p16和Ki67在宮頸脫落細胞中的表達及臨床意義探討

王燕 葉敏 高仁里

【摘 要】目的：研究p16和Ki67在宮頸脫落細胞中的表達和臨床意義。方法：在本院2019年1月至2019年4月收治的婦科病患者中選出1000例，均取宮頸脫落細胞進行p16/Ki67雙染檢測。結果：隨著宮頸病變程度加重，p16/Ki67雙染陽性率明顯提高，P<0.05，p16/Ki67單染陽性率變化則無明顯規律，P>0.05;其中p16/Ki67在非典型鱗狀細胞（不能除外上皮內高度病變）中細胞量少，提示有高度病變可能。結論：p16/Ki67雙染具體高度的敏感性和特異性，在宮頸高級別病變中陽性率明顯高于低級別病變及正常細胞，二者聯合檢測可作為宮頸脫落細胞的輔助手段，與宮頸細胞學檢查聯合應用，早期篩查宮頸癌和癌前病變。

【關鍵詞】p16;Ki67;宮頸脫落細胞;陽性率;宮頸癌;癌前病變

宮頸癌是發病率較高的女性生殖道腫瘤，嚴重危害女性的生命安全。特別是近幾年發病年齡趨于年輕化，越來越多的女性重視宮頸癌以及癌前病變的篩查，而在宮頸癌的篩查中，金標準的組織病理學檢查存在一定損傷，不利于廣泛應用，為了及早發現及早治療，改善預后[1-2]。目前應用最廣的便是新柏氏TCT細胞學檢測技術，但TCT檢測存在一定的誤差，靈敏度存在人為誤差，為了降低漏診率，近年來不少文獻報道指出抑癌基因（p16）、腫瘤增殖抗原（Ki67）與腫瘤的發生發展密切相關，發現在宮頸癌前病變、鱗癌活檢石蠟包埋組織中存在p16、Ki67陽性表達[3]。本研究探索p16和Ki67在宮頸脫落細胞中表達的意義，匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在本院婦產科2019年1月至2019年4月收治的婦科病患者中選出1000例，年齡23～71歲，平均（43.9±10.2）歲。

1.2 方法

對患者擴陰后將宮頸刷插入陰道，于宮頸鱗柱交界順時針旋轉5圈，將取得的宮頸脫落細胞放入保存液中。然后將宮頸脫落細胞制成液基薄層涂片，配制PBS緩沖液和抗原修復液，然后使用p16/Ki-67檢測試劑盒進行雙染檢測，操作流程為：抗原修復→繪制疏水圈→滴加內源性過氧化物酶阻斷劑→滴加p16/ki67一抗→滴加二抗→滴加顯色劑A→滴加顯色劑B→蘇木素復染→PBS返藍→晾片封片。

1.3 判定標準

p16/Ki67雙染陽性：薄片中見1個或1個以上細胞的細胞質呈紅色著色且同一細胞的細胞核呈棕黃色或紅褐色著色。p16單染色陽性：細胞質/細胞核均呈紅色著色。Ki-67單染色陽性：細胞核呈黃色或棕黃色著色，而細胞質不著色。染色陰性：不著色。

1.4 統計學方法

使用SPSS 21.0軟件檢驗數據資料，計數數據以率進行描述，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

見表1所示，隨著宮頸病變程度的加重，p16/Ki67雙染陽性率也隨之提高，P<0.05;其中p16/Ki67在非典型鱗狀細胞（不能除外上皮內高度病變）中細胞量少，p16/Ki67雙染的表達可以在非典型鱗狀細胞（不能除外上皮內高度病變）中起到提示作用，減少漏診率，大大增加了TCT檢測的陽性率。隨著宮頸病變程度加重，p16/Ki67單染陽性率的變化不具有顯著統計學差異（P>0.05）。

p16基因是直接參與到細胞周期調控中的抑癌基因，其對細胞有絲分裂起到負反饋調節作用[4]。在炎癥性宮頸病變或正常宮頸細胞中，p16呈陰性或弱陽性，但是隨著宮頸病變程度的加重，p16表達也會隨之升高，故而p16可作為宮頸癌及癌前病變嚴重程度的判定依據之一。Ki67抗原早在1983年被發現，是目前較為肯定的核增殖標識，其功能與細胞合成代謝有關，除了細胞G0期和G1早期外，其他各期均有Ki67抗原表達，在惡性腫瘤中呈高表達[5]。已有研究指出Ki67抗原與淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、頭頸腫瘤、消化系統腫瘤等的發生發展、浸潤、轉移、復發密切相關，可以作為診斷、療效預測的標志物。本研究結果顯示：隨著宮頸病變程度加重，p16/Ki67雙染陽性率隨之提高，P<0.05，在宮頸高級別病變和低級別病變中，p16/Ki67雙染陽性率差異有統計學意義，P<0.05;p16/Ki67雙染陽性率與宮頸病變程度密切相關。當p16和Ki67雙染色均為陽性者說明可能潛在高級別病變，這可以為臨床上患者的篩查項目進行分流，對于雙染色陽性者，可要求進一步進行陰道鏡檢查，以明確診斷。本研究結果顯示：隨著宮頸病變程度加重，p16/Ki67單染陽性率變化不規律，差異不具有統計學意義，P>0.05;許多研究中，p16、Ki67在宮頸良性反應性增生中也可表達，故而在宮頸病變中不宜單獨使用。

綜上所述，p16、Ki67在宮頸脫落細胞中的表達程度與宮頸鱗狀細胞病變嚴重程度密切相關，呈正相關，p16/Ki67聯合檢測可作為宮頸脫落細胞的輔助手段，與宮頸細胞學聯合應用，在宮頸癌和癌前病變篩查中應用。

參考文獻

[1] 王嬌，舒麗莎，陳書玲，等.P16、Ki67聯合細胞學檢查在宮頸脫落細胞中的診斷意義[J].中國婦幼保健，2016，31（10）：2176-2179.

[2] 張婷.P16、Ki67聯合細胞學檢查用于宮頸脫落細胞中的診斷價值探究[J].現代診斷與治療，2018，29（18）：2912-2914.

[3] 張瑤，袁思梅，朱丹陽，等.宮頸脫落細胞中P16、Ki67聯合細胞學檢測在意義不明確的非典型鱗狀上皮細胞診斷中的意義[J].現代實用醫學，2018，30（01）：91-93.

[4] 黃平，張雪，陳光元，等.p16、Ki67、PHH3和HPV-L1在宮頸脫落細胞中的表達及臨床意義[J].海南醫學，2016，27（21）：3464-3466.

[5] 雷蕾，葉斌，王西川.p16、p53和Ki67在宮頸癌中的表達及其臨床意義[J].實用醫院臨床雜志，2014，11（04）：123-125.