宮頸高級別病變HPV感染型別分析

吳德群，劉 艷，陳 劍

(揚州大學醫(yī)學院附屬揚州市婦幼保健院，江蘇 揚州225000)

宮頸癌是一類常見的發(fā)生于女性生殖道的惡性腫瘤，在全球的女性惡性腫瘤中發(fā)病率較高，僅次于乳腺癌，嚴重威脅著廣大女性的健康和生命。宮頸癌的發(fā)生過程是多種因素，以及多種基因長期持續(xù)作用的結果，而HPV的持續(xù)性感染是導致發(fā)生宮頸病變及癌變的重要原因[1-3]，也是目前唯一可以預防的一種癌癥疾病[4]，目前已經(jīng)知道的HPV型別有120多余種，本文對近年來在江蘇省揚州市婦幼保健院就診的宮頸高級別病變病人其HPV感染情況進行調查，以分析HPV型別感染與宮頸高級別病變之間關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2017年1月至2018年6月于本院婦科就診并已被確診為宮頸高級別病變的患者287人，患者年齡在20-70歲，均有性生活史，無全子宮切除史，所有檢查患者處于非月經(jīng)期，在檢查前2 d內(nèi)無性生活，未使用陰道藥物。登記患者的年齡，HPV檢查結果等，本研究經(jīng)過患者本人的知情同意，我院醫(yī)學倫理學會委員會批準。

1.2 檢測方法

1.2.1標本采集 進行樣本采集時，在取樣前先用棉簽輕輕拭去宮頸表面的分泌物，然后用HPV專用宮頸刷置于宮頸口，輕輕搓動宮頸刷使其順時針旋轉3-5圈。慢慢取出宮頸刷，將其放入裝有細胞保存液的樣品管中。在管口處將多余的刷柄折斷，將刷頭留在樣本管中，旋緊管蓋，做好標記并保持樣本管直立放置，送檢。

1.2.2HPV分型檢測 利用HPV基因分型檢測試劑盒(YZB/國6157/2014，廣東凱普生物科技股份有限公司)，采用PCR體外擴增結合DNA反向點雜交技術對37種HPV型別(分別為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、26、73、82，34、40、42、44、43、55、54、57、61、67、69、70、71、72、83、84、6、11、CP8304)進行檢測，具體操作步驟根據(jù)試劑盒說明書進行操作，此檢測方法靈敏度高，準確性好，可重復性好。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

使用SPPS20.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料用感染率進行表示，采用卡方檢驗進行組間比較。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 HPV感染單一型別比較結果

全組HPV感染257例中，按單一型別統(tǒng)計共計408例中， 檢測到30種HPV亞型感染程度由高到低分別為HPV16型131例(50.97%)，HPV52型48例(18.68 %)，HPV58型45例(17.51%)，HPV33型32例(12.45 %)，HPV31型22例(8.56 %)，HPV18型17例(6.61%)，HPV39型16例(6.23%)，HPV51型13例(5.06 %)，HPV53型11例(4.30%)，HPV68型9例(3.50%),結果表明，不同HPV單一亞型感染的感染占比之間存在顯著差異，見表1。

2.2 HPV型別單一與多重感染檢測結果

全組HPV不同型別感染共257例數(shù)中，單一型別感染159例(61.87%)，二重型別感染69例(26.85%)，三重型別感染20例(7.78%)，四重型別感染5例(1.95%)，更多重型別感染4例(1.56%)，結果表明不同型別感染占比之間具存在差異，見表2。

2.3 不同年齡段HPV型別感染檢測結果

全組HPV感染共257人中，結果表明不同年齡段占比以31-50歲占絕大多數(shù)(64.21%)，見表3。

表1 HPV單一亞型感染例數(shù)及感染率

表2 HPV型別單一與多重感染例數(shù)及構成比

表3 不同年齡段HPV型別感染例數(shù)及構成比

2.4 針對三種疫苗中所檢出HPV型別病人感染情況比較

本調查結果中單獨感染HPV 16和/或 HPV 18亞型病人例數(shù)共有141例(54.86%)，感染HPV6、HPV11、HPV16和HPV18亞型中的一種或多種病人例數(shù)共有142例(55.25%)，感染HPV 6、 HPV 11、 HPV 16、 HPV 18、HPV 52、 HPV 58、 HPV 45、 HPV 31和 HPV 33亞型中的一種或多種例數(shù)共有237例(91.51%)，其他亞型感染例數(shù)共有80例(31.13%)，見表4。

