沙芥不同部位總黃酮含量比較研究

烏仁格格

(河套學院，內蒙古 巴彥淖爾 015000)

沙芥(Pugioniumcornutum)屬十字花科植物，又有沙蘿卜、沙白菜、沙芥菜、山蘿卜別名，主要分布于我國內蒙古、陜西、寧夏、甘肅等荒漠或半荒漠地區，性溫，口味偏辛，是我國西北人民比較熱愛的食材，多用于日常熬湯、炒食、涼拌。沙芥富含膳食纖維、蛋白質、脂肪總糖、維生素C、礦質元素(K、Ca等)、氨基酸等[1-2]。沙芥作為中藥，全草用藥，具有清熱解毒、鎮痛止咳、促進消化等功效。蒙醫學中，沙芥可治療氣管炎[3]。

沙芥富含黃酮[4-5]，關于其黃酮提取量的研究可參照文獻有限。對于沙芥的研究，多數采用沙芥葉為原料，而賈彥峰[4]在對沙芥中黃酮的提取方法和提取量測定時采用的是沙芥全草。對沙芥不同部位中黃酮含量的比較研究幾乎為零。因此，對沙芥不同部位的黃酮含量進行比較研究顯得格外重要。采用內蒙古巴彥淖爾市烏拉特前旗野生沙芥為原料，以其根、莖、葉作為主要研究對象，通過比較其中總黃酮提取量，找出總黃酮含量最高的部位，為該地區沙芥在藥用領域和食品領域的開發利用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

2017年8月，于內蒙古巴彥淖爾市烏拉特前旗沙地采集野生沙芥，經清洗后進行自然陰干，再通過人工分揀的方法將沙芥全草分出根、莖、葉三個部分，分別粉碎保存。

1.2 儀器與試劑

SP-192OUV型紫外可見分光光度計(上海光譜儀器有限公司生產)，旋轉蒸發儀(上海亞榮儀器有限公司生產)及各種常見玻璃儀器。蘆丁為生化試劑，其余均為分析純。

1.3 實驗方法

1.3.1 總黃酮標準曲線繪制

準確稱取蘆丁標樣10 mg用80%乙醇溶解于50 mL容量瓶中定容。分別精密移取標準溶液0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL于25 mL容量瓶，各加入5%亞硝酸鈉溶液1.0 mL，搖勻靜置8 min；再分別加10%硝酸鋁溶液1.0 mL搖勻靜置8 min；最后各加入2 mol/L氫氧化鈉溶液4.0 mL，以80%乙醇定容，搖勻靜置15 min，待測。將蘆丁標準溶液通過紫外可見分光光度計進行全波段掃描，在510 nm處有最大吸收峰。在510 nm下測其吸光度，繪制標準曲線，得回歸方程[6-7]。

1.3.2 供試品溶液的制備方法

精確稱取沙芥根粉末1.000 g，進行回流提取。提取條件：85%的乙醇溶液作為提取劑，料液比設置為1∶28，于85℃下回流提取2 h，抽濾，回收提取液。重復3次，合并3次提取液，蒸餾濃縮，并以80%乙醇溶液定容至50 mL，即得。精密移取該提取液1 mL，按照1.3.1中方法測其吸光度，根據標準曲線計算總黃酮提取量。平行提取三組，分別精密移取1.0 mL按1.3.1中方法顯色測定OD值。沙芥莖、沙芥葉總黃酮提取方法同沙芥根提取方法[8]。

計算沙芥不同部位中總黃酮提取量的公式為：提取量=CV/m[C-供試品內總黃酮濃度(mg/mL)；V-總體積(mL)；m-沙芥原料質量(g)]。

1.3.3 精密度試驗

平行吸取2 mL蘆丁標準溶液6份，測OD值，根據標準曲線方法測定蘆丁含量。

1.3.4 回收率試驗

平行稱取3份沙芥葉片粉末各0.5 g，分別加入適量蘆丁對照品，按供試品溶液的制備方法處理，測定吸光度，計算回收率。

2 結果與分析

2.1 標準曲線繪制

在波長為510 nm下進行吸光度測定，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，經回歸處理得線性回歸方程為：A=10.568 5C-0.002 4，R值為0.999 4。

2.2 精密度和回收率測定

精密度測定結果如表1，RSD為0.79%，足見其精密度之高。回收率測定結果如表2，平均回收率為98.4%。說明測定沙芥總黃酮提取量時采取此法是準確可靠的。

表1 精密度試驗結果Tab.1 Precision test results

表2 沙芥葉片回收率測定結果Tab.2 Result of determination of the recovery rate of leaves

2.3 沙芥不同部位提取的總黃酮含量比較

分別稱取沙芥根、莖、葉粉末 1 g，按1.3.2項下供試品溶液的制備方法制備各供試液，每樣平行3份。用紫外可見分光光度計在510 nm處測定吸光度，計算出總黃酮(按蘆丁計)的含量，結果見表3：

表3 沙芥不同部位黃酮提取量的比較Tab.3 Comparison of flavonoids extraction from different parts

由表3可知，對比沙芥不同部位的黃酮提取量，沙芥葉中的總黃酮含量最高；沙芥莖中總黃酮含量次之；而沙芥根總黃酮含量最低。

3 結語

結果表明：在對沙芥根、莖、葉中黃酮提取量對比實驗中，葉片的黃酮量最多，平均提取量在14.580 1 mg/g左右；沙芥莖中所含黃酮平均提取量為8.008 0 mg/g；沙芥根中所含黃酮提取量為7.566 4 mg/g。其中沙芥莖和沙芥根中所含的黃酮提取量只相差0.5 mg/g左右，相比于沙芥葉片，沙芥莖和根黃酮提取量僅為葉片的1/2余。

沙芥植株中沙芥葉片較多，葉片大且細長，最長可達25 cm，且收集方便，對沙芥的開發利用過程有利。作為研究黃酮類化合物，沙芥葉片更具有代表性。在將來的沙芥科學研究和開發利用過程中，建議選用沙芥葉來提取黃酮，將得到較高的黃酮提取量。沙芥的部位除了根、莖、葉之外還有花和果實，建議在今后實驗中進一步對沙芥的花和果實中的黃酮提取量進行考察。