消毒劑中乙醇含量的測定

李 蕊，張金鵬，王東興，周 楊

(1.天津市工業微生物研究所有限公司 天津300462；2.天津實發中科百奧工業生物技術有限公司 天津300462；3.天津市工業微生物工程技術中心 天津300462；4.天津市工業微生物企業重點實驗室 天津300462；5.天津量信檢驗認證技術有限公司 天津300462)

乙醇作為常用消毒劑被廣泛使用，75%乙醇可以有效殺滅病毒，特別是新型冠狀病毒肺炎疫情期間，乙醇消毒劑成了大家搶購的目標。但必須指出，最適于消滅病毒的是 75%的醫用酒精，濃度過高或過低都無法有效殺滅病毒。因此，評價消毒劑是否有效的一個重要指標就是乙醇的含量。

為測定乙醇消毒劑有效成分含量，本試驗采用氣相色譜儀通過內標法建立消毒產品中乙醇含量測定方法。由于內標法具有消除基質效應，彌補進樣量波動影響等特點，可提高測定方法的靈敏度和準確性，較之《消毒技術規范》2002版中的外標法更為靈敏、準確、重復性好。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

Thermo TRACE1300氣相色譜儀，具有氫火焰離子化檢測器(FID)。

1.1.2 試劑

乙醇標準物質，濃度 99.9%，購自北京曼哈格生物科技有限公司。

正丁醇標準物質，濃度 99.9%，購自北京曼哈格生物科技有限公司。

1.2 色譜條件

色譜柱型號規格：TR-FFAP 30m×0.32mm×0.25μm。

進樣口溫度 190℃，分流比 50∶1。柱流速1.5mL/min；柱溫 50℃保持 7min，10℃/min升溫至110℃，保持2min。

檢測器(FID)溫度220℃，進樣量0.5μL。

1.3 試驗方法

1.3.1 標準溶液配制

乙醇系列標準工作液：分別吸取 0.25、0.5、0.75、1.25、2.5、5.0mL乙醇標準溶液，置于 6個 25mL容量瓶中，用純水定容至刻度，依次配制成乙醇濃度(V/V)為 0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、1.0%、2.0%系列標準溶液，現配現用。

1.3.2 標準曲線的制作

分別吸取10.0mL乙醇系列標準工作液置于5個試管中，然后加入 50μL正丁醇標準溶液并混勻，測定乙醇和內標正丁醇色譜峰面積，以乙醇系列標準工作液的濃度為橫坐標，以乙醇和正丁醇色譜峰面積的比值為縱坐標，繪制標準曲線。乙醇及內標正丁醇的氣相色譜圖見圖1。

圖1 色譜圖Fig.1 Chromatogram

1.3.3 試樣前處理

以乙醇為主要消毒成分的消毒劑，經適當稀釋后混勻。吸取稀釋后試樣 10.0mL于試管中，加入50μL正丁醇標準溶液，混勻，備用。

1.3.4 試樣溶液的測定

將制備的試樣溶液注入氣相色譜儀中，以保留時間定性，同時記錄乙醇和正丁醇色譜峰面積的比值，根據標準曲線得到待測液中乙醇的濃度。

1.3.5 計算結果

樣品中乙醇濃度(%，V/V)＝待測液中乙醇濃度×稀釋倍數(1，50或100)。

2 結果與討論

2.1 色譜條件

經測定顯示，乙醇和內標正丁醇可達到基線分離，其分離度滿足試驗要求。

2.2 標準曲線線性范圍及相關系數

本方法標準曲線的線性范圍是 0.1%～2.0%，標準曲線線性關系良好，其決定系數 R2＝0.9998，具體數據見表1。

表1 乙醇含量測定標準曲線Tab.1 Standard curve for determination of ethanol content

2.3 檢出限

本方法乙醇檢出限為 0.1%。滿足《消毒技術規范》2002版中的檢測要求。當進樣濃度為 0.1%時，基線信噪比(S/N)＞3。

2.4 回收率試驗

取1份已測出乙醇濃度的樣品，加入3個濃度的標準溶液，每個濃度重復測定 2次，計算樣品加標回收率，結果見表 2。本方法 3種濃度的回收率在97.4%～103.7%范圍內。

表2 回收率的測定Tab.2 Determination of recovery rate

2.5 精密度試驗

取同一含乙醇消毒劑樣品，分別用內標法和外標法重復測定 6次，用相對標準偏差(RSD)表示，結果見表3。結果表明，本方法(內標法)的RSD小于國標法(外標法)的 RSD。本方法具有較好的精密度，可滿足實際的樣品測定。

表3 精密度的測定Tab.3 Determination of precision

3 結 論

本方法采用氣相色譜儀通過內標法測定消毒劑中乙醇含量，內標與待測物質具有很好的分離度，操作簡便，檢出限 0.1%，回收率 97.4%～103.7%，相對標準偏差＜2%。其結果穩定準確且靈敏度高，適用于消毒劑中乙醇含量的測定。