化學發光免疫分析法與酶聯免疫吸附測定法對HBV感染者血清乙肝標志物的檢測效果比較

焦陽，李靖

(確山縣人民醫院 檢驗科，河南 駐馬店 463200)

乙型肝炎為常見病毒性肝炎，由乙型肝炎病毒(HBV)感染所致，可引發肝硬化、肝癌等并發癥，嚴重危害患者健康，故臨床應選擇科學檢測方式，早期診斷，積極防治。HBV感染后，機體免疫系統會發生特異性反應，血清乙肝抗原及抗體水平明顯改變，準確測定HBV感染者血清學指標對早期診斷、評估預后有重要價值[1]。酶聯免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)和化學發光免疫分析法(chemilumineseent immunoassay，CLIA)均為常用血清學指標檢測方式，其檢測效果存在一定差異，各有優缺點。本研究選取60例HBV感染者，探討ELISA、CLIA的檢測效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年10月至2019年11月于確山縣人民醫院就診的60例HBV感染者為研究對象，其中女26例，男34例，年齡25～68歲，平均(46.73±10.54)歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 選取標準(1)納入標準：①經HBV病毒標記物、肝功能檢查確診，符合《慢性乙型肝炎中醫診療指南》[2]診斷標準；②納入者對本研究知情，簽署同意書。(2)排除標準：①合并心、肺、腎等器官功能障礙；②合并肝硬化、酒精性肝炎、其他病毒感染性肝炎。

1.3 檢測方法

1.3.1檢測試劑、儀器 儀器：酶標儀(美國伯樂，BIO-RAD MODEL550)，全自動化學發光儀(美國雅培，ARCHITECT-11000)。CLIA試劑盒購自美國雅培公司，批號分別為：26372LI00、28066LF00、26356LI00、27295LF00。ELISA試劑盒購自上海科華生物工程股份有限公司，批號分別為201306012、201303051、201306022、201307032、201307032。

1.3.2具體檢測方法 取6 mL清晨空腹靜脈血，離心10 min(3 000 r·min-1，半徑10 cm)，分離取血清，分兩等份，-20 ℃保存待測。分別以CLIA法、ELISA法測定乙型肝炎核心抗體(hepatitis B core antibody，HBcAb)、乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(hepatitis B surface antibody，HBsAb)、乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)、乙型肝炎e抗體(hepatitis B e antibody，HBeAb)水平。

1.4 陽性判定標準血清乙肝抗原及抗體上限值：HBcAb為0.7 PEI U·mL-1，HBsAg為0.05 IU·mL-1，HBsAb為10.0 mIU·mL-1，HBeAg為0.1 PEI U·mL-1，HBeAb為0.15 PEI U·mL-1。CLIA、ELISA測定值≥上限值判定為陽性。

1.5 觀察指標(1)比較CLIA、ELISA對乙肝抗原及抗體陽性檢出率。(2)比較CLIA、ELISA對低水平HBsAg(0.06～3.00 IU·mL-1)檢出率。

1.6 統計學方法采用SPSS 22.0統計軟件處理數據。計數資料以率(%)表示，行χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乙肝標志物檢出率CLIA對HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率分別為65.00%(39/60)、68.33%(41/60)、38.33%(23/60)，高于ELISA對三者的檢出率[48.33%(29/60)、53.33%(32/60)、23.33%(14/60)]，差異有統計學意義(均P<0.05)。CLIA對HBcAb、HBsAb陽性檢出率分別為71.67%(43/60)、61.67%(37/60)，與ELISA檢測陽性率[65.00%(39/60)、58.33%(35/60)]比較，差異無統計學意義(均P>0.05)。

2.2 低水平HBsAg檢出率60例HBV感染者中共32例HBsAg處于低水平。HBsAg水平0.06～0.50 IU·mL-1時CLIA檢出率高于ELISA，差異有統計學意義(P<0.05)。HBsAg水平0.51～3.00 IU·mL-1時CLIA、ELISA檢出率差異無統計學意義(均P>0.05)。見表1。

表1 CLIA與ELISA對低水平HBsAg檢出率比較(%)

注：與CLIA檢測比較，aP<0.05；ELISA—酶聯免疫吸附測定，CLIA—化學發光免疫分析法。

3 討論

乙肝早期癥狀不明顯，易出現漏診及誤診，造成病情惡化，嚴重影響患者身心健康[3]。臨床應及時選擇科學有效的檢測方式，以提高早期診斷率，積極防治，改善預后。

ELISA為血清學指標物的重要檢測手段，具有簡單、經濟、快捷等優勢，在診斷疾病、評價療效中有積極意義，但其易受孵育時間、洗板等因素影響，可出現非特異性反應，干擾檢測穩定性。另外，ELISA檢測原理為酶顯色，檢測精密度低，待測抗體、抗原水平過低時，吸光度過小，易影響檢測準確性[4]。CLIA依照底物發光強度實施檢測分析，能充分結合免疫技術、化學發光技術，避免抗體突變影響。另外，其標記物來源豐富，可識別各變異株，減輕人為因素干擾，提高準確性[5]。本研究結果顯示，與ELISA檢測比較，CLIA對HBsAg、HBeAb、HBeAg陽性檢出率均較高，且當HBsAg水平為0.06～0.50 IU·mL-1時CLIA檢出率高于ELISA，可見CLIA、ELISA均可有效檢測血清乙肝抗原及抗體水平，且與ELISA比，CLIA檢出率更高，可為臨床早期診斷、病情防治提供相關數據支持。

綜上所述，采用ELISA、CLIA法均能有效檢測血清乙肝抗原及抗體水平，CLIA的檢測效果及準確度更高，有助于臨床診斷、監測病情，采取防治措施。