益生菌對非酒精性脂肪性肝病患者細(xì)胞因子表達(dá)及腸道菌群的影響

馬幸， 王萬里

（鄭州市第七人民醫(yī)院， 河南 鄭州450006）

非酒精性脂肪性肝病 （NAFLD） 是指除酒精及其他明確因素之外導(dǎo)致的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪含量過剩的慢性肝病， 近年來， 該病患者數(shù)量不斷增加， 已成為全世界范圍內(nèi)的主要慢性肝病之一， 嚴(yán)重威脅人類健康［1］。 NAFLD 不僅會(huì)導(dǎo)致肝病進(jìn)一步惡化甚至癌變， 還會(huì)引發(fā)心血管疾病及其他代謝疾病， 甚至?xí)觿〖膊〉倪M(jìn)程； 反之心血管疾病及其他代謝性疾病也是促使NAFLD 發(fā)生的關(guān)鍵因素。 相關(guān)研究［2］顯示， 益生菌能夠直接補(bǔ)充機(jī)體腸道益生菌， 以確保腸道菌群平衡。 本研究在復(fù)方甘

草酸苷膠囊治療的基礎(chǔ)上采用雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片治療NAFLD， 取得了較好的臨床效果， 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料選取2017 年1 月至2018 年1 月我院收治的80例NAFLD 患者作為研究對象， 隨機(jī)分為對照組和研究組各40例。 對照組 中男22 例， 女18 例； 年齡44 ～73 歲， 平均（62.78 ± 6.73） 歲； 病程2 ～7 年， 平均 （4.72 ± 2.14） 年。 研究組中男23 例， 女17 例； 年齡45 ～74 歲， 平 均（62.93 ±6.58） 歲； 病程2 ～7 年， 平均 （4.65 ± 2.27） 年。 另隨機(jī)選取同期入院健康體檢者40 例作為空白組， 其中男21 例， 女19例； 年齡43 ～73 歲， 平均年齡 （61.99 ± 6.67） 歲。 三組在性別、 年齡方面比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＞0.05）， 對照組和研究組在病程方面比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＞0.05）， 具有可比性。

1.2 治療方法對照組采用復(fù)方甘草酸苷膠囊 （北京凱因科技股份有限公司， 國藥準(zhǔn)字H20080006） 治療， 餐后口服， 2 粒／次， 3 次／日。 研究組在對照組基礎(chǔ)上口服雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片 （內(nèi)蒙古雙奇藥業(yè)股份有限公司， 國藥準(zhǔn)字S19980004）治療， 口服， 4 片／次， 3 次／日。 兩組患者均連續(xù)治療1 個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)分別取三組研究對象晨起空腹?fàn)顟B(tài)靜脈血5 mL， 分離血清后通過ELISA 法檢測IL-10、 IFN-γ 及IL-18；通過熒光定量PCR 檢測腸道雙歧桿菌 （B） 和大腸桿菌 （E）定量， 并計(jì)算B／E 比值， B／E≥1 代表腸道正常菌群的定植抗力處于正常狀態(tài)， 而B／E＜1 則代表不正常。 對三組研究對象的上述指標(biāo)進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。 計(jì)量資料以±s 表示， 采用t 檢驗(yàn)； 計(jì)數(shù)資料以率表示， 采用χ2檢驗(yàn)。 P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組的細(xì)胞因子水平比較治療前， 對照組、 研究組的IL-10 水平顯著低于空白組， IFN-γ、 IL-18 水平均顯著高于空白組 （P＜0.05）； 治療后， 對照組、 研究組的IL-10 顯著高于治療前， 而IFN-γ、 IL-18 水平均顯著低于治療前 （P＜0.05）， 且研究組的IL-10、 IFN-γ、 IL-18 水平均顯著優(yōu)于對照組 （P＜0.05）。 見表1。

表1 三組血清細(xì)胞因子水平比較 （±s）

表1 三組血清細(xì)胞因子水平比較 （±s）

注： 與空白組相比， aP <0.05； 與本組治療前相比， bP <0.05； 與對照組治療后相比， cP <0.05。

組別 時(shí)間 IL-10 （ng／L） IFN-γ （ng／L） IL-18 （ng／L）研究組 治療前 17.48±4.01a 60.47±3.12a 59.91±12.38a治療后 22.81±4.23bc 51.28±2.17bc 20.22±11.33bc對照組 治療前 17.36±3.86a 60.41±2.95a 59.82±12.21a治療后 21.04±4.17b 54.92±2.63b 56.42±12.43b空白組 ／ 24.39±4.45 46.24±3.15 47.10±8.59