表4 不同HPV疫苗類型中HPV型別感染例數(shù)及感染率

3 討論

根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報道，全球女性每年新患宮頸癌患者約46萬例，在中國女性中每年新患宮頸癌患者約13萬例，占全球比例的29%，位居首位，嚴重威脅我國廣大女性的健康和生命[5]。宮頸癌作為目前唯一能夠通過篩查進行早期確診和人為預防的惡性腫瘤，有效的進行篩查可以顯著降低宮頸癌的發(fā)病率及死亡率，有著十分重要的意義。Wolf H[6]，Walboomers[7],Bosch[8]通過研究均指出HPV型別感染與宮頸癌有重要相關性，HPV的持續(xù)性感染可導致宮頸癌的發(fā)生。WHO對于診斷宮頸癌的標準中，HPV感染作為一種必要感染因素[9]，因此進行HPV檢測在宮頸癌的篩查中有著重要作用。

HPV上的L1殼蛋白的高度表達或缺失都能夠引發(fā)相關病變，HPV上的E2蛋白是一種特殊的結合蛋白，通過E2基因進行表達，對于病毒的復制有一定的抑制作用，E2基因斷裂后E6、E7基因不受抑制后發(fā)生過度蛋白表達，結合P53形成復合體，P53是一種抑癌基因，被形成復合體后失活，從而導致宮頸癌病變[10,11]。

HPV不同型別感染有一定的地域相關性，地理環(huán)境以及所處的社會區(qū)域的差異使得HPV感染型別存在差異，不同的感染型別具有不同的致病性[12]，在本研究HPV單一亞型感染中，發(fā)現(xiàn)HPV16亞型在揚州市地區(qū)是所有單一亞型感染占比例最高的亞型，其次是HPV52、HPV58亞型。國外研究表明HPV16型別感染與宮頸高級別病變以及宮頸癌病變關系最為密切，致癌性最高。

多數(shù)研究報道HPV占比例最高的為單一型別感染，其次是二重型別感染，三重、四重及多重所占比例較低[13,14]。本研究中與以往的研究報道相符，單一型別的感染率最高，其次是二重型別感染。關于HPV感染的型別數(shù)與宮頸癌的病變的關系說法不一，有研究表明，多重型別感染會增加宮頸癌病變的風險[15]，但也有研究表明型別感染數(shù)與其沒有太大關系[16]，此項還需進行進一步研究。

近年來，宮頸癌病變的發(fā)生越來越趨于年輕化女性，這與整體社會對性觀念的認識和改變，HPV感染率增加有關，本研究中年齡段在31-50歲的女性HPV感染占比最高，可以看出HPV感染在年輕婦女比較普遍，建議30-50歲的女性及時進行HPV檢測，早早做好預防工作。

目前HPV疫苗有三種類型，分別是葛蘭素史克公司(GSK)的HPV 2價疫苗(HPV 16和HPV 18)，默沙東公司(Merck)的HPV 4價疫苗(HPV6、HPV11、HPV16和HPV18)，默沙東公司(Merck)的HPV 9價疫苗[17](HPV 6、 HPV 11、 HPV 16、 HPV 18、HPV 52、 HPV 58、 HPV 45、 HPV 31和 HPV 33)，本調查結果中二價疫苗所包含的型別感染例數(shù)為141例(54.86%)，四價疫苗所包含的型別感染例數(shù)為142例(55.25%)，九價疫苗所包含的型別感染例數(shù)共有237例(91.51%)，其它亞型感染例數(shù)共有80例(31.13%)，可見針對揚州市女性而言九價疫苗更能有效的預防HPV感染和宮頸癌疾病的發(fā)生。值得注意的是，通過統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，在三種疫苗所包含的亞型以外，其他HPV亞型感染率也較高，建議考慮在疫苗范圍內(nèi)適當增加HPV亞型。

綜上， HPV16型別感染對高級別病變及宮頸癌病變的影響最大，因此需要高度重視，對于HPV感染應及早檢查。目前，三種類型的疫苗接種有一定年齡范圍限制，二價疫苗的年齡范圍為9-25歲，四價疫苗的適用年齡范圍為20-45歲，九價疫苗的年齡范圍為9-45歲，建議有條件的女性及早接種九價疫苗進行預防。