“搶青”采摘對酸棗仁質量的影響△

周賽男，郭寶林

1.中國醫學科學院 北京協和醫學院 藥用植物研究所，北京 100193；2.山西醫科大學，山西 太原 030001

“搶青”多指果實種子類藥材在未達到適合采收期而提前采收的現象。“搶青”產生的原因主要是產新期前該藥材價格一般處于高位，提前采收后能提前上市獲得好的收益。連翹、五味子、梔子、八角、決明子等都存在“搶青”現象，以沒有權屬的野生藥材最為嚴重。采收期的差異將帶來藥材質量的變化，是非常值得關注的問題。本課題組曾經報道過連翹“搶青”帶來的成分含量變化[1]。近年來，酸棗仁藥材的“搶青”問題也比較嚴重，“搶青”采收的酸棗種子不成熟、總產量降低、種子干癟、種皮占比較大，可能影響其質量。酸棗仁是鼠李科植物酸棗ZiziphusjujubaMill. var.spinosa(Bunge) Hu ex H. F. Chow的干燥種子，具有養心補肝、寧心安神、斂汗生津的功效[2]。酸棗仁是藥食同源品種，在養神助眠等功能食品中也廣泛使用，用量逐年增加。野生酸棗分布于華北各地，產地的老百姓一般在8月中旬酸棗未成熟時開始采收，到9月中旬采收基本結束。傳統的采收時間在10月1日之后，也就是說對于酸棗仁，“搶青”這一做法已經形成了當今采收的慣例。本研究設計分離出種皮和種仁2個部位，在多個產地，從“搶青”時間到種子完全成熟的各個時期采收酸棗，測定酸棗仁不同采收時間和不同部位成分含量變化，在課題組前期建立的含量測定方法[3]基礎上，測定了三萜皂苷類(酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B)和黃酮類(斯皮諾素和6?-阿魏酰斯皮諾素)4個主要成分含量。

1 材料

1.1 樣品

1.1.1酸棗仁不同部位實驗樣品 酸棗仁樣品購自河北安國，產地分別為甘肅(GS)和山東(SD)，手工將種皮和種仁分離干凈，每份樣品不少于10 g，樣品信息見表1。

表1 酸棗仁不同部位實驗樣品信息

1.1.2不同采收期實驗樣品 在山西大寧、河北元氏、山東萊蕪和北京海淀4個主要產地，采集對象為生長旺盛、結果多的植株，采集時間為8月中旬—11月上旬，每次采樣均間隔半個月。1個重復10株，每株采集20粒果實，合并200粒果實為1個樣品，3個重復。每個采收期來自同樣的植株。每次收集完果實樣品，均晾干后去果肉去殼。樣品經中國醫學科學院藥用植物研究所郭寶林研究員鑒定為鼠李科植物酸棗Z.jujubaMill. var.spinosa(Bunge) Hu ex H. F. Chow的干燥種子，樣品信息來源見表2。

表2 不同采收期酸棗仁藥材信息

1.2 試藥

斯皮諾素、6?-阿魏酰斯皮諾素、酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B對照品均購自成都曼思特生物科技有限公司，純度均大于98%；乙腈(色譜純，美國Fisher公司)；蒸餾水購于杭州娃哈哈集團有限公司；其他試劑均為分析純。

1.3 儀器

ACQUITY UPLC(美國Waters公司)包括四元高壓梯度泵、真空脫氣機、自動進樣器、柱溫箱、ELS檢測器、TUV檢測器、Empower色譜工作站；AT261DeltaRange+w十萬分之一天平(METTLER TOLEDO儀器有限公司)；FA210N電子天平(上饒市鴻翔實業有限公司)。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

分別精密稱取4種對照品適量于5 mL容量瓶中，甲醇溶解，定容至刻度，得斯皮諾素2.110 mg·mL-1、6?-阿魏酰斯皮諾素1.950 mg·mL-1、酸棗仁皂苷A 2.176 mg·mL-1、酸棗仁皂苷B 1.004 mg·mL-1的對照品儲備液，并各取1 mL置5 mL的容量瓶中，定容，既得混合對照品儲備液。

