放療聯(lián)合安羅替尼對小細胞肺癌患者胱天蛋白酶 3、多腺苷二磷酸核糖聚合酶表達的影響研究

張昊，崔秀潔，郭玉華，韓志鵬

朝陽市中心醫(yī)院1腫瘤科，2病理科，遼寧 朝陽122000

肺癌是發(fā)生于各級支氣管黏膜上皮、腺體的惡性腫瘤，臨床發(fā)病率較高。小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）是其中比較少見的類型，治療也比較棘手。由于SCLC的早期臨床表現(xiàn)輕微，且無特異性，多數(shù)SCLC患者確診時已經(jīng)發(fā)展至晚期，失去最佳的手術(shù)根治機會，僅以放化療等姑息治療為主[1]。安羅替尼是一種小分子多靶點酪氨酸激酶抑制劑，可抑制腫瘤新生血管形成而抑制腫瘤的生長，與放療聯(lián)合應用時可起到協(xié)同增效的作用[2]。胱天蛋白酶3（caspase 3）可引起細胞不可逆性凋亡，又被稱為凋亡因子，而腫瘤細胞的凋亡能力下降可促進其轉(zhuǎn)移過程[3]。多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly（ADP‐ribose）polymerase，PARP]是一種細胞核酶，在DNA損傷后被激活，在DNA修復、重組、維持基因穩(wěn)定、細胞凋亡等方面具有重要的作用[4]。上述兩種指標與肺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。本研究探討放療聯(lián)合安羅替尼對SCLC患者caspase 3、PARP表達的影響，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2017年1月至2018年1月于朝陽市中心醫(yī)院治療的86例SCLC患者為研究對象。納入標準：①經(jīng)組織病理學或細胞學檢查確診為SCLC，且入院時均未接受放療、化療及手術(shù)治療；②符合世界衛(wèi)生組織（WHO）肺癌組織學分類法；③年齡≥45歲。排除標準：①合并肝癌、胃癌等惡性腫瘤；②合并肝腎功能嚴重異常；③精神疾病。按照隨機數(shù)字表法將86例SCLC患者隨機分為放療組和聯(lián)合組（放療聯(lián)合安羅替尼）。放療組42例，男23例，女19例；平均年齡（58.73±8.92）歲；TNM分期：I期1例，Ⅱ期12例，Ⅲ期20例，Ⅳ期9例。聯(lián)合組44例，男26例，女18例；平均年齡（59.61±9.04）歲；TNM分期：I期1例，Ⅱ期10例，Ⅲ期23例，Ⅳ期10例。兩組患者基線特征比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，所有患者均知情同意且簽訂知情同意書。

1.2 治療方法

放療組接受調(diào)強放療，每次1.8～2.0 Gy，每周5次，連續(xù)治療6周。聯(lián)合組接受放療聯(lián)合安羅替尼治療，放療劑量同對照組；口服安羅替尼12 mg/d，早餐前頓服，服藥2周停藥1周；21天為一個治療周期，服用2個周期。

1.3 觀察指標及隨訪方法

分別于治療前、治療6周后抽取兩組患者空腹靜脈血3 ml，以轉(zhuǎn)速3000 r/min、離心半徑12 cm、離心時間10 min進行離心處理，取血清檢測cas‐pase 3、PARP水平。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測，Synergy H1全功能酶標儀購自美國貝克曼庫爾特有限公司，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

治療期間觀察兩組不良反應，治療后以電話詢問及患者復查的形式隨訪1年，記錄兩組患者生存率。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后血清caspase 3、PARP水平的比較

治療前兩組患者血清caspase 3、PARP水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后聯(lián)合組患者血清caspase 3水平明顯高于放療組，PARP水平明顯低于放療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 治療前后兩組患者血清caspase 3、PARP水平的比較（pg/ml，± s）

表1 治療前后兩組患者血清caspase 3、PARP水平的比較（pg/ml，± s）

組別放療組（n=4 2）聯(lián)合組（n=4 4）t值P值6.6 2±2.0 6 6.5 4±2.2 2 0.1 7 1 0.4 3 2 9.7 3±3.3 7 1 1.6 5±3.5 8 2.5 3 1 0.0 0 6 4 1 9.4±2 3.8 9 4 1 7.7±2 3.9 7 0.3 2 6 0.3 7 3 2 6 8.2±1 4.0 8 2 0 9.8±1 2.0 7 2 0.4 0 8 0.0 0 0 c a s p a s e 3治療前治療后P A R P治療前治療后

