余小東 唐紅英 沈堅
(1,浙江省新昌縣城南鄉人民政府 312500;2,浙江省新昌縣農業農村局 312500;3,浙江省臺州市路橋區農業農村局 318050)
球蟲病和巴氏桿菌作為兔消化道和呼吸道兩大常在的病原,當天氣變化和飼料轉換以及其他應激情況存在常會引起內源性感染,從而引起發病。由于球蟲和巴氏桿菌存在于兔的不同生理系統,臨床上這兩種疾病一起混合感染并不多見,容易疏忽從而造成誤診,延誤病情造成不必要的損失[1-2]。現將筆者最近碰到的一個病例與大家分享。
該獺兔場規模中等,存欄約1200 多只;兔舍位于小山坳中,依山而建,坐北朝南;飼料為外加工商品飼料,偶爾補充新鮮黑麥草。2019 年2 月底3 月初開始陸續發病,發病初期以腹圍增大、腹瀉癥狀為主,沒有特別在意呼吸道癥狀,以青年兔為主,每天死亡3~5 只,最多的時候每天死亡7~8 只。兔場根據以往的經驗,在飼料中添加磺胺氯丙嗪鈉(三字球蟲粉),連用5d,有一定的效果,病情有所緩解,但沒有完全控制住,斷斷續續仍有兔子死亡。然后病情逐漸往仔兔發展,仔兔出現咳嗽、打噴嚏的聲音,能見到有的兔子鼻腔流黏液,個別出現了歪脖子,遂送我處診治。
病兔體溫升高(41℃左右),精神不振,食欲減退,呼吸急促伴有拉稀;部分腹圍明顯增大,部分有彎脖子,耳朵一支豎起一支耷拉;病兔打噴嚏、咳嗽,呼吸困難;從鼻腔流出漿液性鼻液,以后轉為黏液性到膿性;病兔常用爪抓鼻部、口唇部,鼻孔周圍毛潮濕、纏結,甚至脫落,上唇和鼻孔發炎、腫脹。幼兔唾液分泌增多,流涎,眼結膜蒼白、貧血,被毛粗亂無光澤。大部分出現腹瀉甚至排便帶血,肛門周圍被糞便污染;個別未出現明顯腹瀉,突然用頭撞籠舍,呈角弓反張,尖叫而亡;后期一半以上有神經癥狀,四肢痙攣或麻痹,角弓反張。
病死兔表現為消化道的病變為主要,腸道炎癥表現明顯;在腸道各腸段有不同程度臌氣,輕度出血,腸壁變薄,腸腔擴張,腸內容物稀薄,內容物呈灰褐色或棕褐色;盲腸膨大,內充盈有氣體和液體;有的兔子腹腔內有大量腹水。胃多數充盈,有的胃底部黏膜脫落,個別胃底部糜爛,一觸即破。腸系膜充血明顯,淋巴結腫大。肺充血,有點狀出血或出血斑,部分肺表面有纖維素性滲出,與胸壁粘連;心臟肥大,心冠脂肪溝散在出血小點;氣管充出血明顯,伴有紅色黏液,有的可見血絲;肝臟略腫大,質脆,個別兔子肝臟可見少量針尖狀壞死灶;脾臟基本正常,其他實質性臟器未見明顯病變。
4.1.1 組織觸片染色
取新鮮肺臟組織,用鋒利剪刀取黃豆大小病變明顯部位,在干凈載玻片輕輕按壓,晾干;用改良瑞氏-吉姆薩染色5min;鏡檢,在觸片上可見多量藍色的兩極濃染細菌,疑為巴氏桿菌。
4.1.2 細菌分離
無菌取心血、肝、肺等部位,分別接種于TSA 培養基和麥康凱培養基中,37℃培養24 h。麥康凱培養基上未見細菌生長;TSA 平板上的出現圓形、光滑、濕潤、半透明菌落,菌落大小為1~2mm。該菌革蘭氏染色陰性,卵圓形,兩極濃染的球桿菌[3]。
4.1.3 生化鑒定
用無菌接種針挑取單菌落涂布于氧化酶試紙,顯紅色,為氧化酶陽性;同時挑取單菌落置于3%過氧化氫溶液內,未見氣泡產生,接觸酶陰性;故使用15e 非發酵細菌生化鑒定管鑒定進行生化鑒定。將上述分離細菌,接種于TSB 中培養液中,37℃培養24h;用無菌金屬絲將菌液接種于微量發酵管內,37℃培養36~48h,觀察結果(見表1)。
結果為多殺性巴氏桿菌。
4.1.4 藥敏試驗
采用藥敏紙片擴散法(K-B 法): 將上述分離細菌,接種于TSB 中培養液中,37℃培養24h,取200μL 菌懸液,用滅菌三角玻棒均勻涂布于含TSA 平板中,待菌液干后用無菌鑷子取藥敏紙片置于培養基表面,使紙片之間距離適當。置37℃培養24~36h 后觀察結果,游標卡尺測量抑菌圈直徑(見表2)。
結果表明,分離細菌對頭孢噻呋、頭孢噻肟、阿米卡星、卡那霉素、清大霉素、復方新諾明、壯觀霉素高敏,對氟苯尼考、氨芐西林、環丙沙星、恩諾沙星為中敏,對紅霉素和青霉素耐藥。

表1 分離細菌微量生化管鑒定結果

表2 分離細菌藥敏試驗結果
取小腸內容物2g 左右,溶于生10ml 生理鹽水,用40 目濾網濾去糞渣,溶液置離心管中,3000rpm,離心20min,傾去上清,在殘渣內加入飽和食鹽水攪拌均勻,靜置10min,用鐵絲圈蘸取液面液體置于載玻片上,低倍顯微鏡下暗視野觀察,發現有多量卵圓形的球蟲卵囊。
根據上述實驗室檢查結果,并結合臨床癥狀和剖解病變,本次發病確診為兔球蟲和多殺性巴氏桿菌并發感染。
根據上述診斷結果,考慮本場先前用藥的情況和經濟情況,建議在飼料中添加氯苯胍加復方新諾明,連續飼喂5d;病情嚴重的可以注射卡那霉素或阿米卡星。復方新諾明不但對多殺性巴氏桿菌有效,而且也能增強氯苯胍的抗球蟲效果。考慮到頭孢噻呋、頭孢噻肟等為三代頭孢,雖然抗菌效果好,在動物使用時不作為首選藥物。
做好兔舍的消毒、通風,保持兔舍的干燥和溫暖,防止應激。及時清理病死兔只和糞便,并進行無害化處理,防止疾病傳播[4]。對發病嚴重的兔只進行隔離單獨治療,確保藥物足量使用(磺胺類藥物首日倍量)。對于沒有發病的健康兔只進行緊急免疫兔瘟-巴氏桿菌二聯滅活苗,皮下注射1.5ml/只[5,6]。
經過上述方法處理,兔場于5 日后基本控制,7d 后完全恢復正常。
兔球蟲和巴氏桿菌病作為兔體常在病原,在天氣變化和應激等情況下容易發生[5,6]。而發病以后,兔子腹圍增大和腹瀉是最容易看到的癥狀,以至于僅當球蟲病進行治療,而忽視巴氏桿菌的并發感染,造成誤診和損失。因此,當兔場出現疫病時,要充分考慮疾病的復雜性,特別是混合感染的可能性,切勿憑經驗進行亂投藥;應及時請獸醫并結合實驗室診斷進行確診,把損失降到最低程度。