4種殺菌劑對遠志根腐病的防治效果

劉 佳，郭淑紅，裴帥帥，羅淑政，田洪嶺

（1.忻州師范學院生物系，山西忻州034000；2.山西省農業科學院經濟作物研究所，山西汾陽032200）

遠志（Polygala tenuifolia Willd.）屬于遠志科遠志屬多年生草本植物，以根入藥，是我國重要的傳統出口藥材，國家重點保護的三級野生品種。山西省作為遠志主產區[1]，所產遠志占全國產量的80%以上，以運城、臨汾為主向周邊縣市延伸[2]。運城市新絳縣陽王鎮地處山西省境西南，屬丘陵旱垣地區，海拔400～450 m，生態環境適宜遠志生長，是遠志的道地產區，全國栽培種源的90%以上遠志由此地提供，是當地農民致富的主導產業。但是，近年來，新絳遠志根腐病發生嚴重，降低了農民種植遠志的積極性，使其種植面積開始萎縮，嚴重制約了山西遠志產業的發展。目前，對遠志根腐病的研究還很少。

本試驗以遠志為主要研究對象，分離鑒定遠志根腐病的主要致病菌，并探究多菌靈、苯醚甲環唑、代森錳鋅、甲基立枯磷4種殺菌劑對遠志根腐病病原菌的防治效果，篩選出最佳防治濃度，采用合理有效的殺菌劑對遠志的根腐病進行防治，為提高遠志的產量和質量提供一定的栽培依據。

1 材料和方法

1.1 病原菌的采集

采集自山西省新絳縣陽王鎮遠志種植基地，選取根部腐爛嚴重的病株，進行取樣。

1.2 試驗方法

1.2.1 病原菌的分離純化 將遠志根部腐爛組織截成每段5 mm長，用5%的次氯酸鈉消毒3 min，然后用無菌水多次沖洗干凈，接種在PDA培養基平板上，25℃人工氣候箱中進行培養、純化，獲分離菌的純培養。

1.2.2 致病性測定 采用離體根部刺傷接種法，選取健康無病的遠志，截取長3 cm的根段，用滅菌后的針淺刺根部，將純化后的病原菌打成菌餅，接種到刺傷部位，每種病原菌3次重復。用無菌的脫脂棉包裹住根部的兩端，然后在棉花上滴加無菌水，放到培養皿上在25℃的恒溫培養箱中進行培養，5 d后統計發病情況，計算根腐病的發病率。以發病率為依據，進行再次分離試驗。

1.2.3 病原菌的鑒定 參照STAMPS[3]和HAWKSWORTH等[4]的方法以及《土壤微生物分析方法手冊》[5]，通過觀察病原菌的菌落大小、形態、顏色及菌絲的形狀、顏色等進行初步鑒定。

1.2.4 室內藥劑抑菌效果的測定 藥劑的種類及稀釋：將50%多菌靈可濕性粉劑（蘇州遍凈植保科技有限公司）分別稀釋450、600、750、900、1 050倍，20%的苯醚甲環唑水乳劑（山東省青島瀚生生物科技股份有限公司）分別稀釋1 000、1 250、1 500、1 750、2 000倍，80%代森錳鋅可濕性粉劑（利民化工股份有限公司）分別稀釋450、600、750、900、1 050倍，20%甲基立枯磷乳油（江蘇省連云港市東金化工有限公司）分別稀釋250、500、750、1 000、1 250倍。

采用生長速率法[6]，將錐形瓶中定量滅菌后的PDA培養基溫度降至50℃，加入以上稀釋好的藥劑，搖勻后倒入培養皿內，冷卻制板，將活化好的帶有致病性的4種菌株打取6 mm菌餅，將菌餅分別接種到含藥PDA上，置于25℃培養箱內培養，每個處理重復3次，以不加藥劑的平板為對照，培養5d后測量病原菌菌落直徑，計算抑菌率。

1.3 數據處理

采用Excel軟件統計數據并作圖分析。

2 結果與分析

2.1 病原菌的初步鑒定

從采集的病株中，共分離出來112株病原菌，從致病性測定結果發現，4種主要的致病菌為鐮刀菌屬菌株，其由強到弱依次為Y6-3、Y2-1、Y8-2、M6-3。

2.2 不同藥劑對遠志根腐病病原菌的抑制效果

以分離出的致病率在50%以上的4種菌株為藥劑防治對象，進行室內藥劑測定，結果表明，不同濃度的多菌靈對遠志根腐病的病原菌整體抑制效果很差（圖1），其中，對Y8-2菌株幾乎無抑制效果；對Y2-1、Y6-3的抑制效果在最高濃度450倍稀釋時抑菌率僅分別為21.35%、12.55%，低濃度時對其無法抑制；對M6-3菌株稀釋450倍時抑制率最高為32.57%，且隨著濃度逐漸降低抑制效果變差。

