白牛肝菌多糖對力竭運動大鼠骨骼肌2種ATP酶活性影響*

徐 濤，張春燕

（1.河南應用技術職業學院體育教學部，河南 鄭州 450042；2.廣西衛生職業技術學院，廣西 南寧 530021）

研究證實，機體大強度運動時，體內抗氧化系統的動態平衡被破壞，體內的自由基堆積，過量自由基攻擊細胞膜，造成細胞膜通透性的改變，膜內離子運轉紊亂，ATP合成困難，具體表現為機體的運動能力下降，造成機體運動性疲勞[1]。抑制運動性疲勞，提升運動能力，在運動醫學領域具有十分重要的意義。

白牛肝菌（Boletus griseus Forst）多糖是從牛肝菌中提取的活性物質。體外試驗表明，白牛肝菌多糖具有較強的抗氧化性，能結合體內Fe2+，消除自由基[2]。肖艷洪的研究也表明，牛肝菌多糖具有降低血糖的功效，對Ⅱ型糖尿病大鼠有較好的療效[2]。然而，牛肝菌多糖應用于醫學領域，在運動領域的有關研究相對較少。通過建立大鼠力竭游泳模型，觀察白牛肝多糖預處理對力竭運動大鼠體質量、力竭游泳時間、骨骼肌Na+/K+-ATP酶、Ca2+/Mg2+-ATP酶活性的影響，為牛肝菌多糖應用于運動領域提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及分組

30只清潔級雄性SD大鼠，8周齡，購自廣西醫科大學，體質量190 g～200 g。

大鼠喂養1周后，隨機分為安靜組、運動組、運動給藥組，每組10只。飼養室溫度24℃，通風，自然晝夜照明。

1.2 藥物與主要試劑

白牛肝菌，產于陜西鎮巴，稱取白牛肝菌子實體粉末10 g，按1∶15加入水，40℃超聲40 min，6 000 r·min-1離心10 min，收集上清液。上清液旋轉蒸發至原來體積1/3，加入4倍體積的95%乙醇，靜置過夜。收集沉淀，60℃烘干后得白牛肝菌多糖粗品，粉末含糖量為85%。

Na+/K+-ATP試劑盒、Ca2+/Mg2+-ATP試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3 主要儀器

自制大鼠游泳箱（100 cm×60 cm×80 cm，溫度30℃，底部安裝潛水泵，水流量100 L·h-1）；FSH-2高速電動勻漿機購自于中科生物醫學高科技開發公司；DL-46RC轉速冷凍機購自于中科生物醫學高科技開發公司。

1.4 動物訓練方案與給藥方案

訓練方案：安靜組每天正常飲食、進水，不進行運動。運動組與運動給藥組隔天進行一次力竭游泳練習（力竭判定：大鼠頭沉入水8 s左右，迅速撈起，放到桌面不能進行翻正反射），共計20 d。

給藥方案：運動給藥組每天上午9∶00～11∶00灌服牛肝菌多糖，劑量為50 mg·kg-1d-1（劑量有前期試驗制定，灌服前用生理鹽水將白牛肝菌多糖配置成50 mg·mL-1溶液），運動給藥組同等時間給予同體積生理鹽水。

1.5 動物取材和指標的測定

大鼠體質量的測定：末次訓練后，電子天平秤3組大鼠體質量。

大鼠力竭運動時間的測定：最后1 d訓練時，記錄運動組、運動給藥組組力竭運動時間。

大鼠骨骼肌Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP的測定：末次訓練后，大鼠斷頭處死，迅速去除小腿三頭肌，沖洗干凈后，吸干水份，4℃冰箱保存待測。稱取5 g骨骼肌組織，加入45 g生理鹽水，4℃，以6 000 r·min-1離心20 min，取上清液，4℃冰箱保存待測。

Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP的測定采用定磷法。測試過程嚴格按試劑盒說明進行。

1.6 統計學處理

2 試驗結果

2.1 各組大鼠體質量、運動能力的比較結果

與安靜組相比，運動組、運動給藥組體質量降低，差異具有統計學意義（P＜0.05）；與運動組相比，運動給藥組體質量、力竭游泳時間延長，差異具有統計學意義 （P＜0.05），見表 1。

表1 各組大鼠體質量、力竭運動時間的比較Tab.1 Comparison of body mass and exhausting exercise time of rats in each group

從表1可以看出，力竭運動導致大鼠體質量下降，白牛肝菌多糖能抑制大鼠體重下降，提升大鼠運動能力。

2.2 各組大鼠Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP活性的比較結果

與安靜組相比，運動組、運動給藥組Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP活性均降低，差異具有統計學意義（P＜0.05）；與運動組相比，運動給藥組Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP活性均升高，差異具有統計學意義 （P＜0.05），見表 2。

表2 各組大鼠Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP活性比較Tab.2 Comparison of Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP activity in each group of rats

從表2可以看出，力竭運動導致大鼠骨骼肌Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP酶活性降低，而白牛肝菌多糖能抑制這種現象。提示白牛桿菌多糖對能維持細胞膜的結構完整，正向調理細胞膜上Na+、K+、Ca2+、Mg2+運轉。

3 討論

以往的研究中，通過體質量的變化情況，了解機體對訓練的適應，訓練對機體的影響程度[4]。有研究證實，大強度運動導致機體質量下降，影響機體的運動能力[5-6]。本研究中，運動組體質量下降，運動給藥組體質量較運動組上升，說明牛肝菌多糖能促進機體生長發育，抑制大強度運動導致的體質量下降趨勢。力竭運動時間是衡量機體運動能力、體抗疲勞能力重要指標。本研究中，運動給藥組力竭游泳時間明顯延長，說明牛肝菌多糖能提升機體的運動能力。

ATP酶（三磷酸腺苷酶）是細胞膜上的一種蛋白酶，是水解三磷酸腺苷（ATP） 釋放能量的催化酶，同時對維護物質離子跨膜運轉、合成利用等方面有重要的意義。Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP是2種重要的ATP酶，其作用是催化ATP合成分解，同時維持細胞膜電位及Na+、K+、Ca2+、Mg2+在細胞膜的正常分布、運轉[7-9]。許思毛[10]的研究中，大鼠經大負荷運動后，心肌組織中Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP酶酶活性降低，導致Na+、K+、Ca2+、Mg2+運轉出現紊亂。

本研究中，運動組Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP酶活性降低，運動給藥組較運動組Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP酶活性升高。結果提示牛肝菌多糖在一定程度能有效抑制大強度運動引起的Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP酶活性降低，維持細胞膜的結構完整與Na+、K+、Ca2+、Mg2+在細胞膜的正常分布。

4 結論

大強度運動導致機體體重下降、運動能力降低，腦組織氧化損傷。白牛肝菌多糖能提高ATP酶的活性，維持細胞膜內外離子的正常分布，同時促進機體生長發育，提升其的運動能力。