2.2 不良反應的比較

兩組患者白細胞減少、中性粒細胞減少發(fā)生率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（表2）

表2 兩組患者不良反應發(fā)生情況的比較[ n（%）]

2.3 生存率的比較

聯(lián)合組患者1年生存率為93.2%（41/44），高于放療組的76.2%（32/42），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.83，P＜0.05）。

3 討論

近年來，由于社會人口老齡化、環(huán)境污染等因素的影響，肺癌的發(fā)病率、病死率呈上升趨勢，高發(fā)于中老年人群，且男性發(fā)病率更高，這可能與男性多存在吸煙等不良行為有關(guān)[5]。由于肺癌早期的臨床表現(xiàn)以干咳、咳痰、胸痛、胸悶等為主，患者往往未能引起重視，大多數(shù)患者在確診時已失去手術(shù)根治機會。放化療是此類患者的常用治療方法[6]。SCLC是肺癌的少見類型，約占肺癌的20%，對放化療的敏感性更高[7]。放療是通過放射線對腫瘤細胞進行輻照，進而產(chǎn)生放射性損傷，三維適形放療具有定位精度更高、靶區(qū)外劑量衰減更快等優(yōu)點，是目前SCLC的常用化療方法[8]。

安羅替尼是國內(nèi)自主研發(fā)的一種新型抗血管生成靶向藥物，可有效抑制血管內(nèi)皮細胞生長因子（vascular endothlial growth factor，VEGF）、血小板源性生長因子（platelet derived gowth factor，PDGF）、成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）、c‐酪氨酸蛋白激酶（c‐tyrosine protein kinase，c‐KIT）等激酶，抑制新生血管形成，進而抑制腫瘤組織生長、轉(zhuǎn)移[9]。安羅替尼在肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺癌、食管癌、軟組織肉瘤等多種惡性腫瘤的治療中均具有廣泛的應用[10]。已有的研究發(fā)現(xiàn)，安羅替尼可有效抑制腫瘤細胞增殖，控制病情進展，延長惡性腫瘤患者的生存時間[11]。本研究中采用放療聯(lián)合安羅替尼治療患者1年生存率高于單用放療患者。這一結(jié)果提示，放療聯(lián)合安羅替尼治療SCLC具有更好的治療效果，可明顯提高患者的生存率。這一結(jié)果與已見報道的研究結(jié)論一致[12]。這可能是由于安羅替尼可抑制新生血管形成，降低腫瘤組織的含氧量，提高其對放射線的敏感性，以提高放療效果，進而更好地控制腫瘤病情的進展。

細胞凋亡異常是惡性腫瘤發(fā)生和進展的主要機制之一，多種酶類在其中發(fā)揮著重要的作用[13]。caspase 3是半胱氨酸蛋白酶家族成員之一，可轉(zhuǎn)導細胞凋亡信號，是引起細胞凋亡過程的關(guān)鍵酶。caspase 3活化后可與特異性底物相結(jié)合而促進細胞凋亡，其表達降低可引起腫瘤細胞無限增殖[14]。PARP是一種細胞核酶，可誘導機體啟動損傷修復機制，參與DNA的損傷修復過程，是引起耐藥性、腫瘤細胞惡性程度升高的危險因子，其表達增高可引起腫瘤細胞對放化療的敏感性下降而影響抗腫瘤治療效果[15]。本研究中采用放療聯(lián)合安羅替尼治療患者治療后血清caspase 3水平明顯高于單用放療患者，PARP水平明顯低于單用放療患者。這一結(jié)果提示，放療聯(lián)合安羅替尼可以有效提高SCLC患者血清內(nèi)caspase 3水平，降低PARP水平，促進腫瘤細胞凋亡而發(fā)揮抗腫瘤作用。這是由于安羅替尼與放療可起到協(xié)同增效作用，共同促進腫瘤細胞凋亡。

已有的研究發(fā)現(xiàn)，安羅替尼的不良反應以高血壓、胃腸道不適、肝功能異常、蛋白尿等較多見[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，兩組患者治療期間的不良反應以白細胞減少、中性粒細胞減少較多見，但不良反應發(fā)生率比較無差異。這一結(jié)果提示，安羅替尼的用藥安全性較高，在說明書推薦劑量下與化療聯(lián)合應用時不會增加不良反應風險。

綜上所述，放療聯(lián)合安羅替尼可以有效提高SCLC患者血清內(nèi)caspase 3水平，降低PARP水平，延長患者的生存時間，值得臨床進一步研究。