EGF對豬卵母細胞體外成熟的影響

焦亞飛，劉樹林，葉 升，石德順，黃 奔

（廣西大學(xué) 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院／亞熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護與利用國家重點實驗室，南寧 530004）

卵母細胞是生殖醫(yī)學(xué)、細胞生物學(xué)、物種保護等領(lǐng)域的重要研究對象［1］。與雄性配子相比，卵母細胞可在體外培養(yǎng)成熟。卵母細胞的成熟質(zhì)量對體外受精（in vitro fertilization，IVF）、體細胞核移植（somatic nuclear transfer，NT）和孤雌激活（parthenogenetic activation，PA）后的胚胎發(fā)育有重要影響，但體外成熟卵母細胞的質(zhì)量遠低于體內(nèi)成熟。與體內(nèi)成熟的卵母細胞相比，體外成熟的豬卵母細胞常常發(fā)生多精受精率高、囊胚發(fā)育率低、卵母細胞核質(zhì)成熟不同步等問題［2］。

近年來，研究人員致力于通過添加激素和細胞因子來提高卵母細胞的發(fā)育潛能，如添加生長因子、激素以及信號通路的抑制劑和激活劑以改變卵丘卵母細胞復(fù)合物（cumulus oocyte complexes，COCs）的蛋白質(zhì)活性［3－4］。蛋白激酶B／Akt是一種絲氨酸／蘇氨酸（Ser／Thr）激酶，是磷脂酰肌醇－3－激酶／PKB（PI3K／Akt）通路中的信號元件。在哺乳動物的卵母細胞中，Akt信號通路的激活與減數(shù)分裂的進程密切相關(guān)，Akt信號通路的相關(guān)基因表達均能在體外成熟培養(yǎng)的卵母細胞和卵丘細胞中檢測到［5－6］。研究表明，雖然Akt激活不是誘導(dǎo)胚泡破裂（germ vesicle breakdown，GVBD）所必需的，但在減數(shù)分裂過程中從Ⅰ期（MetaphaseⅠ，MⅠ）向Ⅱ期（metaphaseⅡ，MⅡ）過渡時需要Akt激活［7］。然而，有關(guān)PI3K／Akt信號通路與豬體外成熟卵母細胞發(fā)育潛能獲得關(guān)系的研究報道較少。為此，本研究擬通過在成熟培養(yǎng)液中加入PI3K／Akt激活劑——表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF），檢測分析卵母細胞成熟率和發(fā)育潛能的變化，以及PI3K／Akt信號通路相關(guān)基因表達情況，以闡明PI3K／Akt信號通路與豬卵母細胞成熟質(zhì)量的關(guān)系，完善豬卵母細胞的體外成熟技術(shù)方法，為轉(zhuǎn)基因豬等胚胎生物技術(shù)的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。……