如何檢驗環境水中的微生物

費航 徐琴

【中圖分類號】 R123.1

【文獻標識碼】A

【文章編號】2095-6851（2020）08-067-01

水是生命之源，是一種非常珍貴的自然資源，特別是在人類居住周圍的水之源，水之源的好壞直接關系著每一個人的生命健康。在我國大部分地方都存在生活用水被工廠廢水、人類、牲畜糞便污染的情況。這些因數污染造成的水質污染往往存在多種不同種類的微生物，其中主要包含了腐蝕性微生物以及病原性微生物。腐蝕性微生物主要起廢物分解作用對人體一般無害，但是病原性微生物就會對人體造成極大的傷害，一般都會引起病毒性感染，如常見的霍亂、傷寒、細菌性痢疾以及傳染性肝炎等流行疾病。因此特別是對于人類生活中用水以及水源進行相關的微生物檢驗是一種必要。要對水中微生物進行檢驗主要包含了兩個項目：細菌總數以及大腸菌群的測定。水中有害細菌的數量可以作為判斷水質是否被污染的標準，細菌越多、種類越廣，也就能說明水質污染越嚴重。細菌總數的是指一毫升水樣在普通瓊脂培養基上降溫度保持在37攝氏度，經過24小時后的培養得到的平板細菌的總數。

1?水質微生物及指示菌

水是微生物最適宜生長的壞境，特別是在被污染的水質中，由于存在大量的有機物質，使得微生物群在這種壞境中能夠大量繁殖。因此水體是僅次于土壤的第二種微生物天然培養基。水環境中的微生物主要來源于周圍土壤，以及人類、動物的糞便造成的污染帶來。水體中微生物的數量和種類受各種環境條件的制約。經過研究發現，水中存在的微生物類型主要是以革蘭氏陰性桿菌占主導。綜合比較多種環境下的水壞境，可以得出河水及溪水中革蘭氏陽性菌數量最多，這是由于陸地微生物沖洗污染所造成的。水中能夠引起疾病的病原性微生物一般都不是水中固有的，絕大部分都是由于周圍環境污染帶來的，其中主要以人和其它溫血動物的糞便污染。水中經常可檢測到的病原性細菌主要包含了：志賀氏菌、副溶血性弧菌、沙門氏菌、小腸結炎耶爾森氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌等

目前，世界各國一致認為大腸桿菌可以作為水質受糞便污染較好的判斷指南。在我國，對水質控制也采用大腸菌群作為指示菌，GB5749-2006《中華人民共和國國家標準 生活飲用水衛生標準》規定，生活用水中大腸桿菌的數量不得超過每升3個。

2?水質微生物檢驗方法

GB5749-2006《中華人民共和國國家標準 生活飲用水標準檢驗法》提供了水質中細菌總數和總大腸菌群的檢測方法。

2.1?細菌總數的檢測?國家標準中，細菌總數的是指一毫升水樣在普通瓊脂培養基上將溫度保持在37攝氏度，經過24小時后的培養得到的平板細菌的總數。對于生活飲用水，可以直接在飲水處采樣1ml水樣品置入平皿中，在加入營養瓊脂充分震蕩均勻，在37℃條件下培養24小時，進行計數。對水源進行測量，可依據不同的水源情況做10倍梯度稀釋，針對性選擇1毫升水樣，品置入平皿中，在加入營養瓊脂充分震蕩均勻，在37℃條件下培養24小時，進行計數。按照規定格式報告每毫升水中細菌總數。

2.2?總大腸菌群的檢測?國家標準中，大腸桿菌可以作為水質受糞便污染較好的判斷指南。總大腸菌群指的是一群需氧及兼性厭氧的細菌群在37℃環境下經過代謝生長使乳糖發酵，在24h內培養得到革蘭氏陰性無芽胞桿菌。樣品中總大腸菌群數的含量，就是水質被污染的程度，并且可以間接地預示有腸道致病菌存在的可能。依據國家標準可以得到多管發酵法及濾膜法來檢測總大腸菌群的數量。

2.2.1?利用多管發酵法檢測總大腸菌群要注意三步?初發酵試驗，平板分離，復發酵證實試驗。初發酵試驗，利用乳糖蛋白胨培養液在37℃條件下培養24小時，記錄產酸產氣量。對陽性管培養物，接種于品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基，觀察菌落特征，并進行革蘭氏染色和鏡檢。

2.2.2?濾膜法檢測總大腸菌群，實際上就是使用微孔濾膜，經過過濾一定量的水樣品，可以將水樣品中存在的細菌攔截在濾膜上，再將攔截有細菌菌群的濾膜放置于選擇性培養基上（如品紅亞硫酸鈉培養基），將溫度保持在37攝氏度，經過24小時后的培養以及證實試驗后，無需其他在處理可直接計數濾膜上生長的典型大腸菌群菌落，并計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數。

3?說明

3.1?在進行菌落總數測定實驗中，要靈活選擇適合條件的稀釋度進行。對生活飲水進行測量時，可以根據國家標準規定每毫升不得超過100個這個條件，可以不做稀釋梯度的處理而是直接吸取1毫升到平板進行培養。

3.2?培養時間?與檢測食品中存在微生物的試驗不同，檢驗環境水中的微生物中的總數，培養時間采用24小時。

3.3?總大腸菌群的測定方法，在測定人類飲用水時應該考慮到飲水與水源處的污染可能不同的原因，因此在測量時要采用不同的接種量，檢數表也不相同。

3.4?多倍濃度培養液?主要用于，接種量超過1毫升的情況。如配制3倍濃縮乳糖蛋白胨培養液50mL，加入100mL水后，總體積為150mL，培養液恢復到正常濃度。

3.5?濾膜法檢測總大腸菌群?采用這種測量方法必須滿足大量低濁度水樣，大量水樣濾過濾膜后，水中所含有的所有細菌均截留在濾膜上。