飼糧添加銀耳多糖對斷奶仔豬腸道健康的影響

薛瑞婷，李 棟

（呂梁學院，山西呂梁 033000）

在畜牧業生產中，抗生素被長期添加到飼料中以維持動物健康、促進動物生長。但抗生素的不當使用會導致嚴重的細菌耐藥性，受損人類健康，對環境也有嚴重影響（劉正文，2019）；因此，對抗生素替代產品的研究迫在眉睫。銀耳多糖（Tremella Polysaccharide，TP）作為一種酸性雜多糖是銀耳的主要活性成分，能調節動物免疫、糖脂代謝，保護腸道健康，促進動物生長（楊永生等，2011）。研究發現，日糧添加不同劑量的TP均能顯著提高仔豬生長性能，而以0.4%的添加量效果最佳（鄒健，2006）。斷奶仔豬由于受到飼料變化、應激及環境變化的影響會造成腸道形態與功能受損，腹瀉率提高，生長性能遭到抑制（房祥軍，2006）。因此，本試驗旨在研究TP對斷奶仔豬腸道健康的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗設計本試驗選取20頭遺傳背景一致、健康狀況良好、胎次和體重接近的21日齡斷奶仔豬，隨機分為對照組（飼喂基礎飼糧）和TP組（基礎飼糧中添加0.4% TP），每個處理10個重復，每個重復1頭豬。預飼期3 d，試驗期為21 d。

1.2 試驗材料TP是采用銀耳孢子深層液體發酵，干燥，每克粉末由5 mL發酵液載體干燥而成，TP含量為56.7%。

1.3 試驗飼糧所有試驗豬均飼喂玉米-豆粕型飼糧，基礎飼糧組成及營養水平見表1。TP組在對照組基礎上添加0.4% 銀耳多糖。

1.4 飼養管理試驗在四川省某規模化養殖場進行，所有仔豬單籠飼養于仔豬代謝籠中。所有試驗豬按常規管理方式進行飼養管理。正式試驗期間仔豬自由采食與飲水，每日飼喂4次（08∶ 00，12∶ 00，16∶ 00，20∶ 00），并記錄試驗豬腹瀉情況。

1.5 樣品采集與處理在試驗第22天屠宰所有試驗豬，迅速分離腸段。在空腸固定部位取樣品，用4%多聚甲醛溶液固定。另外，取空腸相同部位樣品用載玻片將空腸黏膜輕輕刮下來，置于滅菌EP試管分裝，-80℃保存待測；取盲腸和結腸食糜于滅菌EP管中，液氮速凍，-80℃保存待用。

1.6 測定指標與方法

1.6.1 空腸形態結構學 空腸中段取樣后立即于4%多聚甲醛溶液中固定，經過處理后，每個組織樣品選取10個無損的視野單元，在光學顯微鏡下觀察并拍照，用目鏡測微鏡測定絨毛高度和隱窩深度，并進行計算。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（風干基礎，%）

1.6.2 空腸黏膜消化酶活性 采用南京建成生物工程研究所相應的試劑盒測定胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、蔗糖酶、乳糖酶和麥芽糖酶活性。

1.6.3 盲腸食糜微生物菌群數量測定 盲腸食糜微生物菌群數量測定具體操作步驟如下：

（1）食糜總RNA的提取：稱取0.2 g盲腸和結腸食糜樣品后，DNA的提取采用D4015-01 E.Z.N.A.TM Stool DNA isolation（Omega，美 國）試劑盒進行。

（2）引物和探針設計：參考Qi（2013）等。

（3）實時熒光定量PCR：按照FP-203 Real Master Mix（天根公司，中國）試劑盒說明操作方法檢測乳酸桿菌、大腸桿菌、芽孢桿菌和雙歧桿菌。按照RR820A（TaKaRa，日本）試劑盒說明操作方法檢測總菌。

1.7 數據統計分析試驗數據采用獨立樣本t檢驗對試驗數據進行分析，P＜0.05表示差異顯著；結果以“平均值±SEM”表示。

2 結果

2.1 日糧添加TP對仔豬空腸形態結構的影響由表2可知，與對照組相比，TP組仔豬腸絨毛高度和絨毛高度與隱窩深度的比值顯著提高（P＜0.05）；仔豬空腸隱窩深度有降低趨勢（P=0.083）。

