黃曲霉毒素污染日糧對(duì)雛鴨生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化及血清激素水平的影響

易宗容，馮堂超，朱銀剛

（1.宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川宜賓 644000；2.宜賓市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，四川宜賓 644000；3.北川羌族自治縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，四川北川 622750）

曲霉菌類產(chǎn)生的黃曲霉毒素B1是黃曲霉毒素亞群中毒性最強(qiáng)的一類。中國(guó)有世界上養(yǎng)殖數(shù)量最多的鴨子。鴨是所有家禽中對(duì)黃曲霉毒素B1最敏感的物種，因?yàn)樗鼈儾荒苡行У卮x黃曲霉毒素。玉米作為鴨飼料的主要能量原料，占我國(guó)鴨飼料組成的50%以上。此外，據(jù)報(bào)道，玉米被黃曲霉毒素毒素B1污染的概率達(dá)80%以上。黃曲霉毒素B1對(duì)鴨子生長(zhǎng)性能、肝臟功能、免疫、腸道形態(tài)和血液指標(biāo)具有負(fù)面影響（周守長(zhǎng)等，2015）。飼喂黃曲霉毒素污染的飼料會(huì)抑制肉鴨生長(zhǎng)性能和腸道形態(tài)，改變消化生理（Feng等，2017）。黃曲霉毒素B1是蛋白質(zhì)合成的有效抑制劑，因?yàn)辄S曲霉毒素環(huán)氧化物作為其代謝物，可能與家禽中的DNA和RNA相互作用（Grenier和Applegate，2013）。基于上述結(jié)果，我們推測(cè)黃曲霉毒素B1對(duì)肉鴨的有害影響與營(yíng)養(yǎng)吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體和攝入消化過(guò)程中涉及的幾種激素有關(guān)。但在天然被黃曲霉毒素B1污染的飼糧中，關(guān)于血清激素和營(yíng)養(yǎng)吸收載體基因表達(dá)的信息非常有限。因此，本研究旨在探討飼糧中黃曲霉毒素B1對(duì)雛鴨生長(zhǎng)性能、回腸表觀消化率、血清激素水平及鈉-鉀-ATP酶基因表達(dá)的影響。

1 材料與方法

1.1 日糧設(shè)計(jì)與動(dòng)物分組試驗(yàn)共選擇了性別和體重基本一致的1日齡雛鴨600只，隨機(jī)分為兩組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50只。兩組肉鴨分別飼喂以正常玉米為基礎(chǔ)的基礎(chǔ)日糧（黃曲霉毒素B1水平為2.87 μg/kg）和100%黃曲霉毒素B1污染玉米替代正常玉米的日糧（黃曲霉毒素B1水平為124.42 μg/kg）。試驗(yàn)日糧（試驗(yàn)組、對(duì)照組）營(yíng)養(yǎng)及毒素水平見(jiàn)表1、表2、表3。

1.2 數(shù)據(jù)記錄分別在第1、7、14天對(duì)雛鴨稱重并記錄采食量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。每天對(duì)死禽稱重，并記錄死亡情況。

1.3 樣品采集與分析試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選擇6只雛鴨頸靜脈抽取血樣，置于無(wú)菌注射器中4℃保存。樣品以3000×g離心15 min，分離血清。用反滲透水沖洗收集2/3回腸后部的消化液，測(cè)定氮、總能、干物質(zhì)、粗脂肪、鉻、氨基酸。取中段空腸切片，用載玻片輕輕刮取，黏膜置于液氮中冷凍，于-80℃保存，進(jìn)行鈉-鉀-ATP酶基因表達(dá)Na+、K+-ATPase的相對(duì)基因表達(dá)分析（Gal-Garber等，2003）。血清樣品用試劑盒法測(cè)定神經(jīng)肽Y、胃饑餓素、瘦素、膽囊收縮素、胰島素和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1濃度。

表1 試驗(yàn)用玉米主要營(yíng)養(yǎng)成分

表2 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

表3 試驗(yàn)用玉米和日糧中毒素含量

1.4 統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)采用SAS軟件T檢驗(yàn)程序進(jìn)行方差分析，以重復(fù)為試驗(yàn)單位。數(shù)據(jù)的可變性被表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃曲霉毒素B1污染日糧對(duì)雛鴨生長(zhǎng)性能的影響由表4可知，在1～7 d時(shí)，黃曲霉B1毒素污染日糧組顯著降低了7 d雛鴨的體重、平均日增重和平均日采食量，較正常玉米日糧組分別顯著降低22%、31%和23%（P＜0.05），料重比提高11%。在8～14 d時(shí)，黃曲霉毒素B1污染日糧組較正常玉米組平均日采食量、平均日增重和料重比分別降低41%、47%和10%（P＜0.05）。在整個(gè)試驗(yàn)中，黃曲霉毒素B1污染日糧組較正常玉米日糧組體重、平均日增重、平均日采食量和料重比分別顯著降低34%、39%、43%和9%（P＜0.05）。此外，黃曲霉毒B1污染日糧組1～7 d和8～14 d死亡率顯著提高（P＜0.05）。

