2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者GP73水平的檢測及臨床意義

杜慶瑋 高錦 李克誠 施軍平

我國非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）的患病率已逐年升高。NAFLD是代謝綜合征（MS）累及肝臟的表現，與肥胖、糖尿病、高血壓、高脂血癥等代謝性疾病密切相關［1］。其中2 型糖尿?。═2DM）與NAFLD 間有一定的內在關系，且相互影響，與一般人群比較，T2DM 患者中NAFLD 的發病率較高，約為45%~75%。早發現、早干預有利于疾病的預后，目前診斷和評估NAFLD/NASH 的組織學特征的金標準仍是肝臟活檢。肝活檢為有創檢查，存在抽樣誤差，可能導致某些并發癥。高爾基體蛋白（golgiprotein73，GP73）是一種主要表達于肝臟膽管上皮細胞的高爾基體Ⅱ型跨膜蛋白［2］，可作為早期診斷肝癌的特異性標志物［3］，有研究表明檢測慢性HBV 感染患者血清GP73 水平有助于肝纖維化程度的判定［4］。本文探討GP73 作為判斷T2DM 是否合并NAFLD 的發生及進展的血液學指標應用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017 年11 月至2018 年5 月浙江省瑞安市人民醫院就診的T2DM 患者30 例，男22例，女8 例；年齡17~70 歲，平均年齡（50±12）歲。非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）患者122 例，男84例，女38 例；年齡17~71 歲，平均年齡（44±13）歲。T2DM 合并NAFLD 患者41 例，男35 例，女6 例；年齡15~75 歲，平均年齡（49±15）歲。同時選取同期年齡、性別與病例組匹配的健康體檢者33 例為正常對照組（NC 組），其中男21 例，女12 例；年齡21~95 歲，平均年齡（46±15）歲。糖尿病的診斷標準符合中華醫學會糖尿病學分會2013 年版的中國2 型糖尿病防治指南，且均為初治患者。非酒精性脂肪肝的診斷標準符合中華醫學會肝病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組2010 年修訂的非酒精性脂肪肝肝病診療指南。排除標準：病毒性肝炎、酒精性肝病、中毒性肝炎、藥物性肝炎、自身免疫性肝炎、經治2 型糖尿病患者等。

1.2 方法 （1）肝臟硬度與血清肝功能指標的檢測：所有患者采用FibroScan 檢測儀（法國Echosens 公司生產）測量肝臟瞬時彈性硬度，采集受控衰減參數理論CAP 值和E 值，進行10 次成功檢測后采取中位數作為最終測定結果，肝臟硬度值（LSM）采?。╧Pa）表示。同時于當日采集靜脈血進行生化指標如丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、谷氨酰轉肽酶（GGT）等的檢測。（2）血清GP73 水平檢測：每位患者進行生化指標檢測采集的靜脈血，3500r/min 離心10min 后，吸取一份血清，-80°深低溫冰箱保存。采用ELISA 法測定血清GP73 水平，GP73 試劑盒購自北京熱景生物技術有限公司，檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作，顯色后使用瑞士帝肯sunrise 酶標儀進行比色分析。

1.3 統計學方法 采用SPSS 24.0 統計軟件。近似正態分布計量資料以（±s）表示，多組比較采用方差分析；非正態分布以M（Q1、Q3）表示，采用Kruskal-Wallis 檢驗。以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同人群血清GP73 水平的比較 NAFLD 組及T2DM 合 并NAFLD 組GP 73 檢 測 結 果 分 別 為（76.19±41.38）ng/ml 和（73.36±42.00）ng/ml， 較正常對照組（46.22±19.01）ng/ml 和單純T2DM 患者組（38.13±28.50）ng/ml 高，差異均有統計學意義（P<0.05）。NAFLD 患者組與T2DM 合并NAFLD 患者組以及單純T2DM 與健康體檢組血清GP73 水平差異均無統計學意義（P 均>0.05），見表1。

