冠心寧注射液配伍穩定性研究

張睿智，丁艷譜，李響明*，宋娜娜，張 旭，郝欣嶺，孫勝斌

(1.神威藥業集團有限公司，河北 石家莊 051430；2.中藥注射劑新藥技術開發國家地方聯合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

冠心寧注射液是由丹參、川芎提取精制而成的無菌水溶液，具有活血化瘀、通脈養心的功效。臨床上發現冠心寧注射液對心血管疾病、腦血管疾病、呼吸系統疾病、腎病有一定的治療效果[1]。冠心寧注射液中主要含有丹參酚酸類成分和糖類成分[2]。現代藥理學研究表明，冠心寧注射液具有擴張冠狀動脈、增加冠脈血流量、改善心肌缺血、改善微循環、抑制血液凝固、促進纖溶、改善血流變指標的作用。

隨著冠心寧注射液在臨床上的廣泛應用，因配伍引發的不良反應時有發生，其配伍研究也逐漸引起重視。目前冠心寧注射液的配伍研究中稀釋劑的選擇，除了說明書中已經明確的5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液外，文獻報道的還有10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、復方氯化鈉注射液[3]，其配伍穩定性研究的監測項目主要有外觀性狀、pH值、紫外吸光度、不溶性微粒[4-5]、細菌內毒素[6]。黃良永等[7]發現冠心寧注射液與5%葡萄糖注射液配伍后不溶性微粒數量與配伍液的放置時間和兩者配伍的比例有關。現在關于配伍的研究中，冠心寧注射液中有效物質酚酸類成分的變化鮮有報道，因此本研究中除了性狀、pH值、不溶性微粒、紫外吸光度等的監測外，還增加了滲透壓摩爾濃度比、酚酸類成分的含量測定。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

冠心寧注射液(神威藥業集團有限公司提供)；5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液(石家莊四藥有限公司)；丹參素鈉對照品(110855-201614，98.1%)、原兒茶醛對照品(110810-201608，99.3%)、迷迭香酸對照品(111871-201706，90.5%)、丹酚酸B對照品(111562-201716，94.1%)、阿魏酸對照品(110773-201614，99.0%)，以上對照品均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純；三氟乙酸為分析純。

1.2 儀器

U3000高效液相色譜儀(戴安公司)；CPA225D電子天平(Sartorius)；FE20酸度計(梅特勒-托利多)；不溶性微粒測定儀(天津市天大天發科技有限公司)；紫外可見分光光度計(日本島津公司)；電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)；滲透壓摩爾濃度測定儀(天津天河醫療器械有限公司)。

2 方法

2.1 配伍方法

冠心寧注射液質量標準[8]中[用法與用量]中已明確“靜脈滴注。一次20～40 mL，用5%葡萄糖注射液或0.9%氯化鈉注射液250～500 mL稀釋后使用，一日1次”[6]。為了提高滴注的順應性，降低疼痛反應的發生率，我公司在產品說明書中“建議滴速小于40滴/分，一般控制在15～30滴/分”。

因此本研究確定冠心寧注射液的稀釋液為5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液，分別考察最小濃度、最大濃度時的配伍穩定性。結合滴速，可計算出最長滴注時間為11.6 h，最短滴注時間為2.4 h。綜上，本研究分別取20 mL冠心寧注射液與500 mL稀釋液(5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液)在超凈臺下配伍，取40 mL冠心寧注射液與250 mL稀釋液(5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液)在超凈臺下配伍，配伍后在室溫下靜置12 h，分別在0、1、2、4、6、12 h觀察配伍液的性狀，測定配伍液的pH值、不溶性微粒、摩爾滲透壓比、吸光度。

2.2 檢測方法

2.2.1 性狀 目視，靜置一定時間后觀察配伍液的顏色，是否有氣體產生，有無渾濁或沉淀。

2.2.2 pH值 取配伍液，按《中國藥典》2015年版四部通則0631測定pH值。

2.2.3 不溶性微粒 取配伍液，按《中國藥典》2015年版四部通則0903測定不溶性微粒。

2.2.4 滲透壓摩爾濃度 取配伍液，按《中國藥典》2015年版四部通則0631測定滲透壓摩爾濃度比。

2.2.5 吸光度 精密量取配伍后的藥液，加水稀釋至每1 mL相當于丹參2 mg的溶液。照紫外-可見分光光度法《中國藥典》2015年版四部通則 0401)，取相應濃度的配伍稀釋液同法稀釋相同的倍數后作為空白，在200～600 nm波長范圍內掃描。

2.2.6 總酚酸 參照冠心寧注射液現行質量標準(WS3-B-3267-98-2012)中[含量測定]總酚酸的方法測定。取低濃度的配伍液用水稀釋20倍，高濃度的配伍液用水稀釋50倍后，搖勻即得供試品溶液。分別以相應的配伍稀釋劑稀釋相同倍數后為空白，測定其在280 nm處的吸光度。分別以相應的配伍稀釋劑稀釋相同倍數后作為空白溶液，測定其在280nm處的吸光度，代入標準曲線計算。

2.2.7 丹參素鈉、原兒茶醛、阿魏酸、迷迭香酸和丹酚酸B 參照冠心寧注射液現行質量標準(WS3-B-3267-98-2012)中[含量測定]丹參素鈉、原兒茶醛、阿魏酸、迷迭香酸和丹酚酸B的方法測定。取配伍后的稀釋液，過濾，取續濾液即得供試品溶液。分別精密吸取供試品溶液10～25 μL注入液相色譜儀，測定，即得。

