噬菌體生物制劑在草魚細菌性疾病治療中的應用實例

杭小英 劉 莉 施偉達

(1.浙江省淡水水產研究所，浙江 湖州 313001；2.浙江省農業科學院，浙江 杭州 310021)

噬菌體是一種可入侵細菌內繁殖，最終使細菌裂解的病毒，又稱為細菌的“食者”。國內外很多研究表明，噬菌體對嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、副溶血弧菌、維氏氣單胞菌、遲緩愛德華氏菌等均有較好的裂解效果，特別對具有多重耐藥性的病原菌有較好的裂解效果。本實驗室于2018年從中華鱉養殖池塘中分離到一株寬譜噬菌體，經研究發現，它對嗜水氣單胞菌、副溶血弧菌等多種致病菌都具有較好的裂解作用，開始逐漸將其應用在實際生產中。

一、發病情況

2018年6月，湖州某家庭農場池塘循環水跑道養殖的草魚陸續出現趴邊、死亡等現象，草魚規格400～600克/尾。魚體表有出血點，有部分病魚在跑道攔網停留，游動緩慢，日死亡20～30尾。初期經鏡檢，發現有錨頭鳋感染，用藥后寄生蟲有所減少，但魚繼續死亡，治療效果不明顯。

二、病原分析

采集5尾瀕死魚帶回實驗室做進一步檢驗，解剖可見鰓發紅，肝、腎充血(圖1)，取肝、脾、腎組織平板劃線培養，分離純化得優勢菌，初步診斷為細菌性疾病。將分離的優勢菌作為測試菌，采用滴注法進行噬菌體噬菌效果的測定，結果發現噬菌體對分離菌株有顯著的裂解作用(圖2)。

圖1 患病草魚解剖

圖2 噬菌體對分離菌株的裂解作用

三、治療應用

將實驗室研制的噬菌體制劑按照飼料的5%添加，拌勻進行投喂，每天投喂兩次，同時潑灑敵百蟲用以殺滅寄生蟲錨頭鳋，連續5天。第3天病死魚開始減少，5天后停止死魚，病情得到有效控制。

四、分析總結

本實例中，我們用噬菌體制劑來治療草魚細菌性疾病，而不是常規的抗生素治療，同樣取得了良好的治療效果。除了治療疾病，噬菌體生物制劑可以按2%～3%添加在飼料中進行日常投喂，用以預防疾病。與傳統抗生素療法相比，噬菌體具有很多優勢：一是針對性強，抗生素在治療細菌性感染時，會殺滅水產動物消化道中的正常菌和有益菌，而噬菌體特異性強，不會給機體和環境中的其他有益菌群造成傷害；二是不會產生耐藥性，噬菌體通過感染－繁殖－裂解循環周期，最終使細菌裂解，與細菌耐藥性無關；三是無藥殘風險，使用抗生素會造成藥物在動物體內殘留，而噬菌體會隨著細菌宿主的消失而死亡，不會殘留在動物體內。總之，噬菌體生物制劑對治療細菌性疾病很有吸引力，是一種很有應用前景的抗生素替代療法。