表1 各組患者GP73檢測結果比較（±s）

表1 各組患者GP73檢測結果比較（±s）

注：與NC組比較，* P<0.05；與T2DM組比較，△P<0.05

組別 n GP73（ng/ml）T2DM組 30 38.13±28.50 NAFLD組 122 76.19±41.38*△T2DM合并NAFLD組 41 73.36±42.0*△NC組 33 46.22±19.01

2.2 血清GP73 對非酒精性脂肪性肝病的診斷價值 采用ROC 曲線進行分析。ROC 曲線下面 積 為0.792（95%CI：0.733~0.843）（P<0.0001），見圖1。根據Youden 指數最大值為0.5248，將cut-off 值設定為59.22ng/ml，GP73 診斷NAFLD 的敏感性和特異性分別為69.94% 和82.54%。

圖1 GP73診斷NAFLD 的ROC曲線分析

2.3 GP73 與其他檢測指標的相關性分析 相關性分析結果顯示：GP73 與ALT、AST、GGT、CAP、E 均呈正相關，相關系數分別為r=0.221、0.152、0.232、0.214、0.285，差異均有統計學意義（P<0.05）。見圖2。

圖2 血清GP73與ALT、AST、GGT、CAP和E的相關性

3 討論

2000 年美國學者Kladney 等［2］發現GP73 在肝癌患者中顯著升高，可作為肝癌的一個血清標志物［3-4］。此后，國內外眾多學者研究發現，GP73 不僅在肝癌中高度表達，在其他一些肝病中也顯著升高。如Iftikhar 等［5］學者發現在急性肝炎、慢性丙型肝炎病毒感染、自身免疫性肝炎及酒精性肝病患者中GP73 也有不同程度的升高，且在急性肝炎與自身免疫性肝炎中升高尤為顯著。

NAFLD 已取代慢性乙型肝炎成為我國最常見的慢性肝?。?］，NAFLD 和2 型糖尿病作為代謝綜合征的組成成分，常相伴存在，越來越多證據顯示NAFLD與T2DM 是相互影響、相互作用的［7-10］。魏紅山等［7］研究表明肝細胞脂肪變會導致血清GP73 水平顯著升高。本資料結果顯示，與正常對照及單純T2DM 患者比較，NAFLD 及T2DM 合并NAFLD 患者GP73 水平顯著升高，差異有統計學意義，而GP73 在T2DM 組與健康體檢組間差異無統計學意義，表明GP73 的升高與非酒精性脂肪性肝病有關，與單純2 型糖尿病無關。以健康體檢和單純T2DM 為對照組，利用ROC 曲線分析GP73 對NAFLD 的診斷效能，結果顯示曲線下面積為0.792（95%CI：0.733~0.843），表明血清GP73 水平作為NAFLD 的診斷指標有一定的臨床意義。余紅艷等［11］研究顯示，2 型糖尿病促使NAFLD 向非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纖維化、甚至肝細胞癌發展，增加肝臟相關死亡率。應筱雯等［12］研究顯示，GP73與肝纖維化及血清HA 水平呈正相關，且纖維化越嚴重GP73 表達水平越高。本資料結果顯示，GP73 水平與評估肝纖維化程度的肝臟瞬時彈性檢測的E 值［13］呈正相關（P<0.05），提示GP73 可作為NAFLD 患者發生肝臟纖維化的預估指標。本資料結果顯示，血清GP73 與ALT、AST、GGT 等指標均呈正相關，可能原因為肝細胞損傷觸發GP73 水平上升，但相關系數不高。與許文芳等［14］的研究結果一致。

綜上所述，GP73 在NAFLD 及T2DM 合并NAFLD患者中均升高，且與肝細胞損傷與肝纖維化有關，GP73 作為診斷NAFLD 的指標敏感度和特異性尚可，可作為判斷T2DM 是否合并NAFLD 及發生肝纖維化進展的一項血清學指標。