日糧纖維水平對不同豬種腸道物理屏障和微生物的影響

王歡 李平華 牛清 杜陶然 蒲廣 范麗娟 牛培培 吳承武 周五朵 黃瑞華

摘要：為研究日糧纖維水平對不同品種豬腸道形態、通透性和微生物的影響，按照2×4雙因子設計，選擇體質量約40 kg的健康二花臉豬和與二花臉豬相同生理階段約65 kg的大白豬各24頭隨機分為4個處理組，分別飼喂基礎日糧和7%、14%、21%麩皮替代基礎日糧，每組6個重復，使用奧飼本全自動生產性能測定系統進行飼喂，每個重復1頭豬。正試期28 d，試驗結束時采集血液樣品，分離血清用于血清內毒素、二胺氧化酶（DAO）和D-乳酸含量測定;屠宰采集盲腸和結腸中段樣品進行形態學觀察，采集空腸和結腸黏膜進行微生物16S rRNA基因拷貝數測定。結果表明：豬品種對血清內毒素含量、D-乳酸含量、空腸雙歧桿菌豐度、盲腸隱窩深度、盲腸腸壁厚度、結腸腸壁厚度、結腸肌層厚度、結腸大腸桿菌和結腸乳酸桿菌豐度有顯著影響（P<0.05）。日糧麩皮水平對血清DAO含量、D-乳酸含量和結腸大腸桿菌豐度有顯著影響（P<0.05）。二花臉豬，與基礎日糧對照相比，7%和14%麩皮替代日糧處理的D-乳酸含量顯著升高（P<0.05），21%麩皮替代日糧處理的DAO含量顯著升高（P<0.05），7%麩皮替代日糧處理的盲腸肌層厚度顯著升高（P<0.05），21%麩皮替代日糧處理的盲腸腸壁厚度顯著降低（P<0.05），7%麩皮替代日糧處理的結腸乳酸桿菌豐度顯著升高（P<0.05），14%麩皮替代日糧處理的結腸大腸桿菌豐度顯著降低（P<0.05）。大白豬，與基礎日糧對照相比，14%麩皮替代日糧處理的DAO含量顯著升高（P<0.05），14%和21%麩皮替代日糧處理的盲腸腸壁厚度顯著增加（P<0.05），7%麩皮替代日糧處理的空腸雙歧桿菌豐度顯著降低（P<0.05），14%麩皮替代日糧處理的空腸雙歧桿菌和結腸乳酸桿菌豐度顯著降低（P<0.05）。綜上所述，大白豬和二花臉豬在大腸形態、腸道通透性、空腸雙歧桿菌豐度、結腸大腸桿菌豐度和結腸乳酸桿菌豐度等方面存在差異，日糧麩皮水平影響結腸大腸桿菌豐度。7%麩皮替代水平增大二花臉豬腸道通透性，但增加盲腸肌層厚度以適應纖維的消化，并增加結腸乳酸桿菌豐度促進腸道健康。14%麩皮替代水平會導致大白豬腸道通透性增大，盲腸腸壁增厚，空腸雙歧桿菌和結腸乳酸桿菌豐度降低。

關鍵詞：二花臉豬;大白豬;日糧纖維;麩皮;腸道通透性;腸道形態;腸道微生物

中圖分類號：S828.8文獻標識碼：A文章編號：1000-4440（2020）03-0639-09

Effects of dietary fiber levels on intestinal physical barrier and microbiota in different pig breeds

WANG Huan1，2，LI Ping-hua1，2，3，NIU Qing1，2，DU Tao-ran1，2，PU Guang1，2，FAN Li-juan1，2，NIU Pei-pei2，WU Cheng-wu1，2，ZHOU Wu-duo1，3，HUANG Rui-hua1，2，3

（1.Institute of Swine Science， Nanjing Agricultural University， Nanjing 210095， China;2.Huai′an Academy， Nanjing Agricultural University， Huai′an 223001， China;3.Integration Innovation Center of Jiangsu Modern Agricultural （Pig′s） Industrial Technology System， Nanjing 210095， China）

