雪膽的形態組織學研究

沈泉

摘要：藥材的有效成分的含量是衡量該藥材質量的主要因素，直接決定該藥材的質量，本課題的關鍵問題是對植物藥材雪膽束植物羅鍋底的性狀和內部構造進行觀察研究，只有先從根本上解決了這個問題才能具體的去談中藥的化學成分以及治病機理。雪膽（Hemsleya amabilis Diels-Cucurbitaceae）為葫蘆科.雪膽屬植物雪膽的塊根，具有清熱、解毒、消腫、止痛之功效，用于治療各種炎癥，如肝炎、氣管炎、胰腺炎、官頸炎等，通過對雪膽屬植物羅鍋底的外部形態和內部的組織構造的觀察和研究，可以避免因為外部的形態相似而相互混淆，從而提高用藥的準確性。并在此基礎上可以保證臨床用藥的安全性。

關鍵詞：表皮;葉脈;維管束;組織

1 前言

雪膽（Hemsleya sinesis Cogn），為葫蘆科雪膽屬植物的塊根，別名又叫金龜蓮、金盆、羅鍋底。根據產地的不同，分為廣西雪膽、云南短柄雪膽、峨眉雪膽和彭縣雪膽;根據果型分為圓果雪膽和長果雪膽;根據花型分為小花雪膽、天目雪膽和巨花雪膽。雪膽具有清熱解毒、抗菌消炎、止痛作用 ，廣泛用治療肝炎、菌痢、冠心病、氣管炎、慢性子宮頸炎、帶狀皰疹、腫瘤等。

1.1植物學形態特征

雪膽為多年生攀援草本植物，塊莖膨大，扁卵圓形，常半裸露于土面。莖和小枝細弱，疏被短柔毛和細剛毛，老時近無毛。短須纖細，疏被短柔毛長6-10mm，先端兩歧。趾狀復葉由5-7小葉組成，葉柄被疏柔毛，長4-5cm;小葉片長圓披針形至倒卵狀披針形，先端漸尖，基部漸狹，上面深綠色，背面灰綠色，邊緣圓鋸齒狀，兩面沿中脈，側脈及葉緣密被細刺毛;中央小葉片長4-9cm，寬1.6-3cm，兩側小葉片漸小，外側的略歪斜，小葉柄長2-4mm。花雌雄異株。雄花：聚傘總狀花序，花序軸細瘦，長1.5-8cm;花萼萼片5，卵形，先端急尖，長4-5mm，向后反折;花冠橙紅色，盤狀，徑0.8-1cm，裂片5，長圓形，長8mm，寬4mm，先端鈍圓具小突，基部兩側具深紫色斑，表面疏被白色長柔毛，背面光滑;雄蕊5，花絲長2mm，外彎;雌花：稀疏總狀花序，長0.5-5cm;花冠通常圓盤狀稀陀螺狀子房橢圓形或近球形，長5-7mm，寬4-5mm;花柱3，柱頭2裂。果實卵圓形或者寬卵形，徑3.5-4cm，上有10條縱紋，密生細瘤突，花柱基高4-6mm，每室具種子3-5;具略歪斜的柄;種子卵圓形，暗黑色，長9-11mm，寬8-9mm，周生木栓質狹翅，上端寬1-1.5mm，具不規則的褶皺，下端更狹;種子卵圓形，腫脹，邊緣密布乳頭狀突起，中間部分較疏，背面較平滑。花期7-9月，果期9-11月。

1.2 化學成分

雪膽屬植物大多富含雪膽皂苷和雪膽素（雪膽甲素與雪膽乙素的混晶）。雪膽甲素為23，24-雙氫葫蘆素 F-25-乙酸酯 （23，24-dihydroxyeucurbitacin F-25-acetate），雪膽乙素是 23，24-雙氫葫蘆素F（23，24-dihydroxycucurbitacin F）。二十年來，人們已經從不同雪膽種中分離出不同的化合物，并且不斷發現該屬甚至自然界中新的化合物。雪膽塊根中主要含雪膽甲素（含量高達6.0l8 mg/g）[1]、雪膽乙素;還含有雪膽皂苷 Ma1、雪膽皂G1、雪膽皂H1、竹節參苷IVa[2] 、竹節參苷V、雪膽皂苷Ma3、齊墩果酸-28-O—-β-D-葡萄糖脂苷和齊墩果酸[3];也含有葫蘆素 F-25-乙酸酯 、β-谷甾醇、胡蘿卜苷 、β-谷甾醇-3-O-（6-軟脂酰基 ）β-D-葡萄糖苷、軟脂酸、十八碳烷醇 、十六碳烷醇[4]、齊墩果酸-3-0-α-吡喃阿拉伯糖（1-3）- β-葡萄糖醛酸、28-0-β-D-吡喃葡萄糖齊墩果酸 3-0-【β-D-吡喃葡萄糖-（1-2）】-[α-吡喃阿拉伯糖-（1-3）]-β-D-葡萄糖醛酸[5]，雪膽雙糖[6];以及含有21種微量元素[7]。

