二代測(cè)序確診李斯特菌感染個(gè)案報(bào)道

作者簡(jiǎn)介：黃菁菁，出生年月日：1991.01.02，

性別：女，

籍貫：廣東汕頭，

科室：兒科，

職稱：住院醫(yī)師，

學(xué)歷：本科，

工作研究方向：兒科，

郵政編碼：519000

【中圖分類號(hào)】 R21

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】2095-6851（2020）08-126-02

李斯特菌屬有2個(gè)群7個(gè)種，僅單核細(xì)胞增生李斯特菌（LM）可引起人類感染[1]，單核細(xì)胞增生李斯特菌是一種革蘭陽(yáng)性、兼性厭氧菌，無芽孢，一般不形成莢膜，對(duì)堿和鹽及低溫的耐受力較強(qiáng)。老年人、孕婦、新生兒及免疫系統(tǒng)功能低下的成年人是最主要的易感人群，感染常引發(fā)敗血癥、腦膜炎、流產(chǎn)和死胎等[2]。人類感染通常是攝入受污染的食物，報(bào)道的常見污染食品有未經(jīng)高溫消毒的牛奶、軟奶酪、熟食肉類、蔬菜、生海鮮等[1]。

本例患兒系1歲2月女性患兒，既往體健，因“發(fā)熱5天，咳嗽4天”入院，發(fā)熱前曾進(jìn)食速凍餃子，病程中伴腹瀉，入院后予頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉聯(lián)合阿奇霉素抗感染，仍有反復(fù)發(fā)熱，入院第3天2份血培養(yǎng)回報(bào)無害李斯特菌，將抗生素調(diào)整為氨芐西林聯(lián)合阿奇霉素，同時(shí)丙種球蛋白免疫支持治療。同日患兒出現(xiàn)易激惹，呼吸急促、呼吸困難，雙側(cè)巴氏征陽(yáng)性，完善腦脊液檢查提示白細(xì)胞升高，淋巴細(xì)胞為主，葡萄糖下降。遂改為美羅培南聯(lián)合萬古霉素抗感染。入院第8天復(fù)查腦脊液提示白細(xì)胞升高，淋巴細(xì)胞為主，葡萄糖下降，細(xì)菌培養(yǎng)無菌生長(zhǎng)，感染病原高通量基因檢測(cè)示檢測(cè)出李斯特菌屬：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特菌14%，無害李斯特菌4%。入院第9天完善頭顱MRI提示1.雙側(cè)腦室后角旁異常信號(hào)影：膠質(zhì)增生？髓鞘化異常？2.雙側(cè)腦室擴(kuò)大。入院第19天復(fù)查腦脊液生化常規(guī)大致正常，細(xì)菌培養(yǎng)未見細(xì)菌生長(zhǎng)，感染病原高通量基因檢測(cè)未見李斯特菌屬。入院第24天復(fù)查血培養(yǎng)陰性。經(jīng)美羅培南抗感染24天，患兒治愈出院。

討論

李斯特菌屬，為革蘭陽(yáng)性桿菌、兼性胞內(nèi)寄生菌，是重要的食源性人獸共患病原菌，能夠引起人類嚴(yán)重感染;廣泛存在于自然界、水源、食品等;主要通過糞-口傳播，常侵犯嬰幼兒、妊娠老人、新生兒和免疫功能低下患者，臨床醫(yī)師需引起重視。當(dāng)經(jīng)驗(yàn)用藥未果時(shí)，需考慮是否為L(zhǎng)M感染。

李斯特菌性腦膜炎可出現(xiàn)發(fā)熱、頭痛及腦膜刺激征等癥狀及體征，若侵及腦實(shí)質(zhì)則產(chǎn)生意識(shí)或精神障礙以及不對(duì)稱性顱神經(jīng)功能缺損，小腦體征，