Abstract： The aim of this experiment was to study the effects of dietary fiber levels on intestinal morphology， permeability and microbiota in different pig breeds. Based on 2×4 two-factor design， twenty-four Erhualian pigs （approximately 40 kg） and twenty-four Large White pigs （the same physiological stage as the Erhualian pig， approximately 65 kg） were selected and randomly divided into four treatment groups including control diet group， 7%， 14% and 21% wheat bran replaced basal diet with six replicates in each group and one pig per replicate. The pigs were fed by the Osborne testing stations system. After the 28-d trial， blood samples were collected and the serum was collected for analyses of endotoxin， diamine oxidase （DAO） and D-lactate. The middle sections of the cecum and colon were collected for histological analysis. Mucosal scrapings from the jejunum and colon were prepared for the detemination of 16S rRNA gene copy number. The results showed that pig breeds had significant effects on serum endotoxin content， D-lactate content， the abundance of Bifidobacterium in the jejunum， cecal crypt depth， intestinal wall thickness in the cecum， intestinal wall thickness in the colon， muscle thickness in the colon， the abundance of Escherichia coli and Lactobacillus in the colon （P<0.05）. The level of wheat bran had significant effects on serum DAO content， D-lactate content and the abundance of Escherichia coli in the colon （P<0.05）. For Erhualian pig， compared with the control group， 7% and 14% wheat bran significantly increased D-lactate content （P<0.05）， 21% wheat bran significantly increased DAO content （P<0.05）， 7% wheat bran significantly increased the muscle thickness in the cecum（P<0.05）， 21% wheat bran significantly decreased intestinal wall thickness in the cecum （P<0.05）， 7% wheat bran significantly increased the abundance of Lactobacillus， 14% wheat bran decreased the abundance of Escherichia coli in the colon （P<0.05）. For Large White pig， compared with control group， 14% wheat bran significantly increased DAO content （P<0.05）， 14% and 21% wheat bran significantly increased the intestinal wall thickness in the cecum （P<0.05）， 7% wheat bran significantly decreased the abundance of Bifidobacterium in the jejunum （P<0.05）， 14% wheat bran significantly decreased the abundance of Bifidobacterium in the jejunum and the abundance of Lactobacillus in the colon （P<0.05）. In conclusion， there were differences between Erhualian pig and Large White pig in large intestine morphology， intestinal permeability， the abundance of Bifidobacterium in the jejunum， the abundance of Escherichia coli in the color， the abundance of Lactobacillus in the colon. The level of wheat bran affected the abundance of Escherichia coli in the colon. The 7% wheat bran increased intestinal permeability in Erhualian pigs. However， muscle thickness in the cecum was increased to odapt to the digestion of fiber， and the abundance of Lactobacillus in the colon was increased to improve intestinal health. The 14% wheat bran increased intestinal permeability and intestinal wall thickness in the cecum， and decreased the abundance of Bifidobacterium in the jejunum and Lactobacillus in the colon.

Key words：Erhualian pig;Large White pig;dietary fiber;wheat bran;intestinal permeability;intestinal morphology;intestinal microbiota

中國是養豬大國，養豬歷史悠久。玉米、豆粕一直是養豬業中的主要飼料原料，提供了豬所需要的大部分營養需求。但是由于玉米、豆粕的大量使用等諸多原因，玉米、豆粕等常規飼料進口量逐年增加，價格不斷上漲，養殖成本日益上升[1]。如何降低玉米、豆粕等常規飼料使用量來降低飼養成本已成為研究熱點[2]。

麩皮是面粉加工過程中產生的副產品，常被用作豬飼料中的纖維成分，以降低飼料成本[3]。麩皮中含有大量的不溶性纖維，導致腸道消化過程受到抑制，因此它在豬飼養中的應用具有一定局限性[4]。但日糧纖維（Dietary fiber，DF）對維持豬腸道屏障功能和微生物區系穩定非常重要[5]。日糧纖維可以增強非反芻動物抵抗病原菌腸道感染的能力，例如果膠、瓜爾豆膠、燕麥膠或菊粉、抗性淀粉和不可消化的低聚糖等[6]。某些日糧纖維具有益生元效應，即具有誘導腸道微生物群向有益方向改變的能力，從而對宿主產生有益影響[7]。在當前以非洲豬瘟為代表的病毒性疾病爆發以及病毒與細菌性疾病常常混合感染，且國內即將禁止在飼料中添加抗生素的雙重背景下，如何保持豬機體健康，尤其是腸道健康，已成為研究熱點，因此研究日糧纖維對腸道健康的影響具有重要意義。中國地方豬種（如二花臉豬、梅山豬和淮豬等）與國外引進瘦肉型豬種（如大白豬等）相比，對高纖維日糧的耐受能力更強[8-9]。本研究選擇耐粗飼料性能較好的二花臉豬與瘦肉型豬種代表大白豬進行不同含量麩皮日糧對比試驗，旨在研究日糧纖維水平對二花臉豬和大白豬腸道形態、通透性和微生物的影響差異，為中國地方豬種及培育品種合理應用麩皮等日糧纖維含量豐富的飼料原料來降低飼養成本，增強豬腸道健康提供理論依據。

