-RISP/RISP比值呈顯著的負相關關系(r=-0.378，P<0.001)，與BPRS減分率和TESS評分呈顯著的正相關關系(r=0.242，P=0.016；r=0.284，P=0.004)。

3 討論

RISP是一種臨床常用的SCH治療藥物，在體內可代謝為活性產物9-OH-RISP，共同發揮其抗精神病作用[12-15]。近年研究顯示，CYP2D6基因多態性可影響RISP在體內的代謝過程，從而影響藥物的療效和不良反應[16-17]，因此本研究分析了CYP2D6基因多態性與RISP血藥濃度和療效之間的關系。CYP2D6基因具有100多種等位基因變異，可以通過編碼基因的堿基插入、位移或缺失等發生基因突變[18]。本研究結果顯示，SCH患者的CYP2D6基因CYP2D6*1等位基因的頻率為29.59%，CYP2D6*2等位基因的頻率為13.52%，CYP2D6*10等位基因的頻率為56.89%。與楊幃等[19]的研究結果基本一致，該研究分析了中國人的CYP2D6基因多態性，發現CYP2D6*10出現的頻率>50%，提示我國人群的CYP2D6基因以CYP2D6*10為主。CYP2D6*2 基因多態性并不影響CYP2D6酶活性，而CYP2D6*10可不同程度影響CYP2D6酶活性[20]。因本研究根據患者攜帶CYP2D6*10數量將其分為正常功能組、低功能1組(攜帶1個CYP2D6*10)和低功能2組(攜帶2個CYP2D6*10)，以期分析攜帶CYP2D6基因多態性與RISP臨床療效之間的關系。

CYP2D6基因多態性可引起藥物代謝的變化，導致藥物代謝喪失、性質改變及藥物代謝率下降或增強[21]。本研究結果顯示，正常功能組和低功能1組的RISP血藥濃度明顯低于低功能2組，9-OH-RISP血藥濃度和9-OH-RISP/RISP比值明顯高于低功能2組，提示攜帶2個CYP2D6*10可明顯降低9-OH-RISP血藥濃度和9-OH-RISP/RISP比值。Stingl和Viviani[22]報道，根據CYP2D6基因多態性可將藥物代謝分為快代謝型(攜帶野生型等位基因)、中代謝型(攜帶1個突變型等位基因)和慢代謝型(攜帶2個突變型等位基因)，提示本研究中正常功能組為快代謝型，低功能1組為中代謝型，低功能2組為慢代謝型，攜帶2個CYP2D6*10可明顯降低RISP在體內的代謝速率。張婷等[23]報道，9-OH-RISP/RISP比值對RISP在體內的代謝速率具有較高的預測效能，可預測RISP的代謝速率，證實攜帶CYP2D6*10可明顯降低RISP的體內代謝速率。

本研究結果顯示，正常功能組和低功能1組治療后的BPRS減分率和TESS均明顯低于低功能2組，提示攜帶2個CYP2D6*10可明顯改善SCH患者的精神癥狀并降低不良反應，分析原因可能是由于攜帶2個CYP2D6*10可明顯降低RISP在體內的代謝速率，提高RISP血藥濃度，在提高了臨床療效的同時，也降低了治療的不良反應，與陳進東等[24]研究結果基本一致。本研究結果顯示，攜帶2個CYP2D6*10與9-OH-RISP/RISP比值呈顯著的負相關，與BPRS減分率和TESS評分呈顯著的正相關，提示CYP2D6基因多態性可通過影響RISP的血藥濃度，影響臨床療效，臨床可根據患者的CYP2D6基因多態性，預測RISP在體內的代謝情況，設計個體化治療方案。

綜上所述，攜帶2個CYP2D6*10可以明顯降低RISP在體內的代謝速率，提高RISP血藥濃度，改善患者的精神癥狀，為臨床SCH患者的個體化治療提供臨床指導。