不同濃度的苯醚甲環唑對遠志根腐病的病原菌整體抑制效果好（圖2），最高濃度1 000倍稀釋時對4個菌株的抑制率均高于70%，對菌株Y8-2、Y6-3、M6-3和Y2-1的抑制率依次為88.07%、85.67%、85.59%、73.07%；不同稀釋倍數對Y6-3和Y8-2菌株的抑制率影響較小，平均抑菌率分別為84.98%、84.19%，均高于84%；1 500倍稀釋時對菌株Y2-1、M6-3的抑制率下降明顯，抑菌率分別為43.69%、61.26%。4個菌株中，對Y2-1的整體抑制效果最差。

不同濃度代森錳鋅對遠志根腐病整體抑制效果較差（圖3），其中，最高濃度450倍稀釋后對Y2-1的抑菌率最高，僅為44.88%；隨著濃度降低，抑菌率逐漸降至1.37%；對其他3個菌株的抑制率均低于20%，其中，對M6-3和Y6-3的菌株幾乎無抑制作用，最高濃度時，抑菌率僅分別為7.86%、6.25%。

不同濃度甲基立枯磷對遠志根腐病整體抑制效果較好（圖4），最高濃度對Y6-3、Y2-1、M6-3和Y8-2這4個菌株的抑制率均高于50%，分別依次為64.75%、65.77%、57.88%、52.47%，且對4個菌株的抑制趨勢相同，隨著濃度的下降，抑菌率逐漸下降，當稀釋倍數為750倍時，對菌株Y2-1、Y6-3、Y8-2的抑制率下降顯著，抑菌率分別為18.91%、22.53%、26.44%。

3 結論與討論

供試的4種殺菌劑均對遠志根腐病的4種病原菌菌絲的生長有一定的抑制作用，其中，苯醚甲環唑對根腐病的抑制率最高，1 000倍稀釋后抑制效果最好，對菌株Y8-2、Y6-3、M6-3和Y2-1的抑菌率分別達到了88.07%、85.67%、85.59%、73.07%；甲基立枯磷次之，稀釋250倍后，對菌株Y6-3、Y2-1、M6-3和Y8-2的抑制率分別為65.77%、64.75%、57.88%、52.47%；多菌靈和代森錳鋅對菌絲的抑制效果較差。根據菌株的致病性強弱，對Y6-3、Y2-1菌株，用苯醚甲環唑1 000倍液、甲基立枯磷250倍液都可以很好抑制菌絲生長；對于Y8-2、M6-3菌株，苯醚甲環唑1 000倍抑制效果好。

根腐病是根莖類藥用植物栽培過程中高發的一類病害，它具有易傳染、致死率高、防治難度大等特點[8]。近年來，對遠志的進一步研究發現，其有保護神經、增強記憶、抗炎、抗抑郁等多種藥理作用[9-20]，使其在發現新的藥物方面發揮重要作用，因此，對遠志的需求量逐年增長，而遠志根腐病的暴發是制約遠志產量的重要影響因素之一。遠志根腐病的發病首先表現在根莖相連的地表位置，引起地下部分腐爛，地上部分葉片發黃、植株干枯、萎蔫。農民一味追求遠志的產量，長期濫用農藥，使病原菌的抗藥性增加，防治效果降低，生態系統被破壞，致使藥材減產、農藥殘留超標、品質下降。因此，尋找引起遠志根腐病的主要致病菌，根據病原菌特性，篩選出合理安全防治遠志根腐病的殺菌劑至關重要。

目前，對根莖類藥用植物的防治大部分都以化學農藥防治為主。單一的化學防治對遠志根腐病病原菌在一定時間內可能會有較好的殺菌效果，但是長時間使用同一種化學殺菌劑，會使病原菌產生一定抗藥性，后期無法達到預期的防治效果。從食用安全角度出發，應當交替使用不同種類、濃度的殺菌劑，避免產生抗藥性。在種植過程中，遇到根腐病大暴發時，嚴重影響農民經濟收入，可以合理適當使用殺菌劑。但由于遠志的經濟效益較高，農民在種植過程中，為了利益往往過量使用殺菌劑，造成農藥殘留，污染生態環境，而使用生物防治的方法可以很好地避免這些問題。目前，白術、黃芪、黨參等已在生物防治上取得了一定研究成果，生物防治的這一優點，受到廣泛重視并發揮著越來越重要的作用[21]。本研究下一步也將繼續朝著生物防治的方向，對遠志根腐病的生物防治進行研究。