艾葉提取物對2型糖尿病小鼠血糖和氧化應激的影響

尚喜雨 曲震理 劉尚書 劉慶春 王卿 未小明 張園園 薛士鵬

糖尿病是胰島素不足所致的代謝紊亂性疾病。糖尿病發病過程中會出現糖尿病腎病、糖尿病眼病、糖尿病心臟病等并發癥，影響患者生存質量和生命安全。控制血糖是延緩并發癥發生的關鍵，而選擇合適的藥物控制血糖是治療糖尿病的關鍵。隨著臨床對糖尿病研究的深入，中草藥在糖尿病血糖控制中有所應用。艾葉為菊蒿屬多年生草本植物艾的干燥葉。從艾葉中分離的成分有萜類、黃酮、苯丙素、芳香酸（醛）、甾體及脂肪酸等。現代藥理學研究提示，艾葉具有抗菌抗病毒、降血糖、降血壓、免疫調節等作用[1]。本研究旨在探討艾葉提取物對2型糖尿病小鼠血糖水平的影響及相關機制，為臨床尋找降血糖藥物提供一定的理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料選擇由華中科技大學動物實驗中心提供的健康清潔級昆明種雄性小鼠60只，重（15±4）g。實驗前均給予小鼠標準飼料進行喂養。實驗過程中均給予高脂飼料（其中基礎飼料占78.8%、膽鹽占0.2%、膽固醇占1%、豬油占10%、蛋黃粉占10%）喂養。艾葉提取物購自西安旭煌生物技術有限公司，規格50∶1 TLC，棕黃色粉末。四氧嘧啶購自Sigma公司。鏈脲佐菌素購自上海艾研生物科技有限公司。實驗中測定抗氧化相關指標所用試劑（超氧化物歧化酶、丙二醛）購自南京建成生物工程研究所。

1.2 方法所選60只小鼠隨機分為5 組，每組12只，分別為：對照組、模型組、高劑量組、中劑量組和低劑量組。對照組給予小鼠標準飼料喂養，其余4 組小鼠均給予高脂飼料喂養4 周后，禁食不禁水12h，連續3 天給予鏈脲佐菌素腹腔注射，注射劑量為35mg/kg，繼續給予高脂飼料喂養7d，禁食24h后，測定空腹血糖，血糖測定值大于11.0mmol/L 則提示糖尿病小鼠模型建立成功，繼續采用高脂飼料喂養。對照組給予同體積生理鹽水灌胃，連續應用4 周。模型組造模成功后給予同體積生理鹽水灌胃，連續應用4 周。低劑量組、中劑量組、高劑量組在糖尿病模型造模成功后，分別給予艾葉提取物灌胃，劑量分別為0.56g/kg、1.12g/kg、2.24g/kg，連續應用4 周。

1.3 檢測指標

1.3.1 測定灌胃4 周后小鼠的空腹血糖、空腹胰島素及肝糖原水平 連續灌胃4 周后，最后一次給藥后對小鼠禁食12h，測定其空腹血糖、空腹胰島素和肝糖原水平。肝糖原水平測定采用蒽酮比色法。空腹胰島素水平測定采用放射免疫法測定。

1.3.2 測定各組小鼠超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平 超氧化物歧化酶測定采用黃嘌呤氧化酶法。丙二醛測定采用硫代巴比妥酸法。

1.4 統計學方法采用統計學軟件SPSS 19.0 對本研究所得數據進行分析，均數比較采用t檢驗，各組不同均數比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組小鼠灌胃前后一般情況正常組小鼠灌胃前后無差異行為表現，模型組小鼠糖尿病造模成功后到灌胃實驗結束，2只小鼠死亡，可能與長時間高血糖水平有關。高劑量組1只小鼠死亡、中劑量組1只小鼠死亡、低劑量組2只小鼠死亡。

2.2 各組小鼠空腹血糖、空腹胰島素、肝糖原水平比較模型組空腹血糖水平高于對照組，空腹胰島素水平與肝糖原水平均低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。高、中、低劑量組的空腹血糖水平分別低于模型組，空腹胰島素水平與肝糖原水平均分別高于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）。高劑量組空腹血糖水平低于中劑量組，中劑量組空腹血糖水平低于低劑量組，差異有統計學意義（P＜0.05）。高劑量組空腹胰島素和肝糖原水平高于中劑量組，中劑量組空腹胰島素和肝糖原水平高于低劑量組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組小鼠空腹血糖、空腹胰島素和肝糖原水平比較

2.2 各組小鼠超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比較模型組超氧化物歧化酶活性低于對照組，丙二醛水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。高、中、低劑量組的超氧化物歧化酶活性分別高于模型組，丙二醛水平分別低于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）。高劑量組超氧化物歧化酶活性高于中劑量組，中劑量組超氧化物歧化酶活性高于低劑量組，差異有統計學意義（P＜0.05）。高劑量組丙二醛水平低于中劑量組，中劑量組丙二醛水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組小鼠超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比較

3 討論

糖尿病是胰島素缺乏所致的代謝紊亂性疾病，主要表現為三多一少癥狀（多飲、多食、多尿、消瘦）。胰島素不足或相對不足是導致糖尿病的根源[2]。糖尿病在其慢性發病過程中會產生相關并發癥，如糖尿病腎病、糖尿病眼病、糖尿病周圍神經病變、糖尿病心臟病等，這些并發癥會加速機體衰退[3，4]。糖尿病的有效治療就是應用相關藥物穩定血糖水平，延緩并發癥的發生。目前糖尿病患者的血糖控制藥物較多，如西藥中的胰島素制劑、口服降糖藥物雙胍類、黃酰脲類等[5，6]。這些藥物作用機制明確，療效確切，但作用具有單一性，而且長期服用可出現嚴重程度不一的不良反應，影響患者繼續治療。隨著中草藥研究深入，中藥在糖尿病治療中有所應用，并不斷加強。尋找改善糖尿病患者血糖水平的草藥是目前研究的重點之一。

艾葉為菊科蒿屬多年生草本植物艾的干燥葉，具有溫經止血、散寒止痛的作用。現代藥學研究表明[7，8]，艾葉提取物中的成分復雜，包含萜類、黃酮、苯丙素、芳香酸（醛）、甾體及脂肪酸等化學成分。研究認為，艾葉提取物具有鎮痛消炎、抗菌、抗病毒作用，還具有抗腫瘤、降血糖及降血壓等作用[9～11]。而在對艾葉提取物成分作用的研究中發現，艾葉中咖啡酸酯具有中度抗氧化活性[12～14]。艾葉總多糖、艾葉總黃酮也具有較好的抗氧化活性[15，16]。

本結果顯示，高、中、低劑量組的空腹血糖水平分別低于模型組，空腹胰島素與肝糖原水平均分別高于模型組。說明艾葉提取物有助于改善2型糖尿病小鼠的空腹血糖、空腹胰島素水平和肝糖原水平，提示艾葉提取物具有一定降血糖作用。高、中、低劑量組的超氧化物歧化酶活性分別高于模型組，丙二醛水平分別低于模型組。說明艾葉提取物能夠提高糖尿病小鼠超氧化物歧化酶活性，降低小鼠體內丙二醛水平，提高糖尿病小鼠的抗氧化能力，有助于降低糖尿病小鼠體內脂質過氧化水平，減輕氧化應激對糖尿病小鼠造成的損傷。綜上所述，艾葉提取物能夠改善2型糖尿病小鼠血糖情況，這種改善血糖作用可能與其抗氧化應激作用有關。