百菌清雜質(zhì)六氯苯和十氯聯(lián)苯的分析方法研究

宋 輝

（江蘇新河農(nóng)用化工有限公司，江蘇新沂 221400）

六氯苯和十氯聯(lián)苯是在百菌清生產(chǎn)過程中形成的氯化雜質(zhì)，屬于持久性的很難被降解的有機(jī)污染物，易于在生物體內(nèi)和環(huán)境中積累，并且是一種對(duì)人體有害的能夠致癌的有害物質(zhì)。國際糧農(nóng)組織FAO標(biāo)準(zhǔn)將百菌清中雜質(zhì)六氯苯和十氯聯(lián)苯的含量進(jìn)行控制，并且對(duì)其含量要求越來越嚴(yán)格。國家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T 9551-2017）規(guī)定采用液相色譜法對(duì)六氯苯和十氯聯(lián)苯的含量同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，但該方法檢測(cè)靈敏度較低，百菌清中低含量的六氯苯和十氯聯(lián)苯的含量無法準(zhǔn)確定量。本方法采用靈敏度更高、選擇性更好的氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)百菌清雜質(zhì)六氯苯的含量進(jìn)行分析測(cè)定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀：Agilent 7890B/5977B氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀，MassHunter工作站，萬分之一分析天平，超聲波振蕩器。

1.2 試劑

六氯苯標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%；十氯聯(lián)苯標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.5%；甲苯：色譜純，分析無干擾物。

1.3 色譜操作條件

色譜柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；溶劑延遲：5min；程序升溫：初始溫度60℃（1min），40℃/min 升溫至180℃，20℃/min 升溫至280℃（3min）；進(jìn)樣體積：1.0μL；柱流量：1mL/min；分流比：30∶1；離子源：EI；采集模式：SIM；進(jìn)樣溫度：220℃；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；傳輸線溫度：280℃；碰撞能量：70eV。

1.4 實(shí)驗(yàn)步驟

1.4.1 標(biāo)樣溶液配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：分別稱取六氯苯標(biāo)樣和十氯聯(lián)苯標(biāo)樣0.01g（準(zhǔn)確至0.000 1g）于100mL容量瓶中，加甲苯溶解，并稀釋至刻度，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)溶液：用移液管移取上述0.4ml的溶液A于100mL容量瓶中。加入甲苯稀釋至刻度，搖勻。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取試樣約0.2g（準(zhǔn)確至0.000 1g）于10mL容量瓶中，加甲苯溶解，并稀釋至刻度，搖勻。

1.4.3 測(cè)定方法

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針響應(yīng)值，直至相鄰兩針的響應(yīng)值變化小于5.0%，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的進(jìn)樣順序進(jìn)行測(cè)定。

1.5 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液中的六氯苯/十氯聯(lián)苯的峰面積和試樣前后的兩針標(biāo)樣溶液中六氯苯/十氯聯(lián)苯峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中六氯苯/十氯聯(lián)苯的含量X(μg/g)按下式計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中的六氯苯/十氯聯(lián)苯峰面積的平均值；A2為試樣溶液中的六氯苯/十氯聯(lián)苯峰面積的平均值；m1為標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；w為標(biāo)準(zhǔn)樣品中六氯苯/十氯聯(lián)苯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

百菌清原藥中雜質(zhì)組分多且沸點(diǎn)范圍寬，在滿足六氯苯與其他雜質(zhì)有效分離的同時(shí)，盡量縮短十氯聯(lián)苯的流出時(shí)間，是本方法色譜條件選擇的關(guān)鍵。通過多次實(shí)驗(yàn)，最終選擇DB-5MS毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm），并通過調(diào)整氣相色譜程序升溫，使六氯苯達(dá)到最大程度分離的同時(shí)，十氯聯(lián)苯也在適宜的時(shí)間流出。

2.2 質(zhì)譜條件的選擇

對(duì)六氯苯和十氯聯(lián)苯的定性分析采用全掃描模式（Scan），在全掃描方式下獲得六氯苯、十氯聯(lián)苯的總離子流譜圖，定量測(cè)定采用選擇離子模式（SIM）。本方法選擇相對(duì)豐度強(qiáng)，碎片離子質(zhì)量較大，且相互干擾少的特征離子進(jìn)行SIM檢測(cè)。對(duì)于六氯苯，以m/z 283.8作為定量離子時(shí)，由于樣品基質(zhì)對(duì)其干擾較大，故選擇豐度較次之的m/z 285.8離子作為六氯苯檢測(cè)的定量離子；對(duì)于十氯聯(lián)苯，選擇豐度強(qiáng)且無干擾的m/z 497.7和499.7作為定量離子。

2.3 方法的線性相關(guān)性

分別配成0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.6μg/mL的6個(gè)不同濃度的六氯苯、十氯聯(lián)苯混合標(biāo)樣溶液。按上述色譜條件分別進(jìn)樣，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，在濃度范圍內(nèi)，六氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和吸收峰面積之間有良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=15 666x+17.072，相關(guān)系數(shù)r=0.999 2，線性相關(guān)圖（圖1）。十氯聯(lián)苯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和吸收峰面積之間有良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=13 305x-1.810 8，相關(guān)系數(shù)r=0.999 4，線性相關(guān)圖（圖2）。

2.4 方法的精密度試驗(yàn)

分別稱取6個(gè)平行試樣（準(zhǔn)確至0.000 1g），測(cè)得百菌清中雜質(zhì)六氯苯的含量為0.025μg/g，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.15%，變異系數(shù)為6.0%，具體數(shù)據(jù)見表1。

圖1 六氯苯線性相關(guān)性圖

圖2 十氯聯(lián)苯線性相關(guān)性圖

表1 百菌清中雜質(zhì)六氯苯和十氯聯(lián)苯含量精密度測(cè)定結(jié)果

2.5 方法準(zhǔn)確度的測(cè)定

在已知含量的樣品中，分別加入不同體積的的六氯苯和十氯聯(lián)苯混合標(biāo)樣溶液，按照上述方法進(jìn)行6次加標(biāo)回收率的測(cè)定。結(jié)果表明，六氯苯的回收率為99.56%～100.63%，平均回收率為100.01%，十氯聯(lián)苯的回收率為99.02%～100.47%，平均回收率為99.77%，結(jié)果見表2。

表2 百菌清中雜質(zhì)六氯苯和十氯聯(lián)苯含量準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

本方法的準(zhǔn)確度和精密度較高，線性關(guān)系良好，且分離效果也能滿足產(chǎn)品的檢驗(yàn)要求，可適用于百菌清中雜質(zhì)六氯苯和十氯聯(lián)苯的含量控制檢測(cè)。