復合益生菌制劑對小白鼠生長性能、腸道微生物菌群結構及血清生化指標的影響

徐 鳳， 邱發明， 邱 揚

（1.白城醫學高等專科學校，吉林白城 173000；2.吉林省畜牧業學校，吉林白城 173000；3.昆明醫科大學海源學院，云南昆明 650000）

小白鼠是野生鼷鼠的變種鼠種，大多用于醫學研究。昆明系小白鼠作為實驗室主要的模式動物被普遍用在生理學、醫學、藥學等學科的教學與研究中，為研究工作的開展給予了可靠的支持（崔燦，2019；楊慧軍，2012）。益生菌主要來源于動物的胃、腸道，是動物胃、腸道消化過程中主要的微生物菌群，在動物消化過程中起著重要的作用，臨床中常見的益生菌主要包括乳酸桿菌、乳雙歧桿菌、酵母菌、糞尿球菌、腸球菌等，這些益生菌具有促進動物生長發育，調整腸道內菌群平衡，提高免疫機能等多種優點，益生菌可以替代抗菌藥物使用，具有廣闊的應用前景（劉正旭，2019；李巧蘭，2019；亓愛杰，2019）。復合益生菌制劑是由多種益生菌經過特殊工藝制成的一種具有調節作用的活菌制劑，該制劑具有多種營養與保健作用且應用范圍廣、容易制備、使用方便，被廣泛應用于畜禽養殖中（劉政，2017）。因此，本試驗在實驗小白鼠的基礎日糧中添加不同水平的復合益生菌制劑，旨在探討其對腸道微生物菌群結構及血清生化指標的影響，為復合益生菌制劑在實驗小白鼠中進一步的應用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復合益生菌制劑主要由乳酸桿菌、乳雙歧桿菌、糞尿球菌、腸球菌4種不同比例的益生菌組成，4種益生菌的活菌數均大于7.5×109cfu/g，由白城醫學高等專科學校微生物實驗室制備；糞便中大腸桿菌、沙門菌、乳酸桿菌、乳雙歧桿菌鑒定試劑盒購于 Elabscience公司；總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酸氨基轉移酶 （GPT）、天門冬氨酸氨基轉移酶 （GOT）、血尿素氮（BUN）等試劑盒均購于北京中控生物技術有限公司。

1.2 飼糧配比 參考秦哲（2017）文獻，根據小白鼠的營養需要，配制基礎飼糧，其組成及營養水平見表1。

表1 飼糧組成及營養水平（干物質基礎）%

1.3 試驗設計與管理 采用單因素隨機設計試驗，選擇體質量為（20±2.5）g健康實驗昆明系小白鼠360只隨機分成4個組，每個組3個重復，每個重復30只，1組飼喂基礎日糧為空白對照組，試驗2、3、4組分別在基礎日糧中添加0.25%、0.5%、1.0%的復合益生菌制劑，試驗期為28 d。按照常規飼養管理方式進行飼養與管理，每個重復組單獨飼養，自由采食和飲水，飼養環境一致，適合的溫度與光照。

1.4 生長性能測定 在試驗期間記錄試驗開始與結束的體重及耗料量，測定平均日增重、平均日采食量、料重比等生長性能指標。

1.5 腸道微生物菌群結構測定 參照李平（2019）報道方法，試驗結束前4 d，采集每個重復組實驗小白鼠的新鮮糞便大約50 g，混合均勻進行處理。糞便中大腸桿菌、沙門菌、乳酸桿菌、乳雙歧桿菌鑒定按試劑盒說明書進行，分離細菌計數，每克糞便中菌群總數用對數（lg cfu/g）表示。

1.6 血清中生化指標測定 在試驗結束后，每個組隨機抽取10只小白鼠摘眼球取血，離心分離血清。按照說明書測定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酸氨基轉移酶 （GPT）、天門冬氨酸氨基轉移酶 （GOT）、血尿素氮（BUN）等生化指標。

1.7 試驗數據統計與分析 試驗數據用 “平均值±標準差”表示，采用統計學分析軟件SPSS 18.0對試驗結果進行單因素方差分析，以P＜0.05表示差異顯著性。

2 結果

2.1 復合益生菌制劑對實驗小白鼠生長性能的影響 由表2可知，試驗3、4組小白鼠平均日增重較1組相比分別提高31.9%、29.8%（P＜0.05），試驗2組高于1組，差異性不顯著（P＞0.05），試驗 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗2、3、4組平均采食量均高于1組，但差異性不顯著 （P＞0.05）；試驗3、4組料重比較1組相比分別降低 16.2%、15.7% （P＜0.05），試驗 2組低于 1 組，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗 2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 復合益生菌制劑對實驗小白鼠生長性能的檢測結果