2.2 三組的腸道菌群水平比較治療前， 對照組、 研究組的B、E 及B／E 均顯著低于空白組 （P＜0.05）； 治療后， 對照組、 研究組的B、 E 及B／E 均顯著高于治療前， 且研究組的B、 E 均顯著高于對照組 （P＜0.05）。 見表2。

表2 三組的腸道菌群水平比較 （±s）

表2 三組的腸道菌群水平比較 （±s）

注： 與空白組相比， aP ＜0.05； 與本組治療前相比， bP ＜0.05； 與對照組治療后相比， cP ＜0.05。

組別 時(shí)間 B （logcopies／g） E （logcopies／g）B／E研究組 治療前 8.17±0.23a 8.41±0.16a 0.99±0.06a治療后 10.42±0.31bc 9.22±0.30bc 1.14±0.46b對照組 治療前 8.14±0.26a 8.42±0.18a 0.98±0.07a治療后 9.13±0.32b 8.71±0.19b 1.11±0.44b空白組 ／ 11.31±0.44 9.54±0.37 1.20±0.68

3 討論

NAFLD 患者多存在因腸道黏膜滲透壓升高導(dǎo)致的腸道菌群失衡， 可引發(fā)內(nèi)毒素血癥、 細(xì)菌過度繁殖等， 進(jìn)而引發(fā)腸道的免疫應(yīng)答反應(yīng)， 促使炎性細(xì)胞因子的分泌大幅增加， 對肝損傷具有負(fù)面影響［3］。 輔助性T 細(xì)胞 （Th） 包含Th1、 Th2 等亞群， 對應(yīng)不同的功能： Th1 可以分泌IL-2、 IFN-γ、 IL-18、 腫瘤壞死因子 （TNF） -α 等細(xì)胞因子， 介導(dǎo)細(xì)胞免疫過程； Th2可分泌IL-4、 IL-10、 IL-13 等細(xì)胞因子， 介導(dǎo)體液免疫過程。有研究［4］表明， NAFLD 可以促進(jìn)IL-1、 IL-6 和TNF-α 等的表達(dá)， 使炎性因子分泌異常， 導(dǎo)致肝臟炎癥、 肝臟纖維化。

本研究中， 對照組采取復(fù)方甘草酸苷膠囊治療， 研究組在對照組基礎(chǔ)上口服益生菌 （雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片） 治療， 結(jié)果顯示， 治療后對照組、 研究組的B、 E 及B／E 均顯著高于治療前， 且研究組的B、 E 均顯著高于對照組 （P＜0.05），表明益生菌可有效促進(jìn)NAFLD 患者腸道菌群的恢復(fù)。 同時(shí)，本研究結(jié)果也顯示， 治療后， 對照組、 研究組的IL-10 顯著高于治療前， IFN-γ、 IL-18 水平均顯著低于治療前 （P＜0.05），且研究組的IL-10、 IFN-γ、 IL-18 水平均顯著優(yōu)于對照組 （P＜0.05）， 表明益生菌能夠有效促使NAFLD 患者的細(xì)胞因子水平恢復(fù)正常。 分析原因如下： 因IL-10 抗炎作用最強(qiáng)， 能對很多細(xì)胞因子產(chǎn)生反饋抑制， 利于免疫反應(yīng)處于平穩(wěn)狀態(tài)， 降低肝內(nèi)中性粒細(xì)胞浸潤及肝內(nèi)水腫， 因此IL-10 表達(dá)增加利于改善肝臟炎性反應(yīng)； 聯(lián)合使用雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片及復(fù)方甘草酸苷能夠更好地抑制肝內(nèi)炎癥， 減輕肝內(nèi)水腫程度， IL-10水平也因此提高更明顯。 IFN-γ 具有多種活性， 主要作用是誘導(dǎo)炎性反應(yīng)和激活巨噬細(xì)胞［4］； 聯(lián)合使用雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片及復(fù)方甘草酸苷可有效拮抗NAFLD 所致的IFN-γ 表達(dá)上調(diào)。 IL-18 是一種炎癥趨化因子， 肝臟中由枯否氏細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生， 中性粒細(xì)胞的功能受到趨化、 激活， 以促使炎性反應(yīng)發(fā)生， 其水平越高， 表明肝病病情越嚴(yán)重［5］。 本研究中， 患者治療后IL-18 水平呈下降趨勢， 提示患者的病情獲得明顯改善，這也意味著聯(lián)合使用雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片及復(fù)方甘草酸苷對NAFLD 患者病情的控制效果優(yōu)于單用復(fù)方甘草酸苷。

綜上所述， 益生菌能夠有效促進(jìn)NAFLD 患者的細(xì)胞因子表達(dá)恢復(fù)正常， 平衡腸道菌群， 值得臨床推廣。