腎透明細胞癌中KIF4A的表達及其對患者術后生存的預測價值

鄭鵬毅 高中偉 李文勝 李會兵 肖 飛 王曉輝 王凱旋 李志軍

腎臟腫瘤是臨床較常見的惡性腫瘤，其發(fā)生率在人類泌尿系統(tǒng)腫瘤中排名第3位，占惡性腫瘤的3%[1]。腎透明細胞癌是腎臟腫瘤中較常見的一種，其發(fā)生率主要集中在年齡50～70歲[2]。據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計[3]，腎透明細胞癌發(fā)病率中男性高于女性，且最近幾年呈遞升趨勢。目前關于腎透明細胞癌發(fā)生機制尚未完全明確，與遺傳、吸煙、肥胖和污染等因素有關。大部分腎透明細胞癌患者早期無明顯癥狀，30%的患者確診時已發(fā)生轉(zhuǎn)移或發(fā)展[4]。近期關于分子在腎透明細胞癌發(fā)生和發(fā)展的研究逐漸增加，有利于揭示其發(fā)生機制[5]。驅(qū)動蛋白超家族成員 4A(KIF4A)是染色體驅(qū)動蛋白家族成員之一，在前列腺癌、肝癌中均表達異常，且表達程度與其病情呈負相關，但是否在腎透明細胞癌中表達尚未完全明確。本文選擇醫(yī)院2012年1月至2016年12月收治的腎透明細胞癌患者70例,分析KIF4A的表達情況對根治性腎切除術后患者生存的預測價值，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇醫(yī)院2012年1月至2016年12月收治的腎透明細胞癌患者70例。納入標準：①符合歐洲泌尿外科學會(EAU)腎癌指南(2020)關于腎透明細胞癌診斷標準；②病理診斷確診患者；③依從性較好的患者；④患者知情同意；⑤未接受手術、放化療的患者。排除標準：①肝腹水患者；②抑郁癥患者；③合并嚴重性基礎疾病患者；④妊娠期、哺乳期患者；⑤合并其他惡性腫瘤的患者；⑥80歲以上患者。男性45例，女性25例，年齡最小23歲，最大79歲，平均(43.64±7.43)歲，病程最短6個月，最長7年，平均(4.69±1.01)年。所有患者接受根治性腎切除術治療，由同一手術團隊完成手術。隨訪5年，統(tǒng)計患者生存時間。

1.2 方法

1.2.1 KIF4A表達檢測 術中獲取癌組織和癌旁組織(距離腫瘤3 cm)，石蠟包埋，連續(xù)切片后制成石蠟切片，置入烤箱中烘烤2 h，溫度為65攝氏度。經(jīng)常規(guī)脫蠟和脫水，使用檸檬酸鹽緩沖液洗滌，進行抗原修復。接著滴入兔抗人KIF4A 多克隆抗體后將放入免疫組化濕化盒中，4℃孵育12 h 后所有切片室溫放置30 min，PBS 沖洗3 次，每次5 min。繼續(xù)于切片組織上滴加二抗孵育30 min，PBS漂洗3次，每次5 min。進行蘇木精再次復染。陽性標準：細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒。使用PBS代替一抗，作為陰性對照組。每張片切在400倍光學顯微鏡下隨機選擇5個視野，計算200個細胞染色情況。采用評分方式進行評定，陽性標準：9～12分。

1.2.2 臨床病理特征收集 查看患者病案信息，統(tǒng)計患者的性別、年齡、臨床分期、Fuhrman核分級、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移情況。

1.2.3 評價分析方法 分析癌組織和癌旁組織中KIF4A陽性表達情況及KIF4A表達與腎透明細胞癌臨床病理特征的關系，探討KIF4A表達對預后的影響。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 腎透明細胞癌組織和癌旁組織中KIF4A陽性表達情況

腎透明細胞癌組織中KIF4A陽性率為54.28%(38/70)，高于癌旁組織14.29%(10/70)(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=17.632,P<0.001)。

2.2 腎透明細胞癌KIF4A表達與臨床病理特征的關系

KIF4A表達與年齡、臨床分期、Fuhrman核分級、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移有關(P<0.05)，與性別無關，見表1。

表1 腎透明細胞癌KIF4A表達與臨床病理特征的關系分析/例

2.3 腎透明細胞癌 KIF4A表達對預后的影響

隨訪5年，KIF4A陰性表達患者平均生存時間為(47.69±6.02)個月，陽性表達患者平均生存時間為(30.59±4.05)個月。KIF4A陰性表達患者平均生存時間長于陽性表達患者(P<0.05)。KIF4A表達對預后有直接影響，其陽性表達與生存時間呈負相關(P<0.05)。見表2。

表2 腎透明細胞癌 KIF4A表達與生存時間的關系分析

3 討論

腎癌臨床較常見，占成人惡性腫瘤2%，其中腎透明細胞癌是其主要病理類型[6-9]。以往研究結(jié)果顯示[10-11]，轉(zhuǎn)移的腎透明細胞癌患者5年生存率不足10%。20%～30%患者術后出現(xiàn)復發(fā)或轉(zhuǎn)移。腎透明細胞癌早期無明顯特異性癥狀，就診時大部分患者已是中晚期，錯失最佳手術時機。由于腎透明細胞癌對化療不敏感，因此療效不佳[12-14]。臨床需要尋找其他有效治療手段，其中對現(xiàn)代分子學的發(fā)展研究發(fā)現(xiàn)，多種生物學分子參與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[15-17]。KIF4A位于人染色體Xq13.1，是一種由1232個氨基酸構(gòu)成相對分子量為140000的蛋白。既往研究結(jié)果顯示[18]，KIF4A是基于微管的運動蛋白，其N末端為高度保守的ATP酶結(jié)合區(qū)域，中間區(qū)域是較長的α螺旋結(jié)構(gòu)，C 末端為富含半胱氨酸的球狀結(jié)構(gòu)。Mani N 等[19]發(fā)現(xiàn)，KIF4A蛋白分子參與了細胞分裂和細胞運動等活動，并參與DNA修復的同時在調(diào)節(jié)細胞周期進展和維持遺傳穩(wěn)定性方面上發(fā)揮重要作用。有研究[20-23]顯示，KIF4A陽性表達能保持細胞正常活動，有利于預后。

本文研究結(jié)果顯示，腎透明細胞癌組織KIF4A陽性率高于癌旁組，差異比較有統(tǒng)計學意義。該研究結(jié)果認為KIF4A在腎透明細胞癌中表達較高。同時，KIF4A表達在年齡、臨床分期、Fuhrman核分級、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移上不同，其中≥60歲、臨床分期(TNM)Ⅲ～Ⅳ期、Fuhrman核分級G3～G4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、≥7cm腫瘤患者的KIF4A陽性表達率較高，而陰性表達率較低。KIF4A陽性表達患者平均生存時間少于陰性表達患者。KIF4A表達對預后有直接影響，其陽性表達與生存時間呈負相關，其具體原因尚未完全明確，但認為該蛋白在判斷腎透明細胞癌術后預后有一定的潛在價值。

綜上所述，腎透明細胞癌中KIF4A表達在預測術后生存情況上有一定的潛在價值，但因研究結(jié)果尚存爭議，需要進一步探討。