2.2 復合益生菌制劑對實驗小白鼠腸道微生物菌群結構的影響 由表3可知，試驗3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組相比分別降低19.2%、18.5% （P＜0.05），試驗2組低于1組，差異不顯著（P ＞ 0.05），試驗 2、3、4 組之間差異不顯著（P ＞0.05）；試驗 2、3、4組糞便中的沙門菌含量均低于1組，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗 3、4組糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌含量較1組相比分別提高31.9%、31.5%、16.8%、16.2% （P ＜ 0.05），試驗2組高于 1 組，差異性不顯著（P ＞ 0.05），試驗 2、3、4組之間相比，差異不顯著（P＞0.05）。

表3 復合益生菌制劑對實驗小白鼠腸道微生物菌群結構的檢測結果lg cfu/g

2.3 復合益生菌制劑對實驗小白鼠血清生化指標的影響 由表4可知，試驗3、4組血清中TP含量較1組相比分別提高 14.7%、14.4% （P＜0.05），試驗2組高于1組，差異性不顯著（P＞0.05），試驗2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗2、3、4組血清中的ALB含量均高于1組，但差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗 2、3、4 組血清中的 GOT 含量均低于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；試驗3、4組血清中GPT、BUN含量較1組相比分別降低 11.1%、11%、21.7%、21.3%（P ＜ 0.05），試驗 2組低于 1 組，差異性不顯著（P ＞ 0.05），試驗 2、3、4 組之間，差異性不顯著（P＞0.05）。

表4 復合益生菌制劑對實驗小白鼠血清生化指標的檢測結果

3 討論

益生菌中富含多種營養物質，具有多種作用與功效，被廣泛應用于雞、豬、牛、羊健康養殖過程中。研究表明，益生菌可以顯著提高動物的生長性能（亓愛杰，2019）。本試驗研究表明，試驗3、4組小白鼠平均日增重較1組相比分別提高31.9%、29.8%（P ＜ 0.05），試驗 2、3、4組平均采食量均高于1組（P＞0.05），試驗3、4組料重比較1組相比分別降低16.2%、15.7%（P＜0.05）。說明復合益生菌可以提高實驗小白鼠的生長性能。可能由于復合益生菌中富含多種營養物質及消化酶類，可促進飼料在實驗小白鼠體內的消化吸收，提高飼料在體內的利用率，促進實驗小白鼠生長，從而提高小白鼠的生產性能，以0.5%添加為適宜。

動物腸道中包括益生菌菌群和致病菌群，其中益生菌菌群中的乳酸桿菌和雙歧桿菌是機體重要的生理性細菌，具有抗感染、增強免疫力及拮抗有害微生物的作用 （楊巧麗，2017）。益生菌菌群和致病性菌群結構保持動態平衡，當致病菌群占主要地位時，就會引起動物腹瀉等疾病，動物腸道中微生物菌群的平衡對動物健康起著重要的作用（張任帥，2017）。本試驗研究表明，試驗3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組相比分別降低19.2%、18.5% （P ＜ 0.05），試驗 2、3、4組糞便中的沙門菌含量均低于1組（P＞0.05），試驗3、4組糞便中的雙歧桿菌和乳酸桿菌含量較1組相比分別提高 31.9%、31.5%、16.8%、16.2% （P ＜ 0.05）。 說明復合益生菌制劑可以降低大腸桿菌、沙門菌等有害菌的數量，提高其雙歧桿菌和乳酸桿菌含量水平，從而改善實驗小白鼠的的腸道微生物菌群結構，促進腸道微生態平衡。

國內外許多相關研究表明，物質在有機體內代謝過程與肝、腎等功能生化指標具有一定相關性，血液生化指標動態變化在一定程度上可以直接反映動物的健康狀況（張召興，2018）。肝、腎功能器官代謝過程中與血清中總蛋白、總蛋白、谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶及尿酸的含量有關，其指標的高低可以直接影響肝、腎的代謝功能 （鮑坤，2015）。本試驗研究表明，試驗3、4組血清中TP含量較 1組比分別提高 14.7%、14.4% （P＜0.05），試驗2、3、4組血清中的ALB含量均高于1組（P ＞ 0.05），試驗 2、3、4組血清中的 GOT 含量均低于1組（P＞0.05），試驗 3、4組血清中 GPT、BUN含量較1組相比分別降低 11.1%、11%、21.7%、21.3%（P＜0.05）。說明復合益生菌制劑對實驗小白鼠的肝腎無明顯損傷作用，還可以提高其肝、腎代謝水平，其作用機理有待進一步研究。

4 結論

本試驗結果表明，日糧中添加0.5%復合益生菌制劑可以提高小白鼠的生長性能，改善腸道微生物菌群結構，提高肝腎代謝功能。