鵝細(xì)小病毒病的流行、診斷和預(yù)防

隋欣

摘要：鵝細(xì)小病毒病也稱為代爾塞病、鵝肝炎、小鵝瘟，是雛鵝和雛番鴨的一種高度接觸性、致死性疾病。在歐洲和遠(yuǎn)東的主要養(yǎng)鵝國(guó)家都有鵝細(xì)小病毒病的報(bào)道。依據(jù)特征性的臨床過(guò)程、發(fā)病日齡、大體病變和組織學(xué)病變，可初診。確診需經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)性的病毒分離。活苗和油乳劑滅活苗用于預(yù)防該病。

關(guān)鍵詞：鵝;細(xì)小病毒病;流行;臨床表現(xiàn);病理變化;診斷;鑒別;預(yù)防

中圖分類號(hào)：$858.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-9737（2020）06-0112-02

1病原

鵝細(xì)小病毒是細(xì)小病毒科的一個(gè)成員，最近被證明與人依賴病毒屬相關(guān)。鵝細(xì)小病毒，除與番鴨細(xì)小病毒具有密切關(guān)系之外，與其他禽類或哺乳動(dòng)物細(xì)小病毒無(wú)相似性。原發(fā)感染后，病毒主要在腸壁復(fù)制，在經(jīng)過(guò)短暫的病毒血癥后，進(jìn)入心臟、肝臟和其他器官。

2傳播與流行

感染禽經(jīng)糞便排出大量病毒，直接或間接傳播造成發(fā)病。疾病暴發(fā)通常開(kāi)始于感染種鵝經(jīng)蛋傳播給易感雛鵝。有證據(jù)表明，亞臨床感染的老齡鵝可能是病原攜帶者。在之前無(wú)該病的國(guó)家或地區(qū)出現(xiàn)鵝細(xì)小病毒病暴發(fā)時(shí)，感染種蛋通常是病毒的來(lái)源。血清學(xué)證據(jù)表明，歐洲的多種野鵝都存在有該病毒。尚未發(fā)現(xiàn)其他禽類帶毒者或生物帶毒者。

3臨床表現(xiàn)

根據(jù)日齡的不同，易感雛鵝和雛鴨的臨床癥狀差異較大。1周齡之內(nèi)的禽，病程發(fā)展快，伴隨有厭食，在2～5天內(nèi)出現(xiàn)死亡。孵化室感染的雛禽，死亡率可達(dá)100%。日齡稍大的禽，病程較長(zhǎng)，特征是鼻腔和眼有分泌物，出現(xiàn)腹瀉，虛弱。眼瞼和尾脂腺紅腫。急性期幸存的雛禽表現(xiàn)有生長(zhǎng)遲緩，羽毛脫落，皮膚發(fā)紅，特別是背部皮膚。由于腹腔積液，雛禽常以企鵝狀姿勢(shì)站立。病毒對(duì)2～4周齡雛禽的致死率可達(dá)10%，但發(fā)病率可能更高。盡管成年禽可產(chǎn)生免疫應(yīng)答，但是不表現(xiàn)任何臨床癥狀。

4病理變化

大體病變有舌頭和口腔覆蓋有纖維蛋白性假膜、肝周炎、心包炎、肺水腫、肝營(yíng)養(yǎng)不良和卡他性腸炎。急性病例，心臟呈現(xiàn)特征性的心尖變圓，心肌蒼白。顯微病變主要是心肌細(xì)胞的明顯變性，在感染的細(xì)胞核內(nèi)形成考德里A型包涵體。

5診斷

依據(jù)特征性的臨床過(guò)程、發(fā)病日齡、大體病變和組織學(xué)病變，可作出初步診斷。確診可使用來(lái)自易感鵝和番鴨的細(xì)胞培養(yǎng)物或胚胎進(jìn)行病毒分離。通過(guò)電鏡檢查感染的細(xì)胞培養(yǎng)物，使用特異性鵝細(xì)小病毒抗血清進(jìn)行中和試驗(yàn)，都可用來(lái)確定細(xì)小病毒的存在。使用免疫熒光和PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）方法，直接檢測(cè)感染禽組織中的抗原或病毒，也可確診該病。用于鵝細(xì)小病毒的血清學(xué)檢測(cè)方法，包括病毒中和試驗(yàn)、瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定。