3 結果

根據“2.1”項下方法配伍后，分別于放置0、1、2、4、6、12 h后按照“2.2”項下方法檢測，得出試驗結果。見表1、表2、表3。

表1 配伍液的性狀及pH值的變化

表2 配伍液的不溶性微粒及滲透壓摩爾濃度的變化

續表2

配伍方式冠心寧注射液批號/用量(mL)不溶性微粒(粒/mL)粒徑01h2h4h6h12h滲透壓摩爾濃度比01h2h4h6h12h0.9%氯化鈉注射液500mLGXN-1/20≥10μm≥25μm4181713140911.11.01.11.01.11.0GXN-2/20≥10μm≥25μm4191516180711.01.01.01.01.21.0GXN-3/20≥10μm≥25μm4150803191601.01.11.11.01.11.15%葡萄糖注射液250mLGXN-1/40≥10μm≥25μm3120213140411.11.11.11.11.11.1GXN-2/40≥10μm≥25μm3131413040511.11.11.11.11.11.1GXN-3/40≥10μm≥25μm1131415031411.01.01.11.11.01.10.9%氯化鈉注射液250mLGXN-1/40≥10μm≥25μm5170816140711.11.01.11.11.11.1GXN-2/40≥10μm≥25μm81419161100501.21.11.21.11.01.1GXN-3/40≥10μm≥25μm5171508131601.21.11.11.01.11.2

表3 配伍液的吸光度變化

表4 配伍液的含量變化

續表4

配伍方式冠心寧注射液批號/用量(mL)含量測定(mg/mL)總酚酸丹參素鈉原兒茶醛阿魏酸迷迭香酸丹酚酸B0h12h0h12h0h12h0h12h0h12h0h12h0.9%氯化鈉注射液500mLGXN-1/200.740.700.0560.0550.0150.0140.0020.0020.0080.0080.0150.015GXN-2/200.750.730.0570.0590.0150.0150.0020.0020.0090.0090.0160.016GXN-3/200.630.600.0540.0510.0140.0130.0020.0020.0080.0070.0120.0115%葡萄糖注射液250mLGXN-1/402.602.590.2030.2000.0520.0510.0080.0080.0300.0300.0550.054GXN-2/402.722.620.2080.2060.0540.0520.0080.0080.0320.0300.0570.057GXN-3/402.272.220.1940.1930.0500.0480.0070.0060.0280.0280.0410.0400.9%氯化鈉注射液250mLGXN-1/402.642.630.1970.1970.0510.0510.0080.0080.0300.0300.0540.054GXN-2/402.662.630.1960.1990.0510.0520.0080.0080.0300.0300.0540.057GXN-3/402.292.220.1930.1930.0500.0480.0060.0060.0280.0280.0410.041

從以上3個表中的數據可知，將冠心寧注射液分別與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液配伍成兩種濃度后，在超凈臺下室溫連續放置12 h，配伍液未發生變色、產氣、渾濁或沉淀的現象，配伍液始終呈微黃色、淺黃色的澄明液體；pH值、摩爾滲透壓比穩定，12 h內幾乎無變化。與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液配伍后，相同濃度的配伍液pH值、摩爾滲透壓比稍有差異，這與所用的稀釋劑不同有關。不溶性微粒數目主要取決于稀釋劑中不溶性微粒的水平，放置過程中配伍液不溶性微粒數目無顯著變化。配伍液在200～600nm波長范圍內掃描，發現在(283±2)nm處有最大吸收，且在12 h內吸收度值穩定。本研究還測定了配伍液中有效成分的含量，放置12 h后總酚酸、丹參素鈉、原兒茶醛、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B含量相對穩定。本次研究表明冠心寧注射液與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液配伍穩定。

4 討論

不溶性微粒可引起肉芽腫、肺水腫、靜脈炎、變態反應、熱原樣反應、血栓、組織壞死、腫瘤樣反應等，還可能沉積在肝、脾與骨髓中對人體造成危害。因此不溶性微粒成為配伍穩定性研究的重點監測項目。在本研究中發現配伍液的不溶性微粒測定時容易受微小氣泡“假粒”的干擾，尤其是配伍混合初期容易出現不溶性微粒偏多的結果。參考文獻中[9]的方法超聲、真空脫氣，均可有效排除“假粒”，提高測定結果的準確性。

由于各種藥物的藥理作用不同，臨床上常常聯合用藥以達到良好的治療效果，但又因藥物的理化性質不同，配伍后可能出現變色、產氣、渾濁甚至沉淀。目前文獻中已經明確的與冠心寧注射液有配伍禁忌、不適宜配伍的藥物有甘草酸二胺注射液[10]、鹽酸罌粟堿注射液[11]、喹諾酮類藥物[12-13]乳酸環丙沙星[14-15]、鹽酸左氧氟沙星[16-17]、氟羅沙星[18]、甲磺酸加替沙星[19]、甲磺酸培氟沙星。臨床醫護人員需清楚地了解存在配伍禁忌、不適宜配伍的藥物，科學配伍，從根源上降低不良反應的發生率；此外制劑生產企業還應根據目前發現的配伍禁忌信息及時修訂說明書中用藥注意事項等安全性信息，以指導臨床配伍。