QuECHERS-LC-MS/MS快速檢測番茄18種農藥殘留

楊昌彪 付春艷 羅廷武

關鍵詞：QuECHERS;LC-MS/MS;快速檢測;番茄;農藥殘留

隨著生活水平的提高，人們的飲食消費需求逐漸從解決溫飽向質量安全、營養方向轉變。農藥殘留是現階段關于農產品的一個關注熱點，由于農產品具有保質期短、不易保存等特點，因此在監管過程中須要快速對其質量安全指標進行快速檢測分析，以便于執法。但目前國家標準所規定的對農產品農藥殘留進行的檢測方法前處理過程繁瑣，不易快速篩查，且因標準制定較早，新藥上市后，國家標準方法更新滯后，不利于對產品進行快速篩查。

目前檢測農藥殘留的方法眾多，常見的有氣相色譜法（GC）[1]、液相色譜法（LC）[2]、氣質聯用法[3]、液質聯用（LC-MS）法[4]等。不同的檢測方法及標準各有優缺點，前處理過程繁瑣及儀器分析時間長是這些方法常見的突出問題，不易于大批量樣品的快速檢測分析。黃霞等建立了柑橘中常見的50種農藥殘留的氣相色譜/質譜（GC/MS）檢測方法，平均回收率為 72.0%～118.2%，相對標準偏差（RSD）為1.7%～19.7%[5]。劉冰等采用QuEChERS（quick、easy、cheap、effective、rugged、safe）方法對試樣進行前處理后，再采用質譜法進行農藥殘留檢測分析，建立了同時測定蔬菜水果中31種農藥殘留的方法，回收率在72%～128%之間，RSD為4.2%～9.9%[6]。余璐等將茶葉樣品用乙腈提取后，采用石墨化碳黑（Carb）-乙二胺基-N-丙基（PSA）萃取小柱進行凈化，然后通過儀器檢測比對分析，建立了茶葉中204種農藥殘留的超高效液相色譜-四極桿-飛行時間質譜（UPLC-Q-TOF/MS）快速篩查法[7]。本研究建立了番茄中多種農藥殘留分析方法，旨在為水果蔬菜中農藥殘留的快速篩查分析提供一定的技術方法支撐。

1 材料與方法

1.1 主要儀器、試劑與材料

液相色譜質譜儀[Aglient1200-6410，安捷倫科技（中國）有限公司];電子天平[BSA124S-CW，賽多利斯科學儀器（北京）有限公司];低速離心機（湘儀L550，湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司）;高速離心機（TG16W，長沙平凡儀器儀表有限公司）。

甲醇、乙腈（Merck公司產品）;農藥標準品（抗蚜威、3-羥基克百威、噻蟲啉、克百威、甲萘威、甲霜靈、嘧霉胺、咪鮮胺、殺撲磷、滅線磷、馬拉硫磷、氯唑磷、三唑磷、蟲酰肼、苯醚甲環唑、治螟磷、二甲戊靈、阿維菌素），由農業農村部環境保護科研監測所提供;番茄樣品為市售。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品前處理 稱取15.00 g番茄樣品置于50 mL塑料離心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液，渦旋，超聲提取15 min，加入鹽析包及小磁石，迅速搖勻后，置于冰水中快速冷卻，然后劇烈振搖 10 min，在4 000 r/min條件下離心5 min，靜置片刻，吸取1.5 mL離心上清液置于2 mL QuEchERS凈化管中，渦漩振蕩1 min，在12 000 r/min條件下離心2 min，過0.22 μm有機相濾膜，備用。

1.2.2 標準曲線配制 稱取5個陰性樣品，按照“1.2.1”節中的方法進行處理，取8 mL進行凈化，離心后合并凈化液，用于標準溶液配制。分別取18種濃度均為100 μg/mL的農藥標準品0.50 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，得到濃度為 5.00 μg/mL 的標準儲備液，取濃度為 5.00 μg/mL 的標準儲備液0.4 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，得到200 ng/mL稀釋液。然后分別取 200 ng/mL 稀釋液0.15、0.50、1.00、2.00、2.50 mL 置于5 mL容量瓶，用空白基質定容，得濃度分別為0.006、0.020、0.040、0.080、0.10 μg/mL的溶液。

1.2.3 色譜條件 色譜柱：Agilent Zorbax-C18柱（3.0 mm×100 mm，2.7 μm）;流動相用0.1%甲酸乙腈（A）和0.002 mol/L乙酸銨水溶液（B）進行梯度洗脫，淋洗梯度：0～1 min（95%+5%）;1.0～1.5 min（50%+50%）;1.5～3.0 min（40%+60%）;3～5 min（5%+95%）;5～7 min（5%+95%）;7～8 min（95%+5%）。流速為0.3 mL/min，進樣量為10 μL，柱溫40 ℃。

1.2.4 質譜條件 離子檢測方式為多反應離子檢測（MRM）和子離子掃描，極性為正離子（positive），離子化方式為電噴霧離子化（ESI），毛細管電壓為 4 000 V，干燥氣溫度為330 ℃，干燥氣流速為 8.0 L/min，霧化氣壓力為40 psi。其他質譜條件詳見表1。

2 結果與分析

2.1 LC-MS/MS總離子流圖

在“1.2.3”“1.2.4”節條件下測得，18種農藥總離子流圖和樣品空白圖見圖1，不同農藥提取離子色譜見圖2。

因儀器的靈敏度較高，低含量目標物受到的干擾較大，須用不同基質對同類樣品提取目標物進行基質配標校正，以降低基質效應，保證結果的準確性。從圖1可以看出，該方法在5.5 min內即可完成對18種農藥殘留的檢測，因目標化合物保留時間比較接近，所以總離子流圖出現峰重疊現象，但提取離子色譜圖后，峰型良好，不影響定性、定量分析結果，同時，氯唑磷和三唑磷保留時間與母離子基本相同，因此通過優化后可用質荷比（m/z）為286的離子峰輔助氯唑磷定性。

2.2 檢測方法的線性范圍及檢出限

通過基質配標，上儀器分析后，不同化合物在0.006～0.100 μg/mL濃度范圍內的線性方程及相關系數見表2。同時，按3倍信噪比（S/N）計算檢測方法檢出限。

2.3 檢測方法的回收率及實驗室內的變異系數 稱取18份陰性樣品，設置3個添加水平（8、50、100 μg/kg），每個水平設6個平行，檢測結果見表2。

從表2可以看出，采用本研究方法檢測18種農藥殘留得到的回歸方程線性良好，相關系數均在 0.995 9～0.999 9間，不同添加水平的回收率均在70.1%～128.9%，變異系數在0.2%～12.6%，回收率及變異系數滿足實驗室質量控制規范要求，證明了本研究方法具有可行性。

3 結論

通過Quechers前處理技術與LC-MS/MS結合的方法，建立了對番茄中18種農藥殘留快速檢測的方法，采用3個添加水平的農藥對該方法進行驗證，結果表明，該方法測定的結果穩定，靈敏度高，重復性好，能滿足日常檢測工作需要。

參考文獻：

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