現(xiàn)介紹常用的實(shí)驗(yàn)診斷方法一瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。

檢材的處理。血清：以0.01%的量加入硫柳汞，于4℃保存。鵝卵：吸取卵黃液20mL于鹽水瓶中，加入等量的生理鹽水充分振蕩均勻，再加入20mL氯仿振蕩30min。以3500r/min離心30min。取上清液約20mL裝入透析袋內(nèi)，置40%聚乙二醇中濃縮6～12h至1～2mL，吸出濃縮液。再用等量的生理鹽水清洗透析袋，吸出合并于濃縮液中，控制最終濃縮倍數(shù)為5倍。最后以3500r/min離心30min，取上清液按0.01%量加入硫柳汞，凍結(jié)保存。

瓊脂平板制備。取瓊脂粉1g，加入CaCl20.2g，99mL生理鹽水，1%硫柳汞1mL，水浴煮沸融化。待冷至45～50℃，取瓊脂液5mL，平鋪于水平放置的潔凈載玻片（75mm×25mm）上，靜置凝固后使用。

檢驗(yàn)方法。打孔：用直徑為5mm的金屬打孔器在瓊脂板上打孔，作成7孔1組的梅花圓形孔（外周6孔，中間1孔）。孔徑為5mm，孔間距4mm。用針尖挑出孔中的瓊脂。加樣：中心孔加抗原，外周第1、4孔加標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清，第2、3、5、6孔分別加被檢血清（或卵黃液）。每孔加滿以不溢出為度。靜置10min，放入濕盒，15～37℃反應(yīng)。于24h進(jìn)行第一次觀察，48h作第二次觀察，72h作最后觀察。

結(jié)果判定。若標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清孔與抗原孔之間應(yīng)出現(xiàn)一條清晰的白色沉淀線，則試驗(yàn)成立。若沒(méi)有沉淀線或沉淀線不明顯，則試驗(yàn)應(yīng)重做。①陰性反應(yīng)：被檢血清孔與抗原孔之間不出現(xiàn)沉淀線，標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清孔與抗原孔之間的沉淀線直伸延到被檢血清孔邊緣無(wú)彎曲者。②可疑反應(yīng)：被檢血清孔與抗原孔之間不形成沉淀線，鄰近的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清孔與抗原孔之間的沉淀線末端偏向被檢血清孔的內(nèi)側(cè)彎曲。③陽(yáng)性反應(yīng)：被檢血清孔與抗原孔之間出現(xiàn)明顯、清晰的白色沉淀線，并與標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清孔的沉淀線末端相融合。

6鑒別

雖然鵝細(xì)小病毒引起鵝和番鴨發(fā)病，但是番鴨也感染另外一種抗原性相關(guān)的細(xì)小病毒。這種病毒可引起番鴨出現(xiàn)嚴(yán)重的疾病，但不能造成鵝發(fā)病，可使用分子生物學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)和鑒別。鑒別診斷也應(yīng)包括鴨病毒性腸炎，該病可感染各種水禽。鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種致死性疾病，但不會(huì)引起鵝和番鴨發(fā)病。鴨疫里默氏桿菌和多殺性巴氏桿菌也可引起雛鵝和番鴨出現(xiàn)高死亡率，但是可通過(guò)細(xì)菌分離和鑒定進(jìn)行鑒別。

7預(yù)防

孵化的種蛋必須來(lái)源于已確認(rèn)無(wú)鵝細(xì)小病毒的鵝群，很多暴發(fā)都是由于將不同來(lái)源種蛋同時(shí)孵化引起的。只從確保無(wú)鵝細(xì)小病毒病的國(guó)家進(jìn)口種蛋。疫病暴發(fā)后存活的鵝不能作為種用。活苗和油乳劑滅活苗都可使用，并已廣泛應(yīng)用于疾病流行的國(guó)家。對(duì)種群進(jìn)行免疫接種，可使其子代獲得高水平的母源抗體。