1材料與方法

1.1試驗動物

考慮到大白豬與二花臉豬生長速度和成年體質量不同，直接選擇相同體質量的兩個品種豬做對比試驗不一定合適，因此參考Kanengoni等[10]報道的方法，選擇“相同生理階段”的豬開展試驗。本研究的“相同生理階段”是指體質量為27%成年體質量的時期。二花臉豬成年體質量由豬場實測，為150 kg;大白豬成年體質量參照Stern等[11]的報道，為240 kg。

選擇體質量約40 kg的健康二花臉豬、與二花臉豬相同生理階段約65 kg的健康大白育肥閹公豬各24頭，其中二花臉豬選購于常州市焦溪二花臉豬專業合作社，大白豬選購于江蘇梅林畜牧有限公司。

1.2試驗設計

每個品種豬隨機分為4個處理組，每組6個重復。使用奧飼本全自動生產性能測定系統進行飼喂，每頭豬的體質量、采食量等信息都能獨立獲取，因此每頭豬分別被認定為1個重復。試驗期間所有供試豬自由采食和飲水。試驗預試期10 d，所有豬飼喂基礎日糧;正試期28 d，4個處理組分別飼喂不同處理日糧，日糧中性洗滌纖維水平分別為12.84%、14.43%、15.84%和17.38%。

1.3日糧

按照中國《豬飼養標準——肉脂型生長肥育豬》（NY/T 65-2004）標準配制基礎日糧（對照），其余3個處理組分別用7%麩皮、14%麩皮和21%麩皮替代基礎日糧。按照美國分析化學家協會方法對日糧的粗纖維、粗蛋白、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、總日糧纖維、可溶性日糧纖維、不可溶性日糧纖維等指標含量進行測定。日糧配方及營養水平具體信息見表1。

每1 kg飼料中添加：維生素A 52 530 IU、維生素D 3 348 IU、維生素E 572.00 mg、維生素K 24.00 mg、硫胺素41.00 mg、核黃素65.00 mg、泛酸290.00 mg、煙酸325.00 mg、吡哆醇50.00 mg、生物素5.00 mg、葉酸12.00 mg、膽堿6.27 mg、亞油酸120.00 mg、鐵42.50 mg、銅3.00 mg、鋅45.00 mg、錳2.00 mg、硒0.11 mg、碘0.12 mg。

1.4采樣方法

在28 d正試期后，頸靜脈采集血液，4 ℃下3 000 g離心10 min，小心吸取血清至1.5 ml離心管。將血清樣品儲存在-80 ℃下備用，用于分析內毒素、二胺氧化酶（DAO）和D-乳酸。所有試驗豬電擊放血屠宰后迅速打開腹腔，賁門處切斷食管，取出完整胃腸道，剝離腸系膜，分別截取盲腸、結腸中段1～2 cm完整、無損傷部分，迅速放于4%通用型多聚甲醛中固定，用于腸道形態學觀察。用無菌載玻片刮取空腸、結腸中段黏膜樣品于2 ml凍存管，置于-80 ℃保存，以備微生物16S rRNA基因拷貝數測定。

1.5測定指標與方法

1.5.1腸道通透性血清學檢測使用南京建成生物工程研究所ELISA 試劑盒檢測血清中內毒素、DAO和D-乳酸的含量。使用ELISA Calc 軟件制作標準曲線，并計算樣品中內毒素、DAO和D-乳酸含量。

1.5.2腸道形態學觀察4%通用型多聚甲醛固定后的樣品經脫水、包埋、5 μm切片和HE染色等步驟處理，用尼康Eclipse 80i 電子顯微鏡觀察形態，使用NIS-Element軟件測定隱窩深度、腸壁厚度和肌層厚度。

