習慣性流產患者血清VEGF、TGF-β1 的水平變化及其臨床意義

賴宇堯 劉志偉 肖雪蓮

RSA 多發生在同一時間段,主要是指連續三次或三次以上出現胎兒丟失者,又稱之為反復性流產。RSA誘發因素較多,包括不良嗜好、年齡、心理、內分泌、感染、環境、遺傳等。隨著研究的不斷深入,發現免疫因素在RSA 患者發病中具有重要作用［1］。有研究結果顯示,妊娠成功的關鍵在于正常母胎免疫耐受,目前常運用血清免疫學檢測,能夠有效了解當前機體免疫失衡情況［2］。目前血清指標中,最為常用的兩項為血清VEGF、TGF-β1,其中VEGF 能夠促進胚胎著床,參與調節早期無血管期胚胎的發育進展,能夠促進內膜分化和增生［3］；TGF-β1在正常妊娠中,可起到免疫抑制作用,屬于一種調節細胞分化、生長的多肽,可抑制免疫性細胞增殖［4］。本文研究探討RSA 患者血清VEGF、TGF-β1水平的變化及其臨床意義,具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年2月15 日～2018年2月15 日本院收治的200例RSA 患者作為此次研究對象,根據病因不同分為原發組(原發性RSA)和繼發組(繼發性RSA),各100例。繼發組平均年齡(28.95±2.43)歲,平均孕周(13.48±1.54)周,平均流產次數(5.62±1.65)次；原發組平均年齡(28.52±2.78)歲,平均孕周(13.55±1.23)周,平均流產次數(5.53±1.22)次。另選同期100例要求終止妊娠的正常健康早孕女性作為對照組,平均年齡(28.43±2.11)歲,平均孕周(13.47±1.24)周。三組受檢者一般資料比較,差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。入選標準：①受檢者均自愿加入本次實驗,且簽署書面同意書；②受檢者經B 超檢查,可發現宮內妊娠,且胚胎尚存活；③受檢者年齡＞18歲；④受檢者夫妻雙方均無嚴重全身性疾病,染色體正常；⑤女方婦科檢查正常,男方精液檢查正常。排除標準：①排除自身免疫性疾病或生殖道感染疾病受檢者；②排除內分泌異常者；③排除生殖器官解剖異常者；④排除夫妻雙方胚胎染色體異常者；⑤排除合并嚴重肝腎功能障礙者；⑥排除合并免疫系統疾病者。

1.2 檢查方法 抽取受檢者空腹狀態下的5 ml 外周靜脈血,進行血清分離處理,取上清液,維持15 min 離心,5000 r/min 速度,并將其置于低溫冰箱(-20℃)下保存待檢測。在檢測血清VEGF、TGF-β1時,還需使用酶聯免疫吸附測定(ELISA)夾心法檢測,本次使用的ELISA 試劑盒為北京晶美生物工程有限公司生產,具體操作需嚴格按照說明書進行。

1.3 觀察指標 比較三組受檢者的血清TGF-β1和VEGF 水平變化情況。比較繼發組和原發組不同RSA分期的血清TGF-β1和VEGF 水平變化情況。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差()表示,采用t 檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組血清TGF-β1和VEGF 水平比較 原發組、繼發組的TGF-β1水平高于對照組、VEGF 水平低于對照組,原發組TGF-β1水平高于繼發組、VEGF 水平低于繼發組,差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 繼發組和原發組不同RSA 分期血清TGF-β1和VEGF水平比較 繼發組早期TGF-β1低于晚期,VEGF水平高于晚期,差異具有統計學意義(P＜0.01)；原發組早期TGF-β1低于晚期,VEGF 水平高于晚期,差異具有統計學意義(P＜0.01)。見表2。

表1 三組血清TGF-β1 和VEGF 水平比較 (,ng/L)

表1 三組血清TGF-β1 和VEGF 水平比較 (,ng/L)

注：與對照組比較,aP＜0.05；與繼發組比較,bP＜0.05

表2 繼發組和原發組不同RSA 分期血清TGF-β1 和VEGF 水平比較(,ng/L)

表2 繼發組和原發組不同RSA 分期血清TGF-β1 和VEGF 水平比較(,ng/L)

注：與本組晚期比較,aP＜0.01

3 討論

RSA 誘發因素較多,包括感染、血型不合、宮頸發育不良、遺傳、情緒等,是導致不孕癥的主要因素［5］,目前相關作用機制尚未明確,但隨著深入研究,學者發現在胎盤形成過程中,血管生長因子起到重要作用,且近年來開始成為人們研究、關注的熱點［6］。通過動物實驗發現,正常妊娠的小鼠可產生Treg 細胞阻止自然流產發生,而胎盤血管發育可通過受體調節和多種生長因子調節完成,為了了解RSA 和血清因子的關系,本次便進行了深入研究。

VEGF 是一種糖基化多肽性分泌因子,屬于缺氧誘導分泌的細胞因子,對血管生長發揮較強的誘導作用,是由7 個內含子和8 個外顯子構成,編碼VEGF 基因長約14 kb,全長28 kb,基因位于染色體6p21.3 中［7］。可因為變剪切方式不同產生不同轉錄本和氨基酸數目,其中VEGF165 和VEGF121 以游離狀態下存在,屬于可溶性分泌型蛋白,是血管新生作用的主要因子,臨床有研究表明,VEGF 可上調纖溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)的表達,促進血管形成,誘導內皮細胞表達蛋白水解酶、組織因子、間質膠原酶。除此之外,VEGF 還能夠增加血管內皮細胞的倍增次數,延長血管內皮細胞壽命。另外還有學者發現,在整個妊娠階段,VEGF 表達可存在浸潤性絨毛膜滋養細胞和胎盤合體滋養細胞中,隨著妊娠期延長,VEGF 可出現明顯增加現象,在16 周后,可逐漸下降,在本次實驗中,繼發組、原發組早期VEGF 高于晚期組,差異具有統計學意義(P＜0.05),由此證實了此項研究報道,其與胎盤生殖發育時間吻合,進而說明,VEGF 在胎盤生長發育中起到重要調節作用。

TGF-β1具有較強的免疫抑制作用,屬于一種免疫調節劑,能夠有效抑制免疫活性細胞的增殖,調節細胞分化和生長,主要介導B 淋巴細胞抗體產生和增殖,預防對胎兒和滋養細胞造成繼發性損傷［8］。在本次研究中,繼發組早期TGF-β1低于晚期,VEGF 水平高于晚期,差異具有統計學意義(P＜0.01)；原發組早期TGF-β1低于晚期,VEGF 水平高于晚期,差異具有統計學意義(P＜0.01),說明當機體出現胎盤免疫損傷時,TGF-β1水平可出現明顯上升趨勢,且隨著疾病的惡化,尤其是在進入晚期后,TGF-β1濃度值可達到高峰期,而其濃度與RSA 患者分期呈正相關性,是目前衡量RSA 患者病情的另一個重要指標,能夠在一定程度上反映患者當前胎盤組織受損情況和機體炎癥反應。

綜上所述,血清VEGF、TGF-β1水平是參與RSA患者胎盤組織炎癥反應中的重要炎癥介質,且早期和晚期患者存在明顯差異,能夠在判定疾病中起到一定的作用,盡早實施血清VEGF、TGF-β1水平的監測,能夠改善不良結局。