偏癱或偏身感覺異常等長(zhǎng)束征。李斯特菌性腦膜炎或腦膜腦炎外周血化驗(yàn)結(jié)果多無特征性表現(xiàn)，與其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染難以區(qū)分。其診斷主要依靠腦脊液中發(fā)現(xiàn)李斯特菌，但陽(yáng)性率較低，培養(yǎng)陽(yáng)性率為46%-68%，且培養(yǎng)耗時(shí)較長(zhǎng)并存在假陰性，可能導(dǎo)致延誤診斷使治療不充分，致殘率及病死率較高[3]。

二代測(cè)序（NGS）。可直接由患者病變腦組織、腦脊液 甚至尿液中獲取病原微生物信息，大大縮短了檢測(cè)周 期，并且通量高，克服了針對(duì)性診斷方法的局限性。理論 上，幾乎所有的微生物都可以基于特定的核酸序列進(jìn)行唯 一鑒定，對(duì)于復(fù)雜、少見感染及新型致病微生物感染的檢出 存在明顯優(yōu)勢(shì)。但尚存在一定挑戰(zhàn)，例如污染菌與實(shí)際致 病菌的區(qū)分、成本較高、檢驗(yàn)周轉(zhuǎn)時(shí)間仍較長(zhǎng)等。目前腦 脊液二代測(cè)序多作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的篩查方法，陽(yáng)性 病例尚需要PCR、血清學(xué)、細(xì)菌學(xué)等方法進(jìn)行驗(yàn)證。

青霉素、阿莫西林和氨芐青霉素是LM推薦頻率較高的抗菌藥物，其中青霉素屬于時(shí)間依賴性抗生素，半衰期約30 min，500萬～2 400 萬U/d，給藥頻次1次/6 h。而阿莫西林是一種最常用的半合成青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素，為一種白色粉末，半衰期約為61.3分鐘。在酸性條件下穩(wěn)定，胃腸道吸收率達(dá)90%。阿莫西林殺菌作用強(qiáng)，穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng)。是目前應(yīng)用較為廣泛的口服半合成青霉素之一。另外，氨芐西林為半合成的廣譜青霉素，抗菌機(jī)制是阻止細(xì)菌的細(xì)胞壁合成。對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的作用與青霉素近似，對(duì)草綠色鏈球菌和腸球菌的作用較優(yōu)。

但臨床實(shí)際應(yīng)用治療LM的抗菌藥物方案?jìng)€(gè)體差異較大，單獨(dú)使用氨基青霉素或芐基青霉素或與氨基糖苷類聯(lián)用被認(rèn)為是抗菌藥物治療的金標(biāo)準(zhǔn)。在體內(nèi)環(huán)境中，碳青霉烯類抗菌藥物（美羅培南）對(duì)LM的活性明顯增強(qiáng)，但碳青霉烯類抗菌藥物對(duì)LM療效尚未得到明確證實(shí)，需要結(jié)合臨床實(shí)際情況必要時(shí)選擇應(yīng)用[4]。二代測(cè)序技術(shù)可以快速檢測(cè)病原耐藥基因，指導(dǎo)臨床用藥，并且二代測(cè)序可提高李斯特菌檢出率，明確診斷，為治療方案的選擇提供有力的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]?羨一心，陳國(guó)洪，王莉，等.兒童單核細(xì)胞增生李斯特菌腦膜炎臨床研究[J].臨床研究，2019，27（01）：8-8

[2]?陶佳，楊佰虎，馬紅，等.單核細(xì)胞增生李斯特菌感染的臨床分析[J].中國(guó)感染與化療雜志，2019，19（4）：392-392

[3]?辛子凱，鄒月麗，范佳，等.腦脊液二代測(cè)序確診中樞神經(jīng)系統(tǒng)李斯特菌感染二例[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2019，99（25）：1990-1990

[4]?李牧寒，李永軍，胡冰，等.有并發(fā)癥的產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌腦膜炎三例臨床特點(diǎn)與二代測(cè)序結(jié)果分析[J].中華兒科雜志，2019，57（8）：606-606