1.5.3腸道微生物16S rRNA基因拷貝數（下簡稱豐度）測定使用Fast DNA SPIN Kit for Soil試劑盒提取微生物總DNA，微量分光光度計測定濃度及純度后-20 ℃保存備用。引物由南京擎科生物科技有限公司合成，具體引物序列信息見表2。從菌群中單克隆16S rRNA基因制備質粒，進行梯度稀釋后建立標準曲線。使用實時熒光定量PCR儀對黏膜中總菌、大腸桿菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌16S rRNA基因拷貝數進行定量分析。構建 20 μl反應體系：TB Green Premix Ex Taq II 10.0 μl，上、下引物各0.8 μl，雙蒸水6.4 μl，DNA模板2.0 μl。

1.6數據統計與分析

用Excel軟件對試驗數據進行初步處理，微生物16S rRNA基因拷貝數取以10為底的對數后進行統計分析。使用SAS 9.2軟件MIXED模型進行分析，固定效應為豬種和麩皮水平，若 P<0.05 則認為其差異顯著，試驗結果以最小二乘均值和平均標準誤（Standard error of mean， SEM）表示。

2結果與分析

2.1日糧麩皮水平對不同品種豬腸道通透性血清指標的影響

由表3可知，豬品種對血清內毒素和D-乳酸含量有顯著影響（P<0.05），日糧麩皮水平對血清DAO和D-乳酸含量有顯著影響（P<0.05），豬品種和日糧麩皮水平的交互作用對血清DAO和D-乳酸含量有顯著影響（P<0.05）。二花臉豬的內毒素含量顯著低于大白豬（P<0.05），二花臉豬的D-乳酸含量顯著高于大白豬（P<0.05）。與對照相比，7%和14%麩皮替代日糧處理顯著提高了D-乳酸含量（P<0.05）。

由圖1可知，7%麩皮替代日糧處理，二花臉豬的內毒素含量顯著低于大白豬（P<0.05）。14%麩皮替代日糧處理，二花臉豬的DAO含量顯著低于大白豬（P<0.05）。21%麩皮替代日糧處理，二花臉豬的DAO含量顯著高于大白豬（P<0.05）。7%和14%麩皮替代日糧處理二花臉豬的D-乳酸含量均顯著高于大白豬（P<0.05）。

與對照相比，二花臉豬21%麩皮替代日糧處理的DAO含量顯著升高（P<0.05），二花臉豬7%和14%麩皮替代日糧處理的D-乳酸含量顯著升高（P<0.05），大白豬14%麩皮替代日糧處理的DAO含量顯著升高（P<0.05）。

基礎日糧為對照，7%麩皮、14%麩皮、21%麩皮表示分別用7%麩皮、14%麩皮和21%麩皮替代基礎日糧。*表示差異顯著（（P<0.05）。

2.2日糧麩皮水平對不同品種豬腸道形態學的影響

由表4可知，豬品種對盲腸隱窩深度、腸壁厚度和結腸腸壁厚度、肌層厚度有顯著影響（P<0.05），日糧麩皮水平對各指標無顯著影響，豬品種和日糧麩皮水平的交互作用對盲腸腸壁厚度有顯著影響（P<0.05）。盲腸中，二花臉豬的隱窩深度顯著低于大白豬（P<0.05），二花臉豬的腸壁厚度顯著大于大白豬（P<0.05）。結腸中，二花臉豬的腸壁厚度顯著大于大白豬（P<0.05），二花臉豬的肌層厚度顯著低于大白豬（P<0.05）。

由圖2可知，盲腸中，7%麩皮替代日糧處理二花臉豬的腸壁厚度顯著高于大白豬（P<0.05），21%麩皮替代日糧處理二花臉豬的腸壁厚度顯著低于大白豬（P<0.05）。與對照組相比，二花臉豬21%麩皮替代日糧處理的盲腸腸壁厚度顯著降低（P<0.05），7%麩皮替代日糧處理的盲腸肌層厚度顯著升高（P<0.05）。大白豬14%和21%麩皮替代日糧處理的盲腸腸壁厚度顯著高于對照（P<0.05）。

