影響高同型半胱氨酸型高血壓發生的基因和環境危險因素

葉叔安 張安平 許藝璇

福建省泉州市泉港區醫院 362801

高血壓患者長期存在的高血壓狀態極易導致各種臟器損害，是發生心腦血管事件的重要危險因素之一[1]。而當高血壓患者伴有血同型半胱氨酸水平升高時，其發生心腦血管事件的風險更會顯著增加。因此，積極了解影響高同型半胱氨酸型高血壓發生的危險因素，以便早期進行心腦血管事件的防治十分必要。然而，目前國內關于高血壓與高同型半胱氨酸血癥的相關研究還較少，故本文就以114例高血壓患者作為觀察對象，對影響高同型半胱氨酸型高血壓發生的基因和環境危險因素進行了探究，現總結如下。

1 資料與方法

1.1 基線資料 選取2018年3月—2019年6月我院收治的114例原發性高血壓患者作為觀察對象，男43例，女71例；年齡34～93歲，平均年齡(60.21±3.45)歲；從不吸煙、曾經吸煙、正在吸煙患者分別為80例、14例、20例；從不飲酒、偶爾飲酒、曾經飲酒、正在飲酒患者分別為91例、5例、8例、10例。納入標準：(1)均符合WHO/ISH《高血壓指南》中的原發性高血壓診斷標準[2]；(2)知曉、同意并愿意配合本研究者；(3)經醫院醫學倫理委員會批準者。排除標準：(1)繼發性高血壓；(2)合并嚴重心律失常、冠心病、腦卒中以及肝腎功能不全、惡性腫瘤等疾病者；(3)有腦卒中、心肌梗死等疾病史或學運重建等手術史者；(4)妊娠和哺乳期婦女。

1.2 方法

1.2.1 血同型半胱氨酸水平檢測。采用酶循環法進行血同型半胱氨酸水平檢測。檢測時在患者空腹情況下，采用分離膠/促凝管采集患者靜脈血5ml，采血后1h內進行離心，離心后分離血清，如延遲檢測，則可在2～8℃的情況下密封保存48h。血同型半胱氨酸水平由中心實驗室采用酶循環法測定，檢測儀器采用日立7180型全自動生化分析儀，試劑盒由中山標佳生物科技有限公司提供。試驗條件：樣本(S)：10μl； 試劑1(R1)：200μl；試劑2(R2)：50μl；溫度：37℃；測定類型：速率法；主波長：340nm；副波長：405nm；反應方向：向下；方法：先將樣本與R1混合，37℃ 5min后加入R2試劑，然后測定加入R2后2～5min的ΔA。反應時間：10min。血同型半胱氨酸水平正常參考值為4.0～15.0μmol/L。根據指南，將血同型半胱氨酸水平≥10μmol/L定義為高同型半胱氨酸血癥。

1.2.2 MTHFR C677T基因檢測。(1)采樣：EDTA抗凝外周血1～2ml；(2)提取DNA：使用天隆全血DNA提取試劑盒、配套自動化提取儀，將外周血、相應試劑加入96深孔板中，選擇運行程序，結束后將提取好的DNA吸出保存；(3)質控：使用NANODROP 2000核酸濃度檢測儀檢測DNA濃度(需>10ng/μl)，260/280純度在1.8～2.0之間合格；(4)熒光PCR：使用武漢友芝友人類MTHFR 677基因多態性檢測試劑盒，將配套試劑配好加入8聯管或96孔板中，最后加入相應樣本的DNA，且每批檢測中還需同時檢測陰性對照和陽性對照；(5)儀器運行：加好后瞬時離心上機——Themofisher ABI 7500熒光定量PCR儀；(6)分析結果：分析CC、CT、TT。

1.3 觀察指標 統計這114例高血壓患者的血同型半胱氨酸水平檢測和MTHFR C677T基因檢測結果，并統計不同人群(性別、年齡、是否吸煙、是否飲酒、血壓嚴重程度、體質指數、MTHFR C677T基因多態性)的高同型半胱氨酸血癥患病率分布情況，同時通過多元回歸分析影響高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發生率的危險因素，以及比較接受葉酸干預高同型半胱氨酸型高血壓患者干預前后的血同型半胱氨酸水平。

