血清IgG、IgG4 水平對ANCA 相關性血管炎的診斷分析

張競文， 肖燕， 藍衛東， 陳瑩瑩

（1 華中科技大學協和深圳醫院 檢驗科， 廣東 深圳518052；2 深圳市南山區婦幼保健院 檢驗科， 廣東 深圳518067）

抗中性粒細胞胞漿抗體 （anti－neutrophil cytoplasmic antibodies， ANCA） 相關性血管炎是一種自身免疫相關性疾?。?］，與原發性小血管炎中部分疾病和抗中性粒細胞胞漿抗體有密切關系， 故稱之為ANCA 相關性血管炎， 和類風濕性關節炎、 系統性紅斑狼瘡屬于一種疾病類型。 存在壞死性炎癥的血管是該疾病的病理特點， 包括肉芽腫型血管、 顯微鏡下多血管炎以及嗜酸性肉芽腫性血管炎［2］。 該疾病主要的臨床表現為不明原因的發燒、 血沉加快以及貧血等， 嚴重情況下甚至會侵襲肺部和腎臟， 影響患者機體健康， 但該疾病在臨床治療中的難點在于診斷， 因其癥狀和其他自身免疫相關疾病相似， 故臨床常出現誤診或漏診等情況［3－4］。 鑒于此， 本研究選取我院收治的60 例ANCA 相關性血管炎患者以及同期收治的55 例類風濕性關節炎患者作為研究對象， 旨在分析血清IgG、 IgG4 水平在兩種疾病患者中的表達， 探討其診斷價值， 現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2017 年10 月至2019 年9 月在我院腎內科穿刺活檢確診的60 例ANCA 相關性血管炎患者納入觀察組， 另選取同期我院收治的55 例類風濕性關節炎患者納入對照組。觀察組中男31 例， 女29 例； 年齡25 ～80 歲， 平均 （46．65 ±10．38） 歲； 病程1 ～32 年， 平均 （12．21 ± 5．86） 年。 對照組中男30 例， 女25 例； 年齡28 ～80 歲， 平均 （47．21 ± 10．04）歲； 病程1 ～30 年， 平均 （11．89 ± 5．91） 年。 兩組患者的一般資料比較， 差異無統計學意義 （P ＞0．05）， 具有可比性。

1.2 方法 分別采集兩組患者清晨空腹靜脈血5 mL， 使用購自于安徽嘉文儀器裝備有限公司的離心機JW－1050R， 取血清之前需3 500 r／min 離心10 min， 將血清置入－20 ℃冰箱保存， 等待下一步檢測。

1.2.1 IgG 水平檢測 采用免疫散射比濁法檢測IgG 水平， 儀器為SIEMENS BNII 全自動蛋白分析儀 （德國西門子）， 試劑盒為德國西門子公司提供的配套試劑盒。

1.2.2 IgG4 水平檢測 采用酶聯免疫吸附法 （試劑盒由上海澤葉生物科技有限公司提供） 檢測IgG4 水平， 將標準品、 標本以及使用HRP 標記的二抗按順序加入預先包被IgG4 抗體的微孔中， 進行溫育后洗滌， 加TMB 進行顯色， 終止顯色后由藍色變為黃色， 其顏色的深淺不同和樣品中IgG4 水平呈正比。使用購自于深圳雷杜生命科學股份有限公司的RT－6100 酶標儀， 設置波長450 nm， 測定OD 值 （吸光度） 并計算IgG4 水平。 檢測方法嚴格遵守說明書進行。

1.3 觀察指標 記錄兩組患者血清的IgG （7 ～16．6 g／L）、 IgG4（0．86 ～1．35 g／L） 水平， 并對二者的診斷效能進行計算。 以臨床診斷結果為金標準， 分析IgG、 IgG4 單項測定的準確率、 靈敏度和特異度。

1.4 統計學處理 采用SPSS 18．0 軟件處理數據。 計數資料以百分比表示， 采用χ2檢驗； 計量資料以表示， 采用t 檢驗。P ＜0．05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 血清IgG、 IgG4 水平 兩組患者的IgG 水平比較， 差異無統計學意義 （P ＞0．05）； 觀察組的IgG4 水平顯著高于對照組，差異具有統計學意義 （P ＜0．05）。 見表1。

表1 兩組患者的血清IgG、 IgG4 水平比較

表1 兩組患者的血清IgG、 IgG4 水平比較

組別 n IgG IgG4觀察組 60 12.34±5.02 10.42±4.98對照組 60 13.58±4.78 5.42±3.12 t 1.354 6.384 P 0.179 0.000

2.2 血清IgG、 IgG4 的診斷效能 以臨床診斷結果為 “金標準”， IgG4 診斷ANCA 相關性血管炎的準確率、 靈敏度、 特異度均顯著高于IgG 診斷ANCA 相關性血管炎， 差異有統計學意義 （P ＜0．05）。 見表2、 表3。

表2 IgG、 IgG4 與臨床診斷結果的比較 （n）

表3 IgG 與IgG4 的診斷準確率、 靈敏度和特異度比較 ［% （n）］

3 討論

ANCA 相關性血管炎的發病機制尚未明確， 臨床普遍認為與環境因素、 遺傳因素以及細菌感染相關［5］， 部分藥物亦可引發ANCA 相關性血管炎［6］。 治療該疾病應以早診斷、 早治療為原則， 但因該疾病的臨床癥狀和其他自身免疫性疾病相似， 導致部分患者錯過最佳治療時間， 影響治療效果。

IgG 以及IgG4 均是免疫球蛋白的一員， 免疫球蛋白作為一種蛋白質， 是B 細胞通過抗原刺激后增殖分化成的漿細胞所產出， 能夠特異性地結合與之相對應的抗原， 以此發揮體液免疫功能。 自身免疫性疾病活動期間， 免疫球蛋白含量常顯示異常， 表示患者發生急性炎性反應或體液免疫亢進， 進而導致機體組織發生不同程度的損傷［7］。 本研究結果顯示， 兩組的IgG水平未見顯著差異， 觀察組的IgG4 水平顯著高于對照組， 且IgG4 的診斷準確率高于對照組， 表明血清IgG4 檢測可提高ANCA 相關性血管炎的臨床診斷效果。 分析原因在于： 正常情況下， 人體血清中IgG4 的含量占總IgG 含量的3% ～6%， 其分泌方式主要為旁路途徑激活補體， 如胎盤等， 且該因子對靶抗原的親和力低， IL－4、 IL－5 等高表達的Th2 型細胞因子均可同時伴有高表達水平的IgG4。 IL－4 是Th2 的應答細胞吸引點，也是誘導IgG4 應答的主要細胞。 當Th2 型細胞因子IL－4 存在時， 機體內的血清IgG4 表達水平則會顯著升高［8］。 IgG4 雖然不是一個特異性抗體， 但是在ANCA 相關性血管炎患者中表達水平有明顯提高， 因此有助于ANCA 相關性血管炎的診斷。

綜上所述， IgG4 作為一個免疫球蛋白亞型， 在ANCA 相關性血管炎患者的血清中表達較高， 有助于ANCA 相關性血管炎疾病的臨床診斷。