張 俊,自永宏,李嬌嬌,陸鳳花,石德順
(廣西大學 動物科學技術學院/亞熱帶農業生物資源保護與利用國家重點實驗室,南寧 530004)
卵母細胞體外成熟是進行體外胚胎生產的關鍵環節,但目前卵母細胞體外成熟與體內成熟相比存在成熟率低和發育能力差等諸多問題,極大地阻礙了卵母細胞體外成熟技術的廣泛應用。為完善卵母細胞體外成熟技術、進一步提高體外成熟質量,研究人員進行了諸多嘗試,特別是在細胞共培養方面[1]。卵母細胞體內成熟是在卵泡內進行的,卵泡細胞(包括顆粒細胞和內膜細胞)對卵母細胞成熟有重要影響[2]。近年來,越來越多的研究集中于卵泡細胞共培養對卵母細胞體外成熟和胚胎發育潛力的影響[3-5]。但將骨髓間充質干細胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSC)共培養用于卵母細胞體外成熟的研究目前較少,特別是在水牛上尚未見報道。
BMSC是源自中胚層的干細胞,具有免疫調節、抗擊炎癥、營養作用、自我更新以及多胚層分化潛能等功能,被作為理想種子細胞用于組織工程、細胞移植、基因治療和器官移植等領域[6-10]。在臨床上BMSC可用于治療各類疾病,主要通過分泌細胞因子進行營養支持、免疫調節和改善微環境[11]。然而BMSC用于卵母細胞體外成熟和卵泡發育的研究報道相對較少,迄今僅見小鼠BMSC條件液有利于小鼠卵母細胞體外成熟的報道[12],BMSC與腔前卵泡共培養能提高人腔前卵泡的發育能力[13],但在大動物上仍未有研究報道。為此,本試驗首次嘗試探討BMSC條件液對水牛卵母細胞體外成熟的影響,主要通過卵母細胞體外成熟率和早期孤雌胚胎發育能力的測定,以期通過導入BMSC的分泌因子進一步完善水牛卵母細胞體外成熟培養系統。……