表2 日糧添加TP對仔豬空腸形態結構的影響

2.2 日糧添加TP對仔豬空腸黏膜消化酶活性的影響由表3可知，與對照組相比，日糧添加TP可顯著提高仔豬空腸淀粉酶、脂肪酶和乳糖酶活性（P ＜ 0.05）。

表3 日糧添加TP對仔豬空腸黏膜消化酶活性的影響

2.3 日糧添加TP對仔豬盲腸食糜微生物菌群數量的影響由表4可知，與對照組相比，TP組仔豬盲腸食糜總菌和大腸桿菌數量顯著降低（P＜ 0.05）。

表4 日糧添加TP對仔豬盲腸食糜微生物菌群數量的影響 lg cfu/g

3 討論

前人研究證明，銀耳多糖是銀耳的主要活性成分，可分為酸性雜多糖、中性雜多糖、酸性雜多糖、胞壁多糖和胞外多糖5大類。近年來發現，銀耳多糖具有廣泛的藥理作用，能促進動物腸道健康發育。

3.1 日糧添加TP對仔豬空腸形態結構的影響小腸上皮的健康狀況保證了其正常的生理功能（Liu等，2009）。黏膜上皮形態的損傷會直接影響腸屏障功能，損害營養物質的吸收。腸道黏膜絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度（V/C）對仔豬消化吸收功能有顯著影響。V/C值越大，腸黏膜面積越大，消化吸收能力更強；V/C值越小，消化吸收能力更差。研究表明，斷奶應激導致仔豬腸道黏膜絨毛萎縮、高度下降、隱窩深度加深（顧憲紅等，20001）。鄒健等（2006）研究發現，日糧添加TP能顯著增加絨毛高度、降低隱窩深度，改善腸道形態，這與本研究結果基本一致。本研究發現，與對照組相比，日糧添加0.4% TP可顯著提高仔豬腸絨毛高度和絨毛高度與隱窩深度的比值，并有降低仔豬空腸隱窩深度的趨勢。這表明日糧添加0.4%銀耳多糖能顯著促進斷奶仔豬空腸形態結構健康發育。

3.2 日糧添加TP對仔豬空腸粘膜消化酶活性的影響消化酶是將食糜分解成動物可吸收的小分子物質，促進食物中的糖類、脂肪、蛋白質的分解，可將其轉變成小分子物質，促進動物的消化吸收（高順賓和吳天星，2003）。本研究發現，與對照組相比，日糧添加TP可顯著提高仔豬空腸淀粉酶、脂肪酶和乳糖酶活性。杜恒裔等（2019）研究發現，飼糧添加滸苔多糖可提高肉雞腸道內容物消化酶活性，有利于對養分的消化吸收。本研究結果表明，日糧添加0.4%銀耳多糖能顯著提高仔豬空腸消化酶活性，促進腸道消化吸收。

3.3 日糧添加TP對仔豬盲腸食糜微生物菌群數量的影響已有研究表明，腸道微生物區系可以被認為是胃腸道健康的重要決定因素（Sohail等，2012）。在應激條件下，腸道微生物生態的穩定受到干擾，導致生物失調（Sohail等，2012）。銀耳多糖的作用機制包括3方面：（1）細菌的相互抑制；（2）組織外源性病原菌在腸道內的定植；（3）競爭性排泄（鄒健，2006）。本研究發現，與對照組相比，日糧添加TP可顯著降低仔豬盲腸食糜總菌和大腸桿菌數量。大腸桿菌是一種條件致病菌，在一些條件下可能造成動物發生胃腸道感染等，導致動物腹瀉加劇（宋丙奎等，2009）。鄒健等（2006）研究發現，日糧添加TP能顯著增加雙歧桿菌和乳酸桿菌數量，降低大腸桿菌數量。這表明日糧添加0.4%銀耳多糖可調節腸道菌群結構，促進腸道健康。

4 結論

以上研究表明，日糧補充0.4%銀耳多糖可顯著改善斷奶仔豬空腸形態、提高空腸黏膜消化酶活性，調節仔豬盲腸菌群結構，促進腸道健康發育。