2 結果

2.1 血同型半胱氨酸和MTHFR C677T基因檢測結果 114例高血壓患者中，有58例患者患有高同型半胱氨酸血癥，高同型半胱氨酸血癥總發生率為50.88%，其中男28例，女30例，男性高同型半胱氨酸血癥發生率65.12%(28/43)高于女性的42.25%(30/71)(P<0.05)；男性血同型半胱氨酸水平(21.89±2.48)μmol/L高于女性的(19.80±2.31)μmol/L(P<0.05)；MTHFR C677T基因檢測結果中，CC型41例(35.96%)，CT型47例(41.23%)，TT型26例(22.81%)，男性CC型、CT型、TT型占比(32.56%、44.19%、23.26%)與女性比較(38.03%、39.44%、22.54%)，差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2 不同人群的高同型半胱氨酸血癥患病率分布情況 年齡≥70歲男性患者高同型半胱氨酸血癥患病率高于45～59歲和60～69歲患者，且女性患者趨勢相同(P<0.05)；男女不同血壓嚴重程度、不同吸煙情況患者的高同型半胱氨酸血癥患病率比較，差異無統計學意義(P>0.05)；正在飲酒男性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率高于從不飲酒、偶爾飲酒、曾經飲酒患者，且女性患者趨勢相同(P<0.05)；體質指數≥25男性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率高于<23患者(P<0.05)，但不同體質指數女性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率比較，差異無統計學意義(P>0.05)；TT基因型男性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率高于CT和CC基因型患者，且女性患者趨勢相同(P<0.05)。見表1。

表1 不同人群的高同型半胱氨酸血癥患病率分布情況[n(%)]

2.3 影響高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發生率的危險因素 年齡、飲酒情況、體質指數以及基因型在兩個性別中均與高同型半胱氨酸血癥發生率呈正相關性(P<0.05)。見表2。

表2 影響高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發生率的危險因素

2.4 葉酸干預前后血同型半胱氨酸水平比較 58例高同型半胱氨酸型高血壓患者中，有11例患者接受葉酸干預，葉酸干預后血同型半胱氨酸水平(16.29±1.86)μmol/L低于葉酸干預前的(21.31±2.09)μmol/L(P<0.05)。

3 討論

心腦血管疾病的發生和發展不僅取決于血壓水平，還取決于高血壓患者同時存在的其他心腦血管危險因素。有研究證實[3]，血同型半胱氨酸水平與心腦血管疾病的發生風險密切相關，且可與高血壓產生協同作用，加劇血管損害。鑒于此，本文對影響高同型半胱氨酸型高血壓發生的基因和環境危險因素進行了探究，旨在為心腦血管疾病的防治提供更多的方向。

本文結果顯示，114例高血壓患者高同型半胱氨酸血癥總發生率為50.88%。與惠朝暉等報道的58.4%相符[4]，提示我國高血壓患者的高同型半胱氨酸血癥患病率較高，可增加患者并發心腦血管疾病的風險，需引起重視。此外，本文結果還顯示,男性高同型半胱氨酸血癥發生率以及血同型半胱氨酸水平均高于女性，年齡、飲酒情況、體質指數以及基因型在兩個性別中均與高同型半胱氨酸血癥發生率呈正相關性(P<0.05)。提示高血壓患者的性別、年齡、飲酒情況、體質指數以及MTHFR C677T基因多態性均是影響高同型半胱氨酸血癥發生率的重要危險因素。考慮是因為男性胱硫醚β-合成酶活性低于女性，可影響血同型半胱氨酸轉硫代謝過程，引起血同型半胱氨酸水平的升高，且女性較高的血清雌激素水平也在一定程度上調節血同型半胱氨酸的代謝[5]。而隨著年齡的增長，人體腎臟清除率的下降、B族維生素和葉酸生物利用度的下降以及胱硫醚β-合成酶活性的下降，也會導致血同型半胱氨酸水平的升高[6]。同時，MTHFR是血同型半胱氨酸代謝的關鍵酶之一，當MTHFR C677T基因突變后，可能會影響血同型半胱氨酸的代謝而使其水平升高[7]。而飲酒可抑制胱硫醚β-合成酶活性、干擾B族維生素代謝，影響MTHFR活性，肥胖患者則可能飲食結構不當，葉酸攝入過少，因此飲酒與體質指數也與高同型半胱氨酸血癥發生率密切相關[8]。本文結果顯示，葉酸干預后患者的血同型半胱氨酸水平低于葉酸干預前(P<0.05)。可見對于高同型半胱氨酸型高血壓患者，可以通過葉酸干預來降低其血同型半胱氨酸水平，預防心腦血管疾病的發生。

綜上所述，高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發生率較高，可增加其發生心腦血管疾病的風險，對于高血壓患者，尤其是男性、年齡偏大、飲酒、體質指數較高以及MTHFR C677T基因突變的高血壓患者，應該盡早通過檢測發現高同型半胱氨酸血癥，并早期進行葉酸干預。