表4 黃曲霉毒素B1污染日糧對(duì)雛鴨生長(zhǎng)性能的影響

2.2 黃曲霉毒素B1污染日糧對(duì)雛鴨回腸養(yǎng)分表觀消化率的影響由表5可知，黃曲霉毒素B1污染日糧組干物質(zhì)、氮和氨基酸回腸表觀消化率較正常玉米日糧組顯著提高（P＜0.05），但正常玉米日糧組表觀消化能顯著高于黃曲霉毒素B1污染日糧組（P＜0.05）。正常玉米日糧組較黃曲霉毒素B1污染日糧組有提高粗脂肪回腸表觀消化率的趨勢(shì)（P=0.09）。

表5 黃曲霉毒素B1污染日糧對(duì)雛鴨回腸養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.3 黃曲霉毒素B1污染日糧對(duì)雛鴨血清激素水平及鈉-鉀-ATP酶基因表達(dá)的影響由表6可知，黃曲霉毒素B1污染日糧可使血清瘦素和胰島素樣因子-1水平升高（P＜0.05），而神經(jīng)肽Y、胃饑餓素、膽囊收縮素和胰島素水平無(wú)顯著差異（P＞0.05）。此外，兩組日糧對(duì)鈉-鉀-ATP酶基因相對(duì)表達(dá)量的影響也無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表6 黃曲霉毒素B1污染日糧對(duì)雛鴨血清激素水平及鈉-鉀-ATP基因表達(dá)的影響

3 討論

黃曲霉毒素B1對(duì)生長(zhǎng)性能的不利影響可能是由于厭食、精神萎靡、肝功能受損及抑制蛋白質(zhì)合成和脂肪生成有關(guān)。在本研究中，料重比在8～14 d和1～14 d分別減少10%和8%，但在1～7 d增加了11%。Chen等（2016）在肉雞中也觀察到料重比的這種不一致性。作者推測(cè)這種不一致性可能是由于黃曲霉毒素B1的來(lái)源（玉米自然污染或接種純化的真菌毒素）、劑量和物種特異性。此外，日增重的降低可能是由于平均日采食量減少，而采食量減少可能是由于養(yǎng)分消化率降低，本研究中料重比的降低支持了這一觀點(diǎn)。

Feng等（2017）研究黃曲霉毒素B1對(duì)胃腸道影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，黃曲霉毒素B1在腸道中也發(fā)生了向黃曲霉毒素環(huán)氧化物的生物轉(zhuǎn)化，因此，其可能影響胃腸道的消化和吸收。但關(guān)于鴨營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的研究較少。Chen等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，純化黃曲霉毒素B1（200 μg/kg對(duì)北京雛鴨回腸干物質(zhì)和氮消化率無(wú)顯著影響。相反，本研究中黃曲霉毒素B1可提高回腸干物質(zhì)、氮和氨基酸的表觀消化率。作者認(rèn)為，養(yǎng)分消化率的提高可能是采食量降低的補(bǔ)償作用，但養(yǎng)分消化率的提高不足以恢復(fù)黃曲霉毒素B1對(duì)生長(zhǎng)性能的抑制作用。

由于黃曲霉毒素B1對(duì)采食量有顯著抑制作用，我們推測(cè)其對(duì)雛鴨的不良影響可能與營(yíng)養(yǎng)吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體和攝入消化過(guò)程中涉及的幾種激素有關(guān)。瘦素主要產(chǎn)生于白色脂肪組織的脂肪細(xì)胞，通過(guò)抑制食欲和增加能量消耗來(lái)調(diào)節(jié)脂肪的儲(chǔ)存。本研究中，黃曲霉毒素B1對(duì)胃饑餓素、神經(jīng)肽Y和膽囊收縮素?zé)o顯著影響，胃饑餓素、神經(jīng)肽Y與瘦素的作用相反，但膽囊收縮素是由小腸黏膜內(nèi)層的腸內(nèi)分泌細(xì)胞合成并釋放，通過(guò)降低胃排空率來(lái)抑制饑餓和采食量（Shillabeer和Davison，1987）。鈉-鉀-ATP酶是一種溶質(zhì)泵，將鈉泵出細(xì)胞，將鉀泵入細(xì)胞，有助于維持靜息電位，影響營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)和調(diào)節(jié)細(xì)胞體積（Hall和Guyton，2006）。在本研究中，黃曲霉毒素B1污染日糧組雛鴨空腸鈉-鉀-ATP酶基因相對(duì)表達(dá)量提高了22%，但與正常玉米日糧組無(wú)顯著差異，其表達(dá)量的增加可能在一定程度上提高了腸道通透性，這是機(jī)體對(duì)毒素吸收的一種主動(dòng)防御機(jī)制（Chen等，2016）。

4 結(jié)論

基于上述研究結(jié)果和討論，雛鴨飼喂自然污染的玉米日糧（黃曲霉毒素含量為124.42 μg/kg）會(huì)提高血清瘦素水平，抑制平均日采食量。此外，料重比降低導(dǎo)致日增重下降，同時(shí)進(jìn)一步降低采食量。