逯陣毫,王玉堂,李林,付光宇,吳學煒
(鄭州安圖生物工程股份有限公司,河南 鄭州 450016)
單純皰疹病毒(herpes simplex virus,HSV)是一類嚴重危害人類健康、引起皮膚病和性病的常見病原體,HSV 共有兩種亞型:HSV-1、HSV-2,HSV-2 主要是通過性傳播,對孕婦孕前篩查有重要的臨床意義[1]。臨床檢測HSV-2IgG 多采用的間接法反應模式[2],其特點是所用酶標抗體為特異性動物抗人IgG 抗體[3]。磁微粒化學發光平臺的反應杯材質多為聚丙烯,此材料表面疏水性較強[4],容易與蛋白通過疏水作用力結合,導致蛋白吸附到反應杯表面[5],包括血漿中的免疫球蛋白[6],最終導致酶標記的二抗特異性結合反應杯內壁的抗體球蛋白,此時,反應杯充當了固相載體,導致最終檢測信號值異常偏高,出現假陽性。有文獻報道,表面活性劑可起到抑制蛋白對界面的吸附作用[7],本文利用非離子表面活性劑Triton X-100 可有效抑制吸附樣本的假陽性。
標本來源于婦幼保健院2017 年8~10 月優生優育篩查血漿樣本,于-20℃冷凍保存,共15 份,復溶后狀態為黃色澄清液體。
某廠家單純皰疹病毒Ⅱ檢測試劑盒(磁微?;瘜W發光法)及其配套檢測儀器;Trinity 單純皰疹病毒Ⅱ檢測試劑盒[酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)];Triton X-100 (分 子生物 學),Sigma-Aldrich;NaH2PO42H2O,分 析 純,國 藥 化 學 試 劑;Na2HPO412H2O,分析純,國藥化學試劑。
1.3.1 平臺對比 ELISA 法按產品說明書進行主要步驟有:加樣、孵育、洗板、加酶、底物、顯色、比色。磁微粒化學發光法為全自動系統,設計好標本位置、檢測項目,按開始鍵即可。15 份標本分別在兩平臺進行測試,測試前標本均用生理鹽水(0.9%NaCl 溶液)稀釋30 倍?!?br>