2.3日糧麩皮水平對不同品種豬腸道微生物豐度的影響

由表5可知，豬品種對空腸雙歧桿菌、結腸大腸桿菌和結腸乳酸桿菌豐度有顯著影響（P<0.05），日糧麩皮水平對結腸大腸桿菌豐度有顯著影響（P<0.05）。豬品種和日糧麩皮水平的交互作用對空腸雙歧桿菌、結腸總菌和結腸大腸桿菌豐度有顯著影響（P<0.05）。二花臉豬的空腸雙歧桿菌和結腸乳酸桿菌豐度顯著低于大白豬（P<0.05），二花臉豬的結腸大腸桿菌豐度顯著高于大白豬（P<0.05）。結腸中，7%、14%和21%麩皮替代日糧處理的大腸桿菌豐度均顯著低于對照（P<0.05）。

由圖3可知，二花臉豬空腸乳酸桿菌豐度在基礎日糧對照中顯著高于大白豬（P<0.05），雙歧桿菌豐度在各麩皮替代日糧處理中均顯著低于大白豬（P<0.05）。大白豬空腸雙歧桿菌豐度在7%、14%麩皮替代日糧處理中均顯著低于對照組（P<0.05）。

由圖4可知，基礎日糧對照中二花臉豬結腸總菌豐度顯著高于大白豬（P<0.05），乳酸桿菌豐度顯著低于大白豬（P<0.05）;在7%麩皮替代日糧處理中，二花臉豬結腸總菌豐度顯著低于大白豬（P<0.05），大腸桿菌豐度顯著高于大白豬（P<0.05）;在21%麩皮替代日糧處理中，二花臉豬結腸總菌和乳酸桿菌豐度均顯著低于大白豬（P<0.05），大腸桿菌豐度顯著高于大白豬（P<0.05）。

基礎日糧為對照，7%麩皮、14%麩皮、21%麩皮表示分別用7%麩皮、14%麩皮和21%麩皮替代基礎日糧。*表示差異顯著（（P<0.05）。

與基礎日糧對照相比，二花臉豬結腸總菌豐度在21%麩皮替代日糧處理中顯著降低（P<0.05），大腸桿菌豐度在14%麩皮替代日糧處理中顯著降低（P<0.05），乳酸桿菌豐度在7%麩皮替代日糧處理中顯著升高（P<0.05）;大白豬總菌豐度在7%、21%麩皮替代日糧處理中顯著升高（P<0.05），大腸桿菌豐度在各麩皮替代日糧處理中均顯著降低（P<0.05），乳酸桿菌豐度在14%麩皮替代日糧處理中顯著降低（P<0.05）。

3討論

3.1日糧麩皮水平對不同品種豬腸道通透性血清指標的影響

腸黏膜屏障的完整對防御病原菌十分必要[15]，腸黏膜屏障的損傷會增加腸黏膜通透性。血清中多種因子與腸黏膜屏障功能相關，包括內毒素、DAO和D-乳酸含量[16-17]。內毒素是大腸桿菌的分泌物之一，它在血清中的含量隨著腸黏膜損傷和腸道通透性的增加而增加[18]。DAO僅存在于小腸上部絨毛中，其濃度的增加表明腸上皮通透性增加或腸屏障功能受損[19]。D-乳酸是腸道細菌的最終產物，哺乳動物既不產生D-乳酸，也不產生D-乳酸脫氫酶。因此，它們在健康狀態下維持在較低水平，當腸黏膜完整性受損時，幾乎所有的D-乳酸都會釋放到血液中。因此，血清內毒素、DAO和D-乳酸可以作為評估腸黏膜損傷和修復程度的標志物[20]。本研究結果表明，二花臉豬的內毒素含量低于大白豬，二花臉豬的D-乳酸含量高于大白豬，說明腸道通透性血清學指標在品種間存在一定差異。7%和14%麩皮替代日糧處理提高了D-乳酸含量，由此可見，麩皮水平的增加會增加腸道通透性，從而增加血清中標記物的濃度。二花臉豬7%和14%麩皮替代日糧處理提高了D-乳酸含量，14%麩皮替代日糧處理提高了大白豬的DAO含量，說明日糧中麩皮水平對腸道通透性的影響存在明顯的品種差異。

