傳統(tǒng)及趁鮮加工工藝對桔梗飲片質(zhì)量的影響

王 斌，梁偉龍，林欽賢*，郭長達，郝建新

(1.廣州市香雪制藥股份有限公司，廣東 廣州 510663；2.亳州市滬譙藥業(yè)有限公司，安徽 亳州 236800；3.寧夏隆德縣六盤山中藥資源開發(fā)有限公司，寧夏 固原 756300)

桔梗為桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根[1]，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[2]，列為下品。桔梗在我國大部分地區(qū)均有分布，主要分布于安徽、河南、湖北、云南、吉林、四川等地[3]，其味苦、辛，性平，具有宣肺、利咽、祛痰、排膿的功效，主要有效成分為三萜皂苷[4-5]，現(xiàn)代藥理研究表明桔梗皂苷D為主要的鎮(zhèn)咳成分[6]。

目前桔梗飲片仍沿用傳統(tǒng)加工方式，即鮮品干燥成藥材后，再軟化切制成飲片。該加工模式耗時耗力，且在軟化過程中容易導(dǎo)致有效成分的損失，影響飲片的質(zhì)量。2019年7月26日，河北省藥品監(jiān)督管理局印發(fā)《關(guān)于支持醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的若干政策措施》提到“允許企業(yè)采購趁鮮切制的中藥材”[7]，但關(guān)于桔梗趁鮮切制加工工藝的研究較少，難以保證中藥飲片質(zhì)量安全穩(wěn)定，本文就桔梗趁鮮加工工藝進行研究，以桔梗皂苷D、浸出物含量為評價指標(biāo)，比較傳統(tǒng)加工工藝及趁鮮加工工藝，探討桔梗趁鮮切片的可行性。

1 儀器、試藥及材料

1.1 儀器

QWZL-150D型直線往復(fù)式切藥機(臺州博大制藥機械科技有限公司)，RHP-100型高速多功能粉碎機(浙江永康市榮浩工貿(mào)有限公司)，DHG-9245A型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)，HWS26型電熱恒溫水浴鍋(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)，XS204型電子天平(d=0.1 mg，Mettler Toledo)，MS603S型電子天平(d=1 mg，Mettler Toledo)，KQ-500DA型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，DIONEX Ultimate 3000高效液相色譜儀(ELSD檢測器)。

1.2 試藥

桔梗皂苷D(111851-201607，中國食品藥品檢定研究院，純度94.0%)，乙腈(色譜純，merck)，甲醇、正丁醇、乙醇等均為分析純，超純水。

1.3 材料

桔梗藥材于2019年7月30日采于云南省德欽縣，經(jīng)廣州香雪制藥股份有限公司康志英高級工程師鑒定為桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.干燥根。

2 方法與結(jié)果

2.1 傳統(tǒng)加工工藝制備飲片

將采集的桔梗鮮品洗凈，除去須根，60 ℃干燥處理加工成藥材，再按《中國藥典》方法處理：洗凈，潤透，切厚片(4 mm)，60 ℃烘至水分合適。

2.2 趁鮮加工工藝制備飲片

將采集的桔梗鮮藥材除去須根及泥土等雜質(zhì)，平均分成2份，剝?nèi)ネ馄せ虿蝗ネ馄ぃ泻衿?4 mm)，60 ℃烘至水分合適。

2.3 浸出物含量的測定

取各桔梗樣品粗粉約2 g，精密稱定，置150 mL的錐形瓶中，精密加乙醇50 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取濾液25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量，計算樣品中浸出物的含量(%)。

2.4 桔梗皂苷D含量的測定

2.4.1 色譜條件 依利特SinoChrom ODS-BP(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動相：乙腈-水(25∶75)，檢測器：ELSD檢測器，流速：1 mL/min，柱溫：30 ℃，進樣量：5 μL、10 μL。在此條件下，桔梗皂苷D分離較好，HPLC色譜見圖1。

A：對照品；B：供試品；C：空白對照；1：桔梗皂苷D

2.4.2 對照品溶液的制備 取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得。

2.4.3 供試品溶液的制備 取本品粉末(過二號篩)約2 g，精密稱定，精密加入50%甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)30 min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25 mL，置水浴上蒸干，殘渣加水20 mL，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨試液50 mL洗滌，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水50 mL洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇3 mL使溶解，加硅膠0.5 g拌勻，置水浴上蒸干，加于硅膠柱100～120目，10 g，內(nèi)徑為2 cm，用三氯甲烷-甲醇(9∶1)混合溶液濕法裝柱上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)混合溶液50 mL洗脫，棄去洗脫液，再用三氯甲烷-甲醇-水(60∶20∶3)混合溶液100 mL洗脫，棄去洗脫液，繼用三氯甲烷-甲醇-水(60∶29∶6)混合溶液100 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.4.4 線性關(guān)系考察 將標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進樣1、3、5、7、10、15 μL檢測，以進樣量為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，進行回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=1.547X+1.3419，r=0.999 3，說明桔梗皂苷D在0.022 1～2.535 μg之間有較好的線性關(guān)系。

2.4.5 精密度試驗 取對照品溶液，按上述色譜條件重復(fù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果：桔梗皂苷D的峰面積RSD為0.7%，說明儀器精密度良好。

2.4.6 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24 h進樣檢測，測定桔梗皂苷D峰面積，結(jié)果：峰面積RSD為1.4%，說明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.7 重復(fù)性試驗 取同一批藥材，制備供試品溶液6份，按色譜條件項進樣分析，測定峰面積，結(jié)果：峰面積的RSD為1.0%，說明方法重復(fù)性良好。

2.4.8 加樣回收試驗 精密稱取同一批次已知含量的樣品1 g，共6份，按1∶1加入桔梗皂苷D對照品適量，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，按上述色譜條件進樣10 μL，記錄峰面積，計算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 桔梗皂苷D回收率試驗

2.5 樣品測定

按照上述實驗方法，測定兩種加工工藝所得的桔梗飲片中浸出物及桔梗皂苷D的含量，結(jié)果見表2。采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件，對浸出物及桔梗皂苷D含量進行單因素方差分析，結(jié)果表明，趁鮮與傳統(tǒng)加工工藝所得的桔梗飲片中浸出物及桔梗皂苷D含量的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，趁鮮加工工藝所制得的飲片中浸出物及桔梗皂苷D含量均明顯高于傳統(tǒng)加工工藝所得的飲片，且趁鮮加工工藝省時省力。結(jié)果提示，趁鮮加工工藝優(yōu)于傳統(tǒng)加工工藝，這也在一定程度上證實了桔梗趁鮮切片的可行性。

表2 含量測定結(jié)果 (%)

3 結(jié)論與討論

本研究說明，趁鮮加工工藝制得的飲片中浸出物及桔梗皂苷D的含量均高于傳統(tǒng)加工工藝所得的飲片，且兩種工藝所制得的飲片浸出物及桔梗皂苷D的含量均符合《中國藥典》的要求，此外，趁鮮加工工藝省去了桔梗由鮮品加工成藥材及藥材再軟化的步驟，省時省力且降低了有效成分的損失，因此，趁鮮加工工藝具有一定的可行性及優(yōu)越性。

同時，桔梗是否刮皮是規(guī)范炮制工藝的一個關(guān)鍵性的問題，研究中發(fā)現(xiàn)，去皮桔梗浸出物及桔梗皂苷D的含量均高于帶皮桔梗，這與石俊英、許傳蓮等人[8-9]研究的結(jié)論一致，因此建議桔梗趁新鮮除去栓皮，除去栓皮后不但有效成分較高，且易于干燥，藥材及飲片色澤潔白、美觀。