銀杏花粉離體萌發培養基的優化

曾祥久

(丹東坤霖林業服務有限公司，遼寧 丹東 118200)

銀杏Ginkgobiloba是銀杏科唯一的植物，我國獨一無二的經濟林樹種。因其用途多樣，在造林、制藥和保健中具有舉足輕重的經濟價值和研究價值[1-2]。在銀杏常規雜交育種實踐中，花粉作為遺傳信息的載體傳遞給母本來選育優質雜交后代[3]。父本自身花粉活力的大小對育種工作有著直接的影響[4]。因此，研究其花粉萌發特性對育種工作具有積極意義。雖然前人對銀杏花粉的離體萌發開展了一些研究，但是其所使用的培養基配方比較復雜，花粉萌發的培養時間也比較長。因此，尋找一種適宜而簡單的培養基用于銀杏花粉離體萌發是非常必要的。本研究旨在通過蔗糖、硼和鈣離子這3種重要的營養成分對銀杏花粉萌發的影響，優化花粉萌發培養基成分，為后續雜交育種中花粉生活力測定提供一套簡單易行的方法。

1 材料與方法

1.1 材 料

試材為銀杏花粉。2017年4月21日在丹東市采集帶有花序的枝條，放在有冰袋的保溫盒內帶回實驗室。取下花藥于陰涼干燥處放置1 d后采集花粉。用500目細篩篩選花粉，放置于1.5 mL離心管內，-20 ℃保存備用。

1.2 方 法

基本培養基含0.7%瓊脂、0.1%硝酸鉀、0.2%硫酸鎂。添加蔗糖、硼酸和氯化鈣后，培養基于121 ℃高壓蒸汽滅菌15 min，在直徑60 mm培養皿內倒一薄層培養基。將花粉均勻撒播在冷卻的培養基上，放在25 ℃恒溫恒濕箱5 d。在顯微鏡下隨機選取5個花粉數大于30的視野，統計萌發率，重復3次。

1.2.1 單因子試驗

在基本培養基中加入蔗糖，質量濃度分別為0、50、100、150、200 g·L-1；……