基礎日糧為對照，7%麩皮、14%麩皮、21%麩皮表示分別用7%麩皮、14%麩皮和21%麩皮替代基礎日糧。*表示差異顯著（（P<0.05）。

基礎日糧為對照，7%麩皮、14%麩皮、21%麩皮表示分別用7%麩皮、14%麩皮和21%麩皮替代基礎日糧。*表示差異顯著（（P<0.05）。

3.2日糧麩皮水平對不同品種豬腸道形態學的影響

完整的形態結構對腸道保持營養物質的分泌、消化和吸收能力非常重要。由于纖維主要在大腸中發酵，可能主要對大腸的形態產生影響，所以本試驗只測定了盲腸和結腸形態。Ngcc等[21]發現豬品種間腸道形態有顯著差異，與長大雜交豬相比，Mong Cai豬回腸的絨毛高度更短，絨毛寬度更小，隱窩密度也更高。二花臉豬和大白豬盲腸隱窩深度、腸壁厚度和結腸腸壁厚度、肌層厚度有差異。這種差異可能與品種本身，以及品種間食糜轉運時間和腸道微生物活性的差異有關[22]。

Jin等[23]發現日糧添加10%小麥秸桿飼喂育肥豬2周后結腸隱窩深度增加。Thomsen等[24]發現日糧中添加燕麥殼提高了育肥豬結腸隱窩深度。但本研究發現麩皮替代部分日糧沒有影響二花臉豬和大白豬的盲腸、結腸隱窩深度，這與Petkevicius等[25]研究結果一致。這些結果的差異可能是試驗使用的纖維源中可溶性成分和木質化程度的不同導致的。另一個因素可能是動物的日齡，Jin等[23]研究中的試驗豬體質量為（14.3±1.2） kg，而本研究中的二花臉豬約40 kg，大白豬約65 kg，因此可能是因為大日齡豬的腸道形態相比于幼齡豬更不易受營養因素的影響。

腸壁增厚會降低營養物質的吸收和轉運，影響動物的生長速度。本研究發現14%和21%麩皮替代日糧處理增加了大白豬盲腸腸壁厚度，而二花臉豬盲腸腸壁厚度在各麩皮替代水平均沒有增加。由此可見，二花臉豬腸壁厚度在高纖維水平下耐受能力更強。肌層厚度增加有利于食糜中纖維與微生物混合，提高微生物發酵機會，從而提高日糧纖維利用率。本試驗結果表明7%麩皮替代日糧增加了二花臉豬盲腸肌層厚度，更有利于纖維發酵利用，可能是應對纖維水平增高的適應性改變。

3.3日糧麩皮水平對不同品種豬腸道微生物豐度的影響

腸道微生物主要分布在腸腔內流動食糜中，且黏附于腸道黏膜及相關的黏膜層，發揮營養物質代謝調控、腸道上皮細胞修復、腸道黏膜免疫激活、宿主行為調控、抵抗病原微生物等重要作用[26-29]。康潤敏等[30]研究發現3個品種豬盲腸內微生物菌群分布規律和數量存在顯著差異。本試驗同樣發現，二花臉豬和大白豬空腸雙歧桿菌、結腸大腸桿菌和乳酸桿菌豐度有差異。

日糧纖維可以在豬腸道內發酵以改善腸道微生物菌群結構，減少腸道疾病的產生并對豬的健康狀況有改善作用[31-32]。在小鼠日糧中添加10%和20%米糠顯著改善了沙門氏菌感染引起的腸道損傷，增加了乳酸桿菌增殖[33]。添加10%米糠可提高斷奶仔豬飼料利用率，并有利于腸道雙歧桿菌的定殖[34]。本試驗研究結果與之一致，麩皮替代基礎日糧處理降低了結腸中大腸桿菌豐度，說明麩皮有助于改善腸道健康。同時發現7%麩皮替代日糧處理增加了二花臉豬結腸乳酸桿菌豐度，14%麩皮替代日糧處理降低了二花臉豬結腸大腸桿菌豐度，表明麩皮替代部分日糧改善了腸道菌群比例，可增加腸道中有益菌群如乳酸桿菌等的優勢。對于大白豬，大腸桿菌豐度在各麩皮替代處理中均顯著降低，但是14%麩皮替代日糧處理降低了大白豬空腸雙歧桿菌和結腸乳酸桿菌等有益菌豐度，這種腸道微生物對添加麩皮反應的差異可能與豬品種有關。