1.3藥理作用

70年代對雪膽屬植物研究表明，該屬植物富含葫蘆素類成分 .具有保肝、抗癌作用。有人對雪膽根脂溶性部分和水溶性部分分別進行了抗腫瘤活性篩選，發現其脂溶性成分具抗腫瘤活性，而水溶性部分則無活性。作者從四川峨眉產中華雪膽中分離得6個化合物。其中兩個顯示抗癌活性。化合物Ⅰ齊墩果酸 -28-O-D-吡喃-葡萄糖甙，且化合物Ⅰ對U937與HL-6O抑制作用為首次報道。化合物Ⅲ為雪膽甲素，體內試驗對P388亦顯示抗腫瘤活性。

1.3.1 抗腫瘤作用

雪膽根醇浸膏經乙酸乙酯萃取后，進行反復低壓柱層析、氯仿與甲醇不同比例洗脫 ，所得化合物I（齊墩果酸 一28—0—β一D一吡喃萄糖苷）和化合物Ⅲ （雪膽甲素），均具 有抗腫瘤活性。采用錐蟲藍排染法，于96孔板中每孔加1.2 X 10 個/mL的腫瘤懸浮

細胞 ，再加入不同濃度的化合物I，作用72 h后，用錐蟲藍計數活細胞數，計算抑制率 ，結果表明化合物I的抗癌活性為 ：HL-60，U937，K562的1C50分別為 0.42，0.25，13.O0 ug/mL。對 P388白血病小鼠給予化合物Ⅲ（分別給藥18.75，9.38 mg/kg，腹腔注射，

共用7d），另設生理鹽水（25 mL/kg）對照組和環磷酰胺對照組（100mg/kg，腹腔注射，共 用7d），觀察動物存活天數，結果表明化合物ⅢP388白血病小鼠的生命有延長作用[8]。

1.3.2 對心肌缺氧有一定的保護作用

在用腎上腺素加重心臟負擔，增加心肌耗氧量的低壓缺氧實驗中，腎上腺素組（1 mg/kg，皮下注射）平均生存時間比對照組（等 容積的吐溫 -8O溶 液 ）減少47.5%（P浸出物（0.3g/kg，腹腔注射）/加腎上腺素組平均生存時間比腎上腺素組延長64.8% （P0.05）。說明上腺素可減弱小鼠的耐缺氧能力，給腎腺素增加心肌耗氧量的基礎上，雪膽醇浸出物使小鼠的耐缺氧能力恢復到給腎上腺素前的水平，因而表明雪膽對心肌缺氧有一定的保護作用[9]。

1.3.3 具有廣譜抗菌作用

根據體外抗菌試驗，從雪膽醇浸出物中提取的雪膽皂苷和雪膽苦味素對溶血性鏈球菌 、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌等都有不同程度的抗菌作用，較同濃度的氯霉素強[10]。

1.3.4 對肝臟的作用

雪膽中的葫蘆素成分對肝臟有保護作用，齊墩果酸有治療肝炎的作用[11]。

1.3.5 對胃腸疾病的作用

雪膽制劑胃腸丹是治療胃潰瘍、十二指腸潰瘍、慢性胃炎、腸炎、胃腸功能紊亂的一種安全有效的藥物[12]。

2 試驗材料和方法

2.1 試驗材料：農大后山中草藥栽培實驗基地種植的羅鍋底全植株

2.2 試驗方法：

2.2.1 試劑的配制：

1.番紅的配制方法：1克番紅+100毫升水→番紅溶液，貯存于棕色瓶。導管+番紅→紅色? 木質部+番紅→紅色

2.固綠的配制方法：0.1克固綠+100毫升95%酒精→番紅溶液。凱氏帶+固綠→綠色? 韌皮部+固綠→綠色篩管+固綠→藍綠色? ? 皮層+固綠→綠色

3.碘液的配制方法：1克純碘+2克碘化鉀+300毫升水→稀碘液（先加碘化鉀完全溶解再加入碘溶解，然后用水稀釋到300毫升），貯存于棕色瓶中如變成黃色就不能使用。

4.間苯三酚的配制方法：稱取5克的間苯三酚+100毫升95%酒精→間苯三酚溶液（間苯三酚的使用方法：先用鹽酸將切片浸透，再吸去多余的鹽酸，在滴加一滴的間苯三酚。）木質花細胞壁→應紅或者紫紅

