基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變診斷中的應(yīng)用觀察

韋拔雄 彭婧 陳月祿 陳碧君 鐘曉華

【摘要】 目的 對比不同類型的基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者診斷中的應(yīng)用效果。方法 58例乳腺疾病患者， 根據(jù)患者乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生類型不同分為普通增生組（乳腺導(dǎo)管普通增生性病變）與原位癌增生組（乳腺導(dǎo)管原位癌增生性病變）， 各29例。兩組患者均進(jìn)行CK5/6、WT1以及G1/S-特異性周期蛋白-D1（Cyclin D1）等基底型細(xì)胞角蛋白因子診斷， 觀察并對比兩組患者以上基底型細(xì)胞角蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 普通增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為26例， 占比為90%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為8例， 占比為28%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為1例， 占比為3%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為23例， 占比為79%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)占比顯著低于普通增生組， WT1陽性表達(dá)占比顯著高于普通增生組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=43.309、15.591， P=0.000、0.000<0.05）。原位癌增生組患者Cyclin D1表達(dá)水平（59.1±40.5）%顯著高于普通增生組的（22.5±27.8）%， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 采用CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子對乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行相關(guān)診斷， 可有效判斷患者內(nèi)增生性病變類型， 這對患者治療方案的制定具有重要輔助意義， 達(dá)到提高治療效果、保障患者身體健康、提高生活質(zhì)量的最終目的。因此， 該方法具有被臨床推廣使用的意義。

【關(guān)鍵詞】 基底型細(xì)胞角蛋白;乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變;診斷價(jià)值

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.12.030

乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型相對較多， 如平坦型上皮不典型性增生與導(dǎo)管原位癌導(dǎo)管增生類型等[1]。經(jīng)相關(guān)研究結(jié)果顯示， 該類疾病患者之間的診斷重復(fù)性相對較差， 無法得到較為精確的診斷結(jié)果。因此， 臨床對該疾病不同類型的乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變的臨床治療具有重大影響， 導(dǎo)致治療效果較低， 從而直接影響到患者的身體健康與生活質(zhì)量[2]。因此， 采取相應(yīng)的輔助診斷方式、有效辨別乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型對提高該疾病的治療效果和保證患者身體健康及提高其生活質(zhì)量具有重要意義[3]。隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步， 基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性類型疾病中的辨別應(yīng)用極為廣泛， 通過有效觀察患者CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子的表達(dá)情況， 可達(dá)到有效辨別乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型的效果[4]。本文主要探討基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者診斷中的應(yīng)用效果， 具體過程如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2019年3～12月在本院診斷治療的乳腺疾病患者58例， 根據(jù)患者乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生類型不同分為普通增生組（乳腺導(dǎo)管普通增生性病變）與原位癌增生組（乳腺導(dǎo)管原位癌增生性病變）， 各29例。普通增生組患者平均年齡（40.25±10.26）歲。原位癌增生組患者平均年齡（40.24±11.24）歲。兩組患者一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)本院相關(guān)研究結(jié)果顯示， 最終確診為乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變的患者;②對本次診斷研究知情， 且自愿簽署知情同意書的患者;③原位癌增生組均確診為乳腺導(dǎo)管原位癌增生性病變的患者， 普通增生組均確診為乳腺導(dǎo)管普通增生性病變的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全， 對本次研究意見不統(tǒng)一的患者;②病理切片沒有蠟塊的患者;③非典型乳腺增生性乳腺導(dǎo)管上皮增生性病變患者;④存在診斷禁忌證， 且依從性和配合性均相對較差的患者。

1. 3 方法 采用免疫組化染色方法對兩組患者進(jìn)行染色標(biāo)記處理， 免疫組化試劑一抗（CK5/6、WT1、Cyclin D1）、試劑盒（二抗）由基因科技（上海）提供， 采用免疫組化多聚物法（GK6007）進(jìn)行。具體染色步驟為：①切片常規(guī)切蠟并至水;②抗原修復(fù)方法為微波爐， EDTA+， 修復(fù)時(shí)間為20 min;③采用3%的過氧化氫對內(nèi)源性過氧化物酶做封閉處理， 同時(shí)進(jìn)行避光處理， 需在室溫下保持25 min;④采用磷酸緩沖鹽溶液（PBS）進(jìn)行洗滌處理， 次數(shù)為2次， 5 min/次;⑤滴加一抗（CK5/6、WT1、Cyclin D1）， 工作稀釋度為1∶100， 時(shí)間為120 min， 溫度為37℃;⑥采用PBS進(jìn)行洗滌處理， 次數(shù)為2次， 5 min/次;⑦ 滴加EnVision二抗工作液， 時(shí)間為40 min， 溫度為37℃;⑧采用PBS進(jìn)行洗滌處理， 次數(shù)為2次， 5 min/次;⑨進(jìn)行DAB顯色， 適當(dāng)時(shí)終止顯色， 并采用自來水洗滌;⑩采用蘇木素進(jìn)行復(fù)染， 時(shí)間為3 min， 后采用自來水沖洗;采用1%的鹽酸酒精進(jìn)行分化， 時(shí)間為3 s， 后采用自來水沖洗反藍(lán)15 min;切片后常規(guī)脫水至透明;封片判斷染色結(jié)果。