4結論

大白豬和二花臉豬在大腸形態、腸道通透性、空腸雙歧桿菌豐度、結腸大腸桿菌和乳酸桿菌豐度等方面存在差異，日糧麩皮水平影響結腸大腸桿菌豐度。7%麩皮替代水平增大二花臉豬腸道通透性，但增加盲腸肌層厚度以適應纖維的消化，并增加結腸乳酸桿菌豐度促進腸道健康。14%麩皮替代水平會導致大白豬腸道通透性增大，盲腸腸壁增厚，空腸雙歧桿菌和結腸乳酸桿菌豐度降低。

參考文獻：

[1]JHA R， BERROCOSO J D. Review： Dietary fiber utilization and its effects on physiological functions and gut health of swine [J]. Animal， 2015， 9（9）： 1441-1452.

[2]MAKKAR H. Review： Feed demand landscape and implications of food-not feed strategy for food security and climate change [J]. Animal， 2017， 12： 1-11.

[3]ZHAO J， ZHANG S， XIE F， et al. Effects of inclusion level and adaptation period on nutrient digestibility and digestible energy of wheat bran in growing-finishing pigs [J]. Asian-Australas J Anim Sci， 2018， 31（1）： 116-122.

[4]NOBLET J， GOFF G I. Effect of dietary fibre on the energy value of feeds for pigs [J]. Animal Feed Science and Technology， 2001， 90： 35-52.

[5]HOLSCHER H. Dietary fiber and prebiotics and the gastrointestinal microbiota [J]. Gut Microbes， 2017， 8： 172-184.

[6]GRIZARD D， BARTHOMEUF C. Non-digestible oligosaccharides used as prebiotic agents： Mode of production and beneficial effects on animal and human health [J]. Reproduction， Nutrition， Development， 1999， 39： 563-588.

[7]WEGH C， SCHOTERMAN M， VAUGHAN E， et al. The effect of fiber and prebiotics on childrens gastrointestinal disorders and microbiome [J]. Expert Review of Gastroenterology & Hepatology， 2017， 11： 97-105.

[8]URRIOLA P， STEIN H. Comparative digestibility of energy and nutrients in fibrous feed ingredients fed to Meishan and Yorkshire pigs [J]. Journal of Animal Science， 2012， 90： 802-812.

[9]KEMP B， HARTOG L A， KLOK J， et al. The digestibility of nutrients， energy and nitrogen in the Meishan and Dutch Landrace pig [J]. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition， 1991， 65： 263-266.

[10]KANENGONI A T， DZAMA K， CHIMONYO M， et al. Influence of level of maize cob meal on nutrient digestibility and nitrogen balance in Large White， Mukota and LW × M F 1 crossbred pigs [J]. Animal Science， 2016， 74（1）： 127-134.

[11]STERN S， SOLANES F X. Estimated mature weights and growth curves for large white sows [J]. Acta Agriculturae Scandinavica Section A， Animal Science， 2001， 51（2）： 142-147.

[12]FIERER N， JACKSON J A， VILGALYS R， et al. Assessment of soil microbial community structure by use of taxon-specific quantitative PCR assays [J]. Appl Environ Microbiol， 2005， 71（7）： 4117-4120.

[13]CASTILLO M， MARTIN-ORUE S M， MANZANILLA E G， et al. Quantification of total bacteria， enterobacteria and lactobacilli populations in pig digesta by real-time PCR [J]. Vet Microbiol， 2006， 114（1/2）： 165-170.

[14]FURET J P， FIRMESSE O， GOURMELON M， et al. Comparative assessment of human and farm animal faecal microbiota using real-time quantitative PCR [J]. FEMS Microbiol Ecol， 2009， 68（3）： 351-362.

[15]LAKSHMI C， GHIM J， RYU S. Mechanisms regulating intestinal barrier integrity and its pathological implications [J]. Experimental & Molecular Medicine， 2018， 50： 103.

[16]劉偉，王曉紅，楊曉軍，等. 膿毒癥患者腸屏障功能損傷及其相關因素 [J]. 中華醫學雜志， 2016， 96（ 44 ）： 3568-3572.