2.2 供試品溶液的制備

精密稱取酸棗仁藥材粉末(過三號篩)1.0 g于50 mL具塞錐形瓶中，加入30 mL的70%乙醇，常溫超聲提取(功率500 W，頻率40 kHz)90 min，過濾，濾渣用8 mL的70%乙醇洗滌，合并濾液與洗液，將其轉移至旋蒸瓶中，旋干，用甲醇定容至5 mL的容量瓶中，搖勻，0.22 μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得。

2.3 色譜條件

色譜柱：ACQUITY C18柱(150 mm×2.1 mm，1.7 μm)；流動相為乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)，梯度洗脫(0～4 min，14.5%～16%A；4～5 min，16%～20%A；5～9 min，20%A；9～11 min，20%～37%A；11～17 min，37%A；17～19 min，37%～100%A；19～22 min，100%A；22～24 min，100%～14.5%A；24～27 min，14.5%A)；體積流量：0.3 mL·min-1；柱溫：35 ℃；進樣量：3 μL；檢測波長：335 nm；ELSD條件漂移管溫度：60 ℃；氣壓：172 kPa。色譜圖見圖1。

注：A.對照品UV色譜圖；B.樣品UV色譜圖；C.對照品ELSD色譜圖；D.樣品ELSD色譜圖；1.斯皮諾素；2.6?-阿魏酰斯皮諾素；3.酸棗仁皂苷A；4.酸棗仁皂苷B。圖1 酸棗仁對照品和樣品UPLC圖

2.4 含量測定

所有樣品的含量結果見表3～4，不同采收期含量變化見圖2。

表3 酸棗仁不同部位中2種黃酮和2種皂苷的質量分數(n=3) %

在種仁和種皮中同時存在2種黃酮和2種皂苷，但在種仁中的含量顯著高于種皮，2種黃酮的種仁含量約為種皮含量的3倍，酸棗仁皂苷A的種仁含量約為種皮含量的2倍，酸棗仁皂苷B在種皮和種仁含量相近。

所采集樣品中，不同采收期4個產地的測定結果所顯示的變化規律一致，即隨著酸棗果實成熟，黃酮類成分和皂苷類成分的含量均逐漸升高，該變化和文獻報道一致[4]，其中在9月下旬斯皮諾素和6?-阿魏酰斯皮諾素的含量達到最高點，其后直到11月上旬基本穩定，而在9月中旬酸棗仁皂苷A和B的含量達到最高點(其中酸棗仁皂苷B稍早一些)，其后基本穩定，和酸棗果實的完全成熟時間相一致[5]。

表4 酸棗仁4個產地不同采收期樣品中2種黃酮和2種皂苷的質量分數 %

注：A.河北元氏；B.山東萊蕪；C.北京海淀；D.山西大寧。圖2 酸棗仁4個產地不同采收期樣品含量變化

4個成分中隨果實成熟變化幅度最大的是斯皮諾素。這一結果表明，酸棗仁的采收時間是影響質量的重要因素，傳統的酸棗仁采收時間(10月1日后)是合理的，而“搶青”采收降低了酸棗仁的質量，越早采收兩類成分的含量越低，如傳統采收期采收的酸棗仁中斯皮諾素含量約為8月中旬采收的含量的3倍。

2.6 結論

由本研究可以看出，“搶青”采收將嚴重影響酸棗仁藥材中黃酮類成分和皂苷類成分的含量，《中華人民共和國藥典》規定酸棗仁藥材中斯皮諾素的質量分數不低于0.08%，酸棗仁皂苷A的質量分數不低于0.03%。經市場調研發現，酸棗仁藥材中斯皮諾素的含量差異比較大，除不同產地影響其含量外[6-7]，“搶青”采收也可能是主要影響因素。“搶青”采收后的未成熟酸棗仁比較干癟，種皮占比例較高，而種皮中各成分含量顯著低于種仁，應該是導致含量低的一個原因，應嚴格控制酸棗仁的采收期，但兩類主要成分在酸棗仁發育成熟過程的各個部位中的含量變化還可以做進一步研究。

“搶青”采收和其中黃曲霉毒素產生有一定的關系。早期采摘的果實果肉含水量大，比較黏，大多用堆漚方法，讓果肉腐爛后清洗去果肉，過程中引入了黃曲霉菌的感染[8]。未成熟種子比較干癟，加工過程容易產生種皮破裂，丟失了厚種皮的防護而易染菌。此外，未成熟種子含水量高，容易受到黃曲霉菌浸染。因此“搶青”采收可能也是引起黃曲霉毒素增加和超標的重要因素。