門冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液處方工藝優化

龍憲軍，仇 萍，劉 艷，陳迪釗，彭祖仁，楊雪純，龐思遠

(1 湖南正清制藥集團股份有限公司，湖南 懷化 418005；2 懷化學院，湖南 懷化 418000)

洛美沙星(Lomefloxacin)是第三代喹諾酮類抗菌藥物[1]，對綠膿桿菌的革蘭氏陰性菌及陽性菌有廣譜抗菌作用，廣泛應用于敏感細菌引起的呼吸道、泌尿生殖系統、腹腔、膽道、腸道、皮膚軟組織感染以及鼻竇炎等治療，臨床常用其鹽類。門冬氨酸洛美沙星(Lomefloxacin Aspartate)是有機酸鹽，相對常見的無機酸鹽如鹽酸洛美沙星[2-5]，對人體的刺激性更小，患者的耐受性更好。但是，門冬氨酸洛美沙星葡萄糖水溶液不穩定，有關物質、含量項目檢測異常，貯藏過程有沉淀析出，影響了產品質量和療效。因此，本文對門冬氨酸洛美沙星葡萄糖大容量注射劑制備工藝進行研究，篩選出最優處方和工藝，提高制劑的穩定性，為科學生產提供依據。

1 儀器與試藥

液相色譜儀，島津儀器(蘇州)有限公司；乙腈(批號20070301)，鄭州市國達儀器設備有限公司；磷酸二氫鉀(批號020050310)，天津市科密歐化學試劑開發中心；磷酸(批號20030801)，長沙市分路口塑料化工廠；四丁基溴化銨(批號2030317)，天津市科密歐化學試劑開發中心；洛美沙星對照品(批號0452-200001)，中國藥品生物制品檢定所；門冬氨酸洛美沙星(編號Y-704003)，鄭州永和制藥有限公司；無水葡萄糖(編號Y-702001)，河北圣雪葡萄糖有限責任公司；亞硫酸氫鈉(編號Y-702009)，湖南爾康制藥有限公司。

2 方法與結果

2.1 制備工藝

取配制全量3/5的注射用水，加入處方量的葡萄糖和亞硫酸氫鈉[6]，攪拌使溶解(活性炭先加法：加入活性炭過濾)；加入處方量的門冬氨酸洛美沙星(活性炭后加法：加入活性炭過濾)；再加入注射用水使成全量。0.45 μm和0.22 μm的濾芯過濾，檢測含量、檢查可見異物，合格后灌裝，滅菌，燈檢，包裝。

2.2 高效液相色譜法含量測定

色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.7 g，磷酸2.8 mL，加水稀釋至1000 mL)-0.05 mol/L四丁基溴化銨溶液(乙腈∶磷酸鹽緩沖液∶四丁基溴化銨溶液=15∶85∶4)為流動相；檢測波長為288 nm；理論塔板數按門冬氨酸洛美沙星計算，應不低于1500。門冬氨酸洛美沙星峰與各雜質峰的分離度應符合要求。

測定法：取洛美沙星對照品適量，加流動相溶解并稀釋成每1 mL中約含洛美沙星0.4 mg的溶液，搖勻；精密量取5 mL置25 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取20 μL注入色譜儀，記錄色譜圖。另取樣品2.0 mL，置于25 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，同法測定，按外標法以峰面積計算。

系統適用性實驗：取洛美沙星對照品19.24 mg，置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，作為對照品溶液。進樣20 μL，測定，結果顯示洛美沙星峰理論塔板數大于1500，主峰與其它雜質峰的分離度符合要求。

陰性干擾實驗：按制備工藝方法不加門冬氨酸洛美沙星制得陰性對照品；按上述色譜條件，將對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品各進樣20 μL，測定，結果表明樣品中其他組分對門冬氨酸洛美沙星含量測定無干擾。

線性關系考察：精密稱取洛美沙星對照品10.17 mg，置10 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 mL置25 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。分別精密量取貯備液1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL，置10 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，制成濃度為0.4068 mg/mL、0.8136 mg/mL、1.6272 mg/mL、2.4408 mg/mL、3.2544 mg/mL和4.0680 mg/mL的溶液，進樣20 μL，以對照品溶液濃度(X，mg/mL)對峰面積(Y)進行線性回歸，線性回歸方程：y=4.8364×106x+4.2445×105，r=0.9998)。結果表明，洛美沙星濃度在0.4～4.0 mg/mL范圍內與峰面積有良好的線性關系。

精密度實驗：取樣品，照供試品溶液的制備方法制成供試品溶液。重復進樣6次，結果6次的供試品峰面積的RSD為0.42%，表明儀器精密度較好。

重現性實驗：取同一批樣品，照供試品溶液的制備方法平行制備5份溶液，分別進樣，測定。結果5份平行樣含量RSD為0.52%，說明方法重現性較好。

穩定性實驗：取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8 h時測定。結果5次進樣峰面積RSD為0.44%，表明供試品溶液在8 h內穩定。

回收實驗：精密量取上述陰性對照液9份各100 mL，分別加入對照品制成已知含量的樣品，照供試品溶液的制備方法制成供試品溶液測定。計算含量、回收率和RSD，結果見表1。

表1 回收實驗結果

2.3 正交篩選與處方工藝優化

根椐門冬氨酸洛美沙星的性質和預實驗結果，以門冬氨酸洛美沙星的含量和有關物質為考察指標，設立3個考察因素，每個因素3個水平(表2)。在滿足自由度f試≤f表條件下，選擇正交表L9(34)安排實驗(表3)。實驗按2.1項下方法生產，測量定樣品含量和有關物質，考察3個因素對考察指標的影響。實驗結果見表3，方差分析見表4。

表2 因素水平表

表3 正交實驗設計與結果

表4 方差分析表

由表4可見影響含量的主要因素是B，最佳水平是B1，A、C對其影響不大，可任取一水平；影響可見異物的主要因素是C，其次是A，較佳工藝條件是C1A2，B對其影響不大，可任取一水平。綜合兩個考察指標沒有沖突，最終確定最佳處方工藝是A2B1C1，即以0.01%亞硫酸氫鈉作為穩定劑，配制時0.1%活性炭先加，采用115 ℃，30 min滅菌，滅菌后快速冷卻至70 ℃以下。

3 結 論

活性炭對門冬氨酸洛美沙星有很強的吸附作用，致使含量降低。一般做法是采用加大投料量來保證含量合格，但成本較高。本文采用在門冬氨酸洛美沙星投料前先加活性炭過濾，經過實踐效果較好，既保證了藥液的吸附效果，又避免對主藥造成影響，但此法不適用于主藥投料量較大的情況。

亞硫酸氫鈉對處方有穩定作用，而且0.01%作用明顯強于0.05%。添加時溫度不宜過高，保持約60 ℃即可，否則亞硫酸氫鈉受熱會分解，逸出SO2同時使處方不穩定。