化學(xué)發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)肺炎支原體肺炎患兒血清MP抗體結(jié)果比較

郭淑紅

(偃師市中醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 洛陽 471900)

小兒肺炎支原體肺炎(mycoplasmal pneumoniae pneumonia，MPP)是常見的呼吸系統(tǒng)感染疾病，主要因肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae，MP)感染引發(fā)[1]。MPP患兒主要癥狀為發(fā)熱、咳嗽，部分患兒會(huì)出現(xiàn)喘息、肺啰音、呼吸困難等癥狀，如不及時(shí)治療，容易出現(xiàn)肺不張、胸腔積液、肺膿腫等并發(fā)癥，危及患兒生命。因此，早期準(zhǔn)確的診斷十分必要。血清學(xué)檢測(cè)因價(jià)格經(jīng)濟(jì)、操作方便、快捷而被廣泛應(yīng)用。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)、化學(xué)發(fā)光免疫法(chemiluminescence immunoassay，CLIA)均可用于血清MP抗體檢測(cè)，但有關(guān)兩者檢測(cè)結(jié)果的比較報(bào)道較少。因此，本研究旨在比較CLIA與ELISA測(cè)定MPP患兒血清MP抗體的結(jié)果。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2017年3月至2019年3月就診于偃師市中醫(yī)院的60例MPP患兒臨床資料，根據(jù)檢測(cè)方法不同分組，將30例接受CLIA檢測(cè)的患兒納入CLIA組，將30例接受ELISA檢測(cè)的患兒納入ELISA組。CLIA組：男16例，女14例；年齡3～11歲，平均(5.62±1.10)歲；病程3～7 d，平均(5.45±0.50)d。ELISA組：男15例，女15例；年齡3～12歲，平均(5.70±1.05)歲；病程3～6 d，平均(5.35±0.30)d。兩組患兒性別、年齡、病程比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。本研究經(jīng)偃師市中醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《兒童肺炎支原體肺炎中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí)(2017年制定)》[2]中MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)；②存在發(fā)熱、咳嗽等癥狀；③經(jīng)X線、血常規(guī)及痰培養(yǎng)等確診為MPP。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①先天性心臟病；②肝、腎功能嚴(yán)重障礙；③其他病原體造成的肺部感染；④合并肺結(jié)核；⑤免疫系統(tǒng)異常。

1.3 檢測(cè)方法抽取患兒入院時(shí)5 mL外周靜脈血，以3 500 r·min-1的速率離心處理10 min后取上層血清檢測(cè)。分別使用CLIA檢測(cè)試劑盒、ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè) MP抗體(IgM、IgG)。CLIA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司，ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自以色列薩衛(wèi)亞公司。嚴(yán)格按照說明書操作。

1.4 觀察指標(biāo)比較兩組MP抗體陽性檢出率，MP抗體包括IgM抗體、IgG抗體。檢測(cè)結(jié)果采用MK3酶標(biāo)儀判讀，S/CO>1.0為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。MP抗體陽性檢出情況以頻數(shù)和率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CLIA組IgM抗體、IgG抗體以及MP抗體陽性檢出率均高于ELISA組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表1。

表1 兩組患兒MP抗體陽性檢出率比較[n(%)]

注：MP—肺炎支原體。

3 討論

MPP的病因在于MP感染。MP主要經(jīng)飛沫傳染，可潛伏2～3周，起病緩慢，會(huì)導(dǎo)致患兒出現(xiàn)陣發(fā)性刺激性咳嗽，伴有發(fā)熱、食欲減退、咽痛等癥狀，部分患兒會(huì)出現(xiàn)呼吸困難、痰中帶血、胸痛癥狀，如治療不及時(shí)，可能會(huì)引發(fā)肺栓塞、肺不張等并發(fā)癥，甚至死亡[3]。早期MPP患兒無明顯特征，發(fā)熱、咳嗽等癥狀與流感相似，易發(fā)生誤診，耽誤治療。因此，早期準(zhǔn)確檢測(cè)對(duì)提高M(jìn)PP患兒的療效、改善預(yù)后具有重要意義。

血清學(xué)檢測(cè)是診斷MPP的主要方法，可有效判斷MP感染。急性MP感染或近期MP感染，單次IgM 抗體滴度≥1∶160，急性期或恢復(fù)期的IgM抗體、IgG抗體滴度為4倍或4倍以上降低或升高時(shí)也可確診為MP感染，進(jìn)而確診為MPP。ELISA、CLIA是臨床應(yīng)用較廣泛的血清學(xué)檢測(cè)方法。本研究結(jié)果顯示，CLIA組IgM抗體、IgG抗體以及MP抗體陽性檢出率均高于ELISA組，說明相較于ELISA，CLIA對(duì)MPP患兒的血清MP抗體陽性檢出率更高，診斷結(jié)果更準(zhǔn)確。分析原因在于ELISA檢測(cè)的主要原理是抗體的酶標(biāo)記。酶標(biāo)記的抗體會(huì)保留免疫學(xué)活性與酶活性，在檢測(cè)時(shí)標(biāo)本中的抗體會(huì)與固相載體表面的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)，洗滌后加入酶標(biāo)記的抗體或抗原，會(huì)與固相載體結(jié)合，發(fā)生催化反應(yīng)，進(jìn)而放大免疫反應(yīng)結(jié)果，提高檢測(cè)敏感度。但ELISA檢測(cè)步驟較繁瑣，耗時(shí)較多，且檢測(cè)過程中受干擾環(huán)節(jié)較多，容易造成漏診、誤診，出現(xiàn)MP抗體假陽性，在檢測(cè)費(fèi)用方面，ELISA不適合單人份檢測(cè)，更適合批量檢測(cè)。

CLIA檢測(cè)是一種較ELISA先進(jìn)的檢測(cè)方法，是通過高特異性的免疫反應(yīng)結(jié)合高靈敏度的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)來檢測(cè)各種抗體、抗原、藥物制劑、酶等的檢測(cè)分析技術(shù)。CLIA檢測(cè)是利用化學(xué)發(fā)光劑、待檢標(biāo)本、磁顆粒性標(biāo)記的抗體、抗原進(jìn)行反應(yīng)，在磁場(chǎng)中將游離或結(jié)合狀的標(biāo)記物分離，并將發(fā)光促進(jìn)劑加入結(jié)合的標(biāo)記物中，進(jìn)行定量分析。CLIA檢測(cè)具有測(cè)定范圍廣、自動(dòng)化快速檢測(cè)、高靈敏度、高特異性、標(biāo)記物來源豐富、價(jià)格經(jīng)濟(jì)等多種優(yōu)勢(shì)，受到廣大檢驗(yàn)人員和臨床醫(yī)生的青睞。陳東妙等[4]表示CLIA檢測(cè)MP分型抗體有用時(shí)短、精密度高等優(yōu)勢(shì)。陳穎等[5]于研究中表明CLIA、ELISA均可檢測(cè)MP-IgG抗體和MP-IgM 抗體，但CLIA檢測(cè)較ELISA檢測(cè)具有更高的特異性、敏感度，與本研究結(jié)果相似。

綜上所述，相較于ELISA，CLIA對(duì)MPP患兒的血清MP抗體陽性檢出率更高，診斷結(jié)果更準(zhǔn)確。