5.水和氯醛的配制方法：5克水合氯醛溶解到蒸餾水中，然后稀釋到一百倍。既得5%的水合氯醛溶液

6.蘇丹Ⅲ的配制：0.1克的蘇丹Ⅲ+95%酒精20毫升。木栓化組織+蘇丹Ⅲ→橙紅色

角質化組織+蘇丹Ⅲ→橙紅

3 結果與分析

葉片下表皮是由一層長方形的細胞組成，細胞排列整齊緊密，無細胞間隙/不定式的氣孔分布很多，數目不定，大小基本相同，副衛細胞數目不定，被有線狀毛，上表皮細胞也由一層細胞組成，但無氣孔的分布。

葉柄橫切面呈半圓形， 向莖一面稍微凹下，表皮由一層細胞組成，細胞排列緊密，無細胞間隙，維管柱發達，里面分布有7個維管束，雙韌維管束。韌皮部位于上方（腹面），韌皮部位于下方（背面），在向莖面凹槽處表皮細胞明顯增大，并出現明顯的角質化，形成角質層。在凹槽的上面頂角角隅處和柄背面的端分化出厚角組織，此處的細胞排列疏松，有細胞間隙，皮層中有大量的葉綠體的分布。

葉片

上下表皮由一層長方形的細胞組成，下表皮細胞較上表皮細胞明顯變小，細胞排列緊密，無 細胞間隙，下表皮之下有一層由立體的長方形細胞組成的柵欄組織，此處細胞較大，呈豎向排列，緊密，沒有細胞間隙，在下表皮和柵欄組織之間有5層薄壁細胞組成的海綿組織，此處細胞分布散亂，不整齊，具有明顯的細胞間隙，維管束只有一個，雙韌維管束

葉脈

主脈向上，下凸起。木部位于向莖面，韌皮部位于背莖面，在葉脈的背面角隅處，表皮組織下具有明顯的厚角組織的分化，雙韌型維管束，維管束呈半圓形，半圓形的韌皮部包圍著半圓形的木質部，在向莖面的凹槽處表皮細胞的細胞壁出現特化。在皮層中葉脈與葉肉組織的交接處，有兩束纖維束，木質部和皮層中都散有晶體。

莖

表皮由一層長方形的 細胞組成，細胞排列整齊緊密，無細胞間隙。，有多細胞的線狀毛的分布，在表皮底下皮層外方具有明顯的厚角組織，成環分布，此處細胞個體較小，皮層中有明顯的葉綠體的分布。此處細胞明顯的增大，皮層由2-5層細胞組成，內皮層凱氏帶的分化，在皮層中靠近內皮層有一個纖維帶的分化，維管柱發達，散有9個維管束，5個外圍維管束分布在5個棱角處，內圍維管束有四個，其中外圍維管束和內圍維管束交錯排列，其中兩個維管束較大，雙韌型維管束，髓薄壁細胞內含有淀粉粒，孔紋導管在5個棱角處的維管束中分布較多。由2-3個大的孔紋導管和若干 個小的導管組成，而散布在中間的四個維管束則由一個很大的和小的孔紋導管組成（可見）。在5個棱角的內方，角隅處厚角組織加厚明顯，髓發達，有大型的薄壁細胞組成，在柱中（或者說束間）有一纖維束分布，束間距離較寬，有束間束中形成層。在棱角處可見有角質化的細胞！莖上偶見皮孔。

花

花—單性;雄蕊5枚，兩量結合，1枚分離;下位子房。花雌雄異株。雄花：聚傘總狀花序，花序軸細瘦，長1.5—8cm;花萼萼片5，卵形，先端急尖，長4-5mm，向后反折;花冠橙紅色，盤狀，徑0.8-1cm，裂片5，長圓形，長8mm，寬4mm，先端鈍圓具小突，基部兩側具深紫色斑，表面疏被白色長柔毛，背面光滑;雄蕊5，花絲長2mm，外彎;雌花：稀疏總狀花序，長0.5-5cm;花冠通常圓盤狀稀陀螺狀子房橢圓形或近球形，長5-7mm，寬4-5mm;花柱3，柱頭2裂。

果

果實-瓠果。果實卵圓形或者寬卵形，徑3.5-4cm，上有10條縱紋，密生細瘤突，花柱基高4-6mm，每室具種子3-5;具略歪斜的柄;種子卵圓形，暗黑色，長9-11mm，寬8-9mm，周生木栓質狹翅，上端寬1-1.5mm，具不規則的褶皺，下端更狹;種子卵圓形，腫脹，邊緣密布乳頭狀突起，中間部分較疏，背面較平滑。

參考文獻：

[1]施王琴，揚培全，臺云梅.反相高效液相色譜法測定不同采收期長果雪膽中雪膽甲素的含量[J].中國中藥雜志，1996，21（5）：276-277.

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[4]林曉琴，張文錦 .小花雪膽化學成分的研究[J]，中國中藥雜志，1997，22（6）：357-358.

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