1. 4 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 觀察并對比兩組患者CK5/6、WT1以及Cyclin D1等因子的表達(dá)情況。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者CK5/6陽性和WT1陽性表達(dá)情況對比 普通增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為26例， 占比為90%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為8例， 占比為28%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為1例， 占比為3%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為23例， 占比為79%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)占比顯著低于普通增生組， WT1陽性表達(dá)占比顯著高于普通增生組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=43.309、15.591， P=0.000、0.000<0.05）。見表1。

2. 2 兩組患者Cyclin D1表達(dá)情況對比 原位癌增生組患者Cyclin D1表達(dá)水平顯著高于普通增生組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

乳腺屬于性激素的靶器官， 當(dāng)乳腺受到內(nèi)分泌環(huán)境的影響時(shí)會呈現(xiàn)出周期性的變化， 而當(dāng)變化環(huán)境出現(xiàn)擴(kuò)大或者性刺激機(jī)會增多時(shí)， 不同程度上促進(jìn)“動情素”分泌， 進(jìn)而造成患者雌激素增多和孕酮減少[5]。當(dāng)出現(xiàn)這一情況時(shí)， 患者極其容易出現(xiàn)乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生， 容易對患者的日常生活與工作造成影響， 大大降低其生活質(zhì)量， 因此， 臨床對該疾病的治療極為關(guān)注。但乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型相對較多， 且各類型判定相對復(fù)雜， 容易對治療結(jié)果造成不良影響。而對患者進(jìn)行相應(yīng)的早期臨床診斷， 根據(jù)診斷結(jié)果為患者實(shí)施針對性的治療， 可達(dá)到提高治療效果、保障患者身體健康的目的。因此， 采用有效的診斷方法對乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行疾病類型診斷、對疾病治療方案的制定具有重要意義。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步， 乳腺定向干細(xì)胞以及基底型細(xì)胞角蛋白因子目前已成為乳腺病理學(xué)上的重點(diǎn)研究對象。不過至今臨床醫(yī)學(xué)對乳腺中的細(xì)胞構(gòu)成仍然存在一定程度上的爭議， 但基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管增生性疾病患者疾病類型的輔助診斷中卻已取得了廣大醫(yī)療學(xué)者的認(rèn)同。因此， 目前臨床醫(yī)學(xué)上多采用基底型細(xì)胞角蛋白因子的表達(dá)情況對乳腺導(dǎo)管增生性疾病患者進(jìn)行早期診斷， 以此達(dá)到有效判別患者最終疾病類型， 并根據(jù)判別結(jié)果實(shí)施正確治療方法， 提高治療效果的最終目的。

在傳統(tǒng)觀念中， 正常乳腺導(dǎo)管主要是由外皮肌上皮和內(nèi)層腺上皮構(gòu)成， 在乳腺導(dǎo)管普通內(nèi)增生性病變患者中增生成分相對復(fù)雜， 主要為肌上皮、腺上皮和大汗腺細(xì)胞混雜分布而成， 通過CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子進(jìn)行染色處理， 能夠?qū)颊哒Ｈ橄俳M織以及乳腺癌組織進(jìn)行有效研究， 并通過基底型細(xì)胞角蛋白因子對正常乳腺上皮中存在的CK細(xì)胞群進(jìn)行表達(dá)標(biāo)記[6-8]。臨床醫(yī)學(xué)可通過表達(dá)標(biāo)記情況有效區(qū)分正常乳腺上皮與乳腺癌組織上皮情況， 進(jìn)而判斷乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型情況。

采用CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子對乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行相關(guān)診斷， 診斷效果顯著。乳腺導(dǎo)管內(nèi)普通增生性病變患者與乳腺導(dǎo)管原位癌增生患者比較， 原位癌增生患者WT1陽性表達(dá)占比顯著高于普通增生性病變患者， CK5/6陽性表達(dá)占比顯著低于普通增生性病變患者， Cyclin D1的表達(dá)水平明顯高于普通增生性病變患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述， 采用CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子對乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行相關(guān)診斷， 可有效判斷患者內(nèi)增生性病變類型， 這對患者治療方案的制定具有重要輔助意義， 能達(dá)到提高治療效果、保障患者身體健康、提高生活質(zhì)量的最終目的。因此， 該方法具有被臨床推廣使用的意義。

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[收稿日期：2020-02-17]