妊娠期糖尿病孕婦胎盤組織Akt 和GLUT-1 的表達與新生兒體重的相關性

楊小燕， 文麗， 張桂麗

（深圳市龍華區人民醫院 婦產科， 廣東 深圳518109）

妊娠期糖尿病 （GDM） 是指孕婦孕前糖代謝正常， 孕期發生糖耐量異常的綜合性疾病［1］。 GDM 一般無顯著的臨床癥狀，血糖升高程度也較低， 但子宮內的高血糖環境會使孕婦發生產后出血、 子癇等并發癥［2］， 還會導致胎兒發育過度、 體重增加。 導致GDM 的主要因素是產婦年齡過高、 孕前身體質量過高、 不良孕育史及糖尿病家族史［3］， 但與此有關的機制研究卻很少。 本研究探討GDM 孕婦胎盤組織Akt 和GLUT-1 的表達與新生兒體重的相關性， 現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2017 年9 月至2018 年2 月收治的40例GDM 孕婦為研究組， 平均年齡 （30.16 ± 4.36） 歲， 體重56.5 ～78.0 kg， 平均體重 （69.8 ± 5.3） kg。 另選取40 例同期分娩的健康孕婦作為對照組， 平均年齡 （28.36 ± 4.12） 歲， 體重54.5 ～75.0 kg， 平均體重 （67.7 ± 5.6） kg。 兩組的一般資料比較無統計學差異 （P ＞0.05）。 兩組孕婦均知情同意， 孕24 ～28 周行OGTT 實驗。

1.2入選標準 納入標準： ①符合國際妊娠糖尿病研究協會（IADPSG） 推薦的GDM 診斷標準［4］； ②單胎； ③待產天數正常。 排除標準： ①孕前心、 肺、 腎等功能不全； ②死胎或巨大兒病史； ③備孕或懷孕期間服用過干擾糖代謝藥物， 代謝性疾病； ④子癇等并發癥。

1.3 方法①孕期基本體征： 以邁瑞Mindray BS-220 全自動生化分析儀檢測兩組孕婦的空腹血糖 （FPG）、 空腹胰島素（FINS）； 檢測糖化血紅蛋白 （HbA1c）， 記錄孕期增重， 計算其身體質量指數 （BMI）， BMI ＝體重 （kg） ／身高的平方 （m2）。②檢測兩組胎盤組織中Akt、 GLUT-1 的表達： 采用免疫組化法檢測胎盤組織中的Akt、 GLUT-1 的表達水平， 取分娩后1.0 cm × 1.0 cm × 1.0 cm 母體胎盤組織進行固定、 包埋、 切片、 切片脫蠟水化、 抗原修復、 脫水等操作， 透明后進行封片， 鏡檢。 以Image J 分析免疫組化結果， 計算平均光密度值。 ③Western blot 檢測Akt 磷酸化水平及GLUT-1 蛋白的表達： 取胎盤組織60 mg， 通過Western 細胞裂解液離心獲得上清液， 按照BCA 試劑盒所示步驟進行， 檢測Akt 和GLUT-1 蛋白表達，然后采用BandScan 5.0 分析獲得的目的蛋白條帶。

1.4 統計學方法采用SPSS 24.0 統計軟件處理數據， 計量資料以±s 表示， 比較采用t 檢驗， 以Pearson 法進行相關性分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組孕婦的基本資料比較研究組的孕期BMI、 孕期增重、FPG、 FINS、 HbA1c 水平均高于對照組 （P＜0.05）。 見表1。

表1 兩組孕婦的基本資料比較 （±s）

表1 兩組孕婦的基本資料比較 （±s）

注： 與對照組比較， *P ＜0.05。

HbA1c（%）研究組 40 24.59±4.23* 8.71±1.08* 4.49±0.71* 22.45±1.58* 7.23±2.16*對照組 40 22.49±4.72 7.01±0.99 3.54±0.62 10.31±1.06 5.19±1.58組別 n 孕期BMI（kg／m2）孕期增重（kg）FPG（mmol／L）FINS（μIU／mL）

2.2 兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1的表達情況與新生兒出生體重比較兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 均有呈棕黃色顆粒的陽性細胞。 研究組陽性顆粒著色較淺且顆粒小， 平均光密度值均顯著低于對照組 （P＜0.05）。 研究組的新生兒出生體重高于對照組 （P＜0.05）。 見表2。

表2 兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 的表達情況與新生兒出生體重比較 （±s）

表2 兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 的表達情況與新生兒出生體重比較 （±s）

注： 與對照組比較， *P ＜0.05。

組別 n Akt 平均光密度值 GLUT-1 平均光密度值 新生兒出生體重（kg）研究組 40 79.65±3.15* 112.16±2.64* 3.89±0.42*對照組 40 94.86±2.49 135.47±3.26 2.79±0.61

2.3 兩組孕婦胎盤組織中Akt、 GLUT-1與新生兒體重的相關性Pearson 相關性分析顯示， Akt 表達與新生兒體重呈負相關（r ＝-0.697， P ＝0.035）， GLUT-1 表達與新生兒體重也呈負相關性 （r ＝-0.768， P ＝0.029）。 見表3。

表3 兩組孕婦胎盤組織中Akt、 GLUT-1 與新生兒體重的相關性

3 討論

胰島素抵抗是GDM 的標志性特征， 胰島素信號通路改變及葡萄糖轉運異常是胰島素抵抗的原因［5］。 研究［6］表明，GLUT 異常表達與GDM 的發生具有緊密的聯系， miR-518d 可能通過抑制GLUT1、 GLUT4 表達使葡萄糖轉運發生變化， 從而產生胰島素敏感性。 張莉等［7］的研究表明， AKT-mTOR 信號通路可影響蛋白質轉運功能， 從而影響胎兒生長發育， 宮內高血糖環境可能通過抑制AKT-mTOR 信號通路改變胎兒發育軌跡。 胎盤是母親和嬰兒之間進行物質傳遞的主要通道， 而葡萄糖是胎兒發育過程中不可或缺的一類營養物質［8］。 作為胰島素信號通路中的關鍵因子， Akt 和GLUT-1 在機體信號轉導和葡萄糖轉運方面發揮極大的作用［9］。 Akt 又稱為PKB， 是機體內一種極其重要的信號轉導途徑， 其能在胰島素刺激下磷酸化，并在一系列生化反應下激活GLUT， 進行葡萄糖轉運［10］。 作為參與葡萄糖轉運的GLUT-1， 在GLUT 中具有最豐富的表達量且分布最為廣泛， 主要存在于微絨毛側的細胞滋養細胞、 合體滋養細胞［11］， 是胎盤中最主要的葡萄糖轉運載體， 在葡萄糖轉運中發揮最主要的作用［12］。 GDM 孕婦血糖升高會影響這兩種信號因子的合成， 造成表達水平降低， 從而導致其對胰島素敏感性降低， 引發胰島素抵抗。 本研究結果顯示， 與對照組比較， 研究組的孕期BMI、 孕期增重、 FPG、 FINS、 HbA1c、 新生兒體重較高， Akt、 GLUT-1 表達較低， 且Akt 和GLUT-1 表達均與新生兒體重呈負相關， 表明Akt 和GLUT-1 表達水平的下降可能是新生兒體重上升的原因。

綜上所述， 妊娠期孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 表達水平的下降可能是造成新生兒體重上升的原因， 其機制可能是GDM 孕婦出現胰島素抵抗， 從而影響Akt 和GLUT-1 的表達，使胎兒蛋白質及脂肪的合成過量， 體重上升。