[17]TAKIISHI T， MORALES C， CMARA N. Intestinal barrier and gut microbiota： Shaping our immune responses throughout life [J]. Tissue Barriers， 2017， 5（4）： e1373208.

[18]SMITH F， CLARK J E， OVERMAN B L， et al. Early weaning stress impairs development of mucosal barrier function in the porcine intestine [J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol， 2010， 298（3）： 352-363.

[19]MANZOTTI G， BREDA D， DI GIOACCHINO M， et al. Serum diamine oxidase activity in patients with histamine intolerance [J]. Int J Immunopathol Pharmacol， 2016， 29（1）： 105-111.

[20]FUKUDOME I， KOBAYASHI M， DABANAKA K， et al. Diamine oxidase as a marker of intestinal mucosal injury and the effect of soluble dietary fiber on gastrointestinal tract toxicity after intravenous 5-fluorouracil treatment in rats [J]. Med Mol Morphol， 2014， 47（2）： 100-107.

[21]NGCC T， TRAN H， LEN N， et al. Effect of fibre level and fibre source on gut morphology and micro-environment in local （Mong Cai） and exotic （Landrace×Yorkshire） pigs [J]. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences， 2012， 25： 1726-1733.

[22]FREIRE J， DIAS R， CUNHA L， et al. The effect of genotype and dietary fibre level on the caecal bacterial enzyme activity of young piglets： Digestive consequences [J]. Animal Feed Science and Technology， 2003， 106： 119-130.

[23]JIN L， REYNOLDS L P， REDMER D A， et al. Effects of dietary fiber on intestinal growth， cell proliferation， and morphology in growing pigs [J]. J Anim Sci， 1994， 72（9）： 2270-2278.

[24]THOMSEN L E， KNUDSEN K E， HEDEMANN M S， et al. The effect of dietary carbohydrates and Trichuris suis infection on pig large intestine tissue structure， epithelial cell proliferation and mucin characteristics [J]. Vet Parasitol， 2006， 142（1/2）： 112-122.

[25]PETKEVICIUS S， BACH KNUDSEN K E， MURRELL K D. Effects of Oesophagostomum dentatum and dietary carbohydrates on morphology of the large intestine of pigs [J]. Vet Parasitol， 2003， 116（2）： 125-138.

[26]向明，李媛媛，郭乾鵬，等. 屎腸球菌對哺乳期仔豬結腸微生物群落優勢門屬的影響[J].南方農業學報，2019，50（3）：477-484.

[27]張錚，石青松，朱偉云，等. 乳酸菌發酵飼料對斷奶仔豬生長性能和腸道健康的影響[J]. 江蘇農業科學，2018，46（19）：170-173.

[28]馮士彬，程連平，舒迎霜，等. 黃芪多糖對湖羊羔羊生長性能、血清指標、消化功能和直腸菌群的影響[J].江蘇農業學報， 2019， 35（1）：122-129.

[29]方雷，陳根元，劉利林，等. 新疆驢盲腸、腹結腸、背結腸固相食糜細菌多樣性研究[J]. 江蘇農業科學，2019，47（8）：176-178.

[30]康潤敏，李瑤，呂學斌，等. 利用16S rDNA擴增子測序技術分析不同品種豬盲腸微生物菌落多樣性 [J]. 中國畜牧獸醫， 2017， 44：3121-3129.

[31]YU C， ZHANG S， YANG Q， et al. Effect of high fibre diets formulated with different fibrous ingredients on performance， nutrient digestibility and faecal microbiota of weaned piglets [J]. Arch Anim Nutr， 2016， 70（4）： 263-277.

[32]CHEN H， CHEN D， QIN W， et al. Wheat bran components modulate intestinal bacteria and gene expression of barrier function relevant proteins in a piglet model [J]. Int J Food Sci Nutr， 2017， 68（1）： 65-72.

[33]KUMAR A， HENDERSON A， FORSTER G M， et al. Dietary rice bran promotes resistance to Salmonella enterica serovar Typhimurium colonization in mice [J]. BMC Microbiol， 2012， 12： 71.

[34]HERFEL T， JACOBI S， LIN X， et al. Stabilized rice bran improves weaning pig performance via a prebiotic mechanism [J]. J Anim Sci， 2013， 91（2）： 